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细胞百科

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为什么要使用原代肝细胞?

原代肝细胞肝脏,是脊椎动物体内以代谢功能为主的器官,也是人的五脏之一。肝脏能促使一些有毒物质的改进,再排泄体外,从而起到解毒作用。它是人体内的一座 “化工厂”,是新陈代谢的重要器官。但同时,肝脏也十分脆弱,过度的酒精、药物带来的毒性也会对其造成不可逆的损伤。因此无论在疾病研究、药物研发,或是环境安全等的研究中,对肝脏进行研究都至关重要。在这些研究中使用原代肝细胞,往往是最佳的选择。因为原代细胞离体时间短,保持了其在体内的 ...

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实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一 室。2、常用设施及设备(1)超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式、直流式和外流式三大类。(2)无菌操作间:一般由更 ...

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实用哺乳动物细胞培养手册(下)

细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清洗组织细胞培养中,使用量最大的是玻璃器皿,故工作最最大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四 ...

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实用哺乳动物细胞培养手册(上)

细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结 构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。(2) 疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿 瘤疫苗(多肽疫苗)等。(3) 基因工程药物研究与开发:如干扰 ...

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【求助】细胞裂解黏黏的

sn党参 请问我将细胞离心后加入细胞裂解液后变得黏黏的,能拉出丝是怎么回事呢,细胞是K562/a.,裂解液是tris,SDS(0.4g),定容至100ml,用时加酶抑制剂sn党参 此外请问我要研究的是细胞膜蛋白,请问需要离心吗,有说法说离心后膜蛋白是在沉淀里面的,请问离心是为了去除核酸吗,如果不去除,会有什么影响,谢谢xhjggl 黏黏的是完整基因组的缘故,可以超声或匀浆,提取膜蛋白,可以用以下产品本文由丁香园论坛提供,想了解更 ...

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[原创]菌体/细胞裂解法汇总

由于上次求助无人回应,一气之下遍找资料,汇总出菌体/细胞裂解的常用方法和配方,希望能对其它求助兄弟有所帮助。菌体/细胞裂解法汇总一、反复冻融法:1、将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。http://cache.baidu.com/c?word=%B4%F3%B3%A6%3B%B8%CB%BE%FA%2C%C1%D1%BD%E2&url=http%3A//www% ...

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Autophagy(自噬)

自噬是近年来很热门的领域,搜了一下园子,发现没有这方面系统的介绍或讨论,但很多战友有这方面的疑问,加上本人最近对此也非常感兴趣,因此,借本版来专门讨论一下自噬(说实在的,自噬属于丁香园哪一个版块的范围我也选不好),与各位同行或有志于研究自噬的战友共同学习,也欢迎大家提出自己的看法,本人的目的就是交流。自噬的过程——从一张图片开始:步骤1:细胞接受自噬诱导信号后,在胞浆的某处 ...

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细胞培养室的建立与环境设计

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm细胞培养室是提供细胞生物学研究的基础实验室,有500m2的实验场地,拥有4个层流的细胞操作间、6个普通培养操作间,及配套实验室和洗涤消毒室。主要设备:超净工作台10台,forma细胞培养箱7台,普通倒置显微镜8台,普通生物显微镜5台,荧光显微镜- ...

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MS基本培养基

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htmMS基本培养基大量成分1 (mg/l)化学成分 含量 扩大倍数 母液称量 定容 吸取量硝酸钾(KNO3) 1900 50 ...

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培养细胞的观察检测方法

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm活细胞的观察检测方法培养细胞常用的染色方法细胞生长状况有关指标的检测方法细胞生物活性的有关化学检测方法电子显微镜技术一、活细胞的观察检测方法细胞在体外培养过程中需要每天观察,以便及时了解细胞生长状态、数量改变、细胞形态、细胞有无移动、有无污染、培养 ...

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培养基的选择

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm原载于:刘进平,莫 饶主编. 热带植物组织培养. 北京:科学出版社,2006;刘进平. 植物细胞工程简明教程. 北京:中国农业出版社,2005;郑成木,刘进平主编. 热带亚热带植物微繁殖. 长沙:湖南科学技术出版,2001培养基的选择选择基本培养基 ...

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细胞培养一般方法

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm1.玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;2.无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;3.培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按1 ...

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培养基母液配制

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm培养基配制通常先根据各组分性质,配制成较浓的母液(母液浓度为培养基浓度的若干倍如50或100倍),贮存在冰箱中备用,以后配制培养基时根据用量量取。由于培养基成分较多,如果每配制一次即进行多次称量(不少成分用量较微),不仅会造成较大的误差,而且会增加 ...

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培养基的配制和灭菌

以1000 ml “MS + 3.0 mg/l NAA + 0.5%(即5 g/l)琼脂 + 3%(即30 g/l)蔗糖”为例。第一步:准备好配制培养基的一切用具和试剂。第二步:称量5 g琼脂和30 g蔗糖,溶解在大约所要配制培养基 2/3~3/4左右体积(约600~750 ml)的(蒸馏)水中,加热溶解,不时搅拌,避免出现琼脂生块和泡沫。第三步:根据用量,用量简或移液管从母液中取出所需量的大量元 ...

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体外培养细胞

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm一、所谓细胞培养(Cell culture)是指细胞包括单个细胞在体外条件的生长。组织培养的发展史已有近百年,最初的组织培养是胚胎学和微生物学的引申,建立于无菌原则上,用天然体液(如胎汁、血浆)来维持从整体切下的组织块,对细胞进行形态和功能的观察。 ...

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豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的分离培养与鉴定

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm魏运军张学渊  (第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉科重庆400038)  提 要: 目的 建立稳定可靠的耳蜗微血管内皮细胞分离培养方法。方法 采用显微解剖法分离出耳蜗血管纹组织块培养法进行体外培养。结果 接种后2 d 部分组织块边缘有散在的细胞生长 ...

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细胞培养污染对策及预防方法

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm概论§污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。§一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。(一)污染的类型§细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培 ...

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DMEM细胞培养基的成分

DMEM(A) 细胞培养基(粉末型)成分 序号 化合物名称 含量 (mg/L) 序号 化合物名称 ...

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原代细胞培养实验

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm实验目的和要求:掌握无菌操作技术。了解小鼠解剖操作技术。了解原代细胞培养的一般方法与步骤了解培养细胞的消化分散。了解细胞计数方法。了解倒置显微镜的使用。实验原理:原代细胞培养是将机体内的某组织取出,分散成单细胞,在人工条件下培养使其生存并不断生长、 ...

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流感病毒细胞分离培养

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm一、组织培养概况(一)组织培养定义组织或细胞培养是指从机体中取出组织或细胞,模拟机体内的生理条件在体外进行培养,使之生存和生长。(二)、组织培养的原理组织培养主要是为病毒易感的组织细胞提供一个良好的生存环境,使细胞对环境产生适应性,获得生长繁殖的能 ...

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