基因蛋白组

——专访深圳华因康基因科技有限公司创始人盛司潼博士

引言本实验所用基因传递系统（基因枪）原理： 低压基因递送系统（GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1），根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计，是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图 1 中所示，当左侧出现输入气体压力时（如：氦气），两个腔室之间将形成巨大的压力差，一旦该气体穿过装载样品的咽喉处，GDS-80 中的气体输出将为生物粒子提供足够的动能量，使它们加速到接近超音速的速度（约 300m/s）。在加速过程中 ...

基因枪的历史可以追溯到 1987 年。第一代基因枪是台式基因枪，其中火药型台式基因枪是基因枪中最原始的类型。最早的基因枪是由美国康奈尔大学 Sanford 于 1987 年与该校工程技术专家 Wolf 及 Kallen 合作研究出的一种基因转移的新方法。该方法一经发明便在学界崭露头角，Klein 等人于 1987 年最早应用基因枪进行洋葱表皮细胞的转化，并获得了成功。基因枪自 1987 年诞生以来得到迅速发展。美国康乃尔大学自 1988 年先后申报了三个关于基因枪技术的专 ...

电泳法，是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。 电泳技术的基本原理和分类 在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积 ...

以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离同工酶及其亚型，大分子核酸等应用较广，介绍如下： ⒈琼脂糖凝胶电泳的原理概述 琼脂糖是由琼脂 ...

1.缓冲系统：在没有离子存在时，电导率最小，DNA不迁移，或迁移极慢，在高离子强度的缓冲液中，电导很高并产热，可能导致DNA变性，因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压电泳时，常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。 2.琼脂糖：不同厂家、不同批号的琼脂糖，其杂质含量不同，影响DNA的迁移及荧光背景的强度，应有选择地使用。 3.凝胶的制备：凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致，溶解的凝 ...

摘要： 分析粉状食品结块的机理，利用核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance，NMR）技术研究食品的结块与玻璃态转变温度、化学组成之间的关系，为延长食品的保质期提供理论基础。 食品结块问题在食品保藏中是一个急待解决的重要课题，而且在相关行业如：饲料、医药等，结块问题也普遍存在，它是影响产品质量和使用价值的一个重要因素。食品结块会产生很多不良现象，如：溶解度下降、油脂氧化程度提 ...

摘要： 本文就NMR与化学应用有密切关系的若干前沿新进展进行述评，内容包括NMR灵敏度的超增强，固体或表面化学反应的NMR跟踪以及简单分子体系中的超常NMR信号。这些方面分别涉及到NMR谱学技术的发展，新的应用领域的开拓及新的实验现象的阐明。 1995年是凝聚态核磁共振（NMR）发现50周年。NMR半个世纪的发展历史，向世人雄辩地证明了NMR在当代科学研究中不可替代的重要地位。NMR之所以能在当代 ...

摘要： 核磁共振（NMR）技术近年来发展突飞猛进，令人目不暇接。本文避开深奥的理论和技术，着重于新技术所能解决的问题。力争为应用工作者描绘一幅NMR发展现状的粗略轮廓。 前言 如果有人问最近几年在分析测试领域哪种技术发展最快的话，应首推NMR。假如有兴趣跟踪世界上该领域的进展，那么每一天几乎都有激动人心的事发生，新技术就象魔术一样不断涌现，来解决当今化学、医学和生物学等领域遇到的难题，去开拓原先难 ...

摘要： 核磁测井与实验室NMR研究的条件显著不同，要使核磁测井有足够的信噪比，关键问题是选择合适的设计及测量方案。核磁测井仪中多采用预极化方式或自旋回波法，所用的磁场已从最初的地磁场演变到现在的各种人工磁场，所用的测量方式要与采用的磁场设计相适应。现代核磁测井的测量技术已基本与实验室技术一致，核磁测井仪获取信息的能力也有了很大发展。 引言 石油测井中，到目前为止人们一直为不能直接获得束缚水饱和度、 ...

摘要： 从应用mq-20核磁谱仪测定聚丙烯等规指数的步骤开始，展开一系列试验，并将试验结果与国标（GB/T 2412-1980)测试下的结果作对比，找出影响其测试准确性的主要因素。 在聚丙烯的生产过程中，等规指数是一常用且重要的物性指标，是表征其加工性能及应用的重要指标。一般等规指数高的聚丙烯，其结晶度亦高。 传统的化学溶剂法（GB/T 2412-1980）测定等规指数，仅限于对聚丙烯粉料的测定， ...

NMR（Nuclear Magnetic Resonance）为核磁共振。是磁矩不为零的原子核，在外磁场作用下自旋能级发生蔡曼分裂，共振吸收某一定频率的射频辐射的物理过程。核磁共振波谱学是光谱学的一个分支，其共振频率在射频波段，相应的跃迁是核自旋在核蔡曼能级上的跃迁。 基本原理 自旋量子数I不为零的核与外磁场H0相互作用，使核能级发生2I+1重分裂，此为蔡曼分裂。核磁共振是1946年由美国斯坦福大 ...

核磁共振（NMR）在体内药物分析中，可用于药物及其代谢物的结构鉴定、代谢途径归属、定量分析以及药物与内源性物质相互作用的研究等。与其它分析方法相比，具有如下优点： ①简便性：无需对样品进行繁杂的提取或衍生化，减少了由此带来的误差； ②无损伤性：对取样量有限的生物样品经NMR分析后还可用于其它处理，甚至可对生物整体进行无损伤分析； ③连续性：NMR可对整体生物系统进行动态监测而不扰乱生物体内的各种平 ...

核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance），是指具有磁矩的原子核在静磁场中，受电磁波（通常为射频电磁振荡波RF）激发，而产生的共振跃迁现象。 1945年12月，美国哈佛大学珀塞尔（E. M. Purcell）等人，首先观察到石腊样品中质子（即氢原子核）的核磁共振吸收信号。1946年1月，美国史丹福大学布珞赫（F. Bloch）研究小组住在水样品中也观察到质子的核磁共振信号。两 ...

1、 注意磁场漂移问题，判断是否需采取必要防噪措施。 2、了解邻近实验室情况，是否有互相干扰或怕干扰的仪器，例如磁测量仪、变电箱。 3.、要求工程师确实能完成各种指标，例如C，H，F，P，N探头的信噪比。 4、附近不要有xrd衍射仪，透射电镜，还要远离震动大的机器。避免震动噪音污染。注意安装换气扇，空调，接空压机的乳胶管，毛巾，电吹风（塑料的），去问工程师吧。 5、仪器安装前，仪器供应商会给您安装 ...

获得蛋白质的晶体结构的第一个瓶颈，就是制备大量纯化的蛋白质（>10mg），其浓度通常在10mg/ml以上，并以此为基础进行结晶条件的筛选。运用重组基因的技术，将特定基因以选殖（clone）的方式嵌入表现载体（expression vector）内，此一载体通常具有易于调控的特性。之后再将带有特定基因的载体送入可快速生长的菌体中，如大肠杆菌（Escherichia coli），在菌体快速生长的 ...

掌握血清白蛋白和球蛋白测定的原理和方法，并用盐析法测定水产动物血清中白蛋白和球蛋白的含量。 血清中含有多种不同成分的蛋白质，主要为白蛋白和球蛋白。用盐析法沉淀血清中球蛋白，用双缩脲法测定上清液中白蛋白，同时测定血清总蛋白。血清球蛋白的量从两者的差值求得。 试剂： 1、球蛋白沉淀剂：称取硫酸钠（Na2SO4）208g，及亚硫酸钠（N ...

一、MTT比色法检测细胞活性 （一）原理 活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷，其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。 （二）试剂准备 1、 青链霉素溶液（100X）：青霉素100万U，链霉素100万U，溶于100mlddH2O中， 抽滤除菌。 ...

蛋白质序列分析和结构预测

D电泳分析和高通量自动化质谱仪进行人视网膜蛋白的分析鉴定。方法人视网膜组织在广东省眼库获取。基于视网膜蛋白的不同溶解度，可以用顺序提取法将不同的视网膜蛋白分离。在2-D电泳中，视网膜蛋白质按等电点（PH3-10）和分子大小被分离，部分作银色进行观察分析。另用Colloidal Coomassie 蓝进行染色，用PROTEINEER SP系统将96个大分子蛋白斑点筛选切除，PROTEINEER DP ...