色谱

1. 适用范围 本标准适用于BECKMAN 125型高效液相色谱仪的使用操作。 2. 目的与意义 规范BECKMAN 125型高效液相色谱仪的使用操作，保证高效液相测量结果的准确性。 3. 责任 质量分析人员全面负责本SOP的实施。 4. 仪器的组成 本系统由SYSTEM GOLD® 125溶剂输送泵、SYSTEM GOLD® 166检测器（190～360 nm）、Rheodyne ...

1 仪器组成与开机 1．1 本仪器由Class-VP工作站、在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱和检测器等部件组成。各部分的操作均可由工作站或液晶面板控制完成。 1．2 分别打开计算机、LC-2010A/C高效液相色谱仪的电源开关。 1．3 仪器约需3min时间完成自检过程，此时双击【Class-VP】快捷方式图标后，双击【Instrument l】可进入联机状态；双击【Offline Proc ...

1．目的 规范岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。 2．范围 适用于岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。 3．职责 质检员对本规程的实施负责。 4．规程 4.1 系统组成 本系统由1个LC-10ADvp溶剂输送泵、FCV-10AL低压梯度混合器、在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机 ...

1 按下稳压电源工作电源开关键至“ON”状态。依次接通P680型输液泵、ASI-100自动进样器、柱温箱、检测器、电脑。 2 更换蠕动泵清洗瓶中5%的甲醇(如果仪器经常使用则建议每周更换两次，如果仪器很少使用则每次使用前必须更换。) 3 确认洗针瓶中的洗液是否太少，若太少，则需补充或更换。洗液一般为：50%的甲醇。 4 排泵内气泡 4.1 拧松泵右侧的快速清洗阀（反时针两圈 ...

一、开机步骤： 1． 打开氮气总阀，将分压表调至0.2Mpa。再调节淋洗液瓶上分压表的分压至 5~6psi。 2． 接通 ICS－2000 主机电源，开启电脑，等待屏幕右下角出现图标后，启动桌面的图标，进入Broswer界面，找到“ICS－2000_Tradition_System_AS50.pan”文件并双击进入变色龙软件的仪器控制界面。 3． 排除泵内气泡： ...

一、开机前准备 1. 实验室温度应保持在10~30℃之间，湿度小于80%。 2. 根据实验要求，选择合适的柱子，按装柱子，准备相应的流动相并过滤脱气。 二、开机 1. 依次打开510泵、检测器和计算机电源开关，设定合适的波长和AUFS 值。 2. 双击桌面上的HS V4.0图标，进入工作站系统。 三、编辑LC分析方法 1. 双击“方案”图标，输入初始参数。 2. 双击HS ...

一．开机前准备 1．根据需要选择合适色谱柱。 2．在容器中放入已过滤脱气好的流动相，把吸滤过滤头放入容器中。二．开机 1．打开所需仪器的电源开关，打开氦气阀门。 2．等各仪器自检通过后，开微机进入Windows NT，双击millog.exe，进入millennium 32 工作站。 三．编辑仪器方法 1． 选择所需Project，run sample上击右键，选择所需仪器，联机。 2．点击 in ...

1.目的 建立一个大连依利特P230高效液相色谱仪的使用、维护保养标准操作程序，使操作过程标准化。 2.职责 质量部QC负责本文件的起草，质量部及QC检验人员负责本标准的实施。 3.范围 本标准适用于大连依利特P230高效液相色谱仪的使用、维护和保养。 4.内容 4.1 仪器组件、型号 4.1.1 仪器组成：P230高压输液泵、UV230紫外-可见检测器、EC2000色谱工作站。 4.1.2 电源 ...

一、高效液相色谱仪的结构： HPLC的出现不过三十多年的时间，但这种分离分析技术的发展十分迅猛，目前应用也十分广泛。其仪器结构和流程也多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示（图3－2）。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置（用双泵）、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。 1 ．高压泵 HPLC使用的色谱柱是很细的（1~6 mm），所用固定相的粒度也 ...

色谱法的分离原理是：溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary phase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906 年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法（Chromatography）因 ...

设计了一种零死体积的二通式柱尾结构和一种使匀浆填料均匀进入色谱柱管内的储料池，研究了制备内径在0.5 mm～1.0 mm的不锈钢宽口径填充毛细管液相色谱柱的方法。详述了以不同牌号、规格的反相ODS类固定相制备的不同柱长的色谱柱的性能。通过折合板高/折合流速关系和不对称因子对柱性能进行了评价，结果表明，该方法制备的色谱柱柱效达到理论值的75%以上、RSD为6%，稳定性也很好。将其应用于抗癫痫药物和氯 ...

反相色谱是迄今在高效液相色谱中应用最广泛的技术，主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和很多的可离子化的及离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质，因此，分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的，含有疏水的机制也能以同样的保留方式分离。 固定相上还有少数物质，如混合相（例如苯基-己基）、末端封闭和非末端封闭种类和极性嵌入相也存在于这些键合硅胶上。还有很多填料用于反相 ...

色谱柱的维护 1、使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）。 2、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。 3、避免流动相组成及极性的剧烈变化。 4、大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2～7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围。 5、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存乙腈中。 6、压力升高是需要更换预柱或冲洗色谱柱的信号。 系统注意事项 1、 ...

一、问：这段时间一直在做生物碱，流动相选择的是乙睛：0.02mol/l磷酸二氢钾（26：74），现在实验做完了，最后冲柱子。先长时间乙睛：水冲柱，再用甲醇：水冲柱，最后用甲醇冲柱。柱压一直很高，请问各位，是否不该这样冲柱？该怎样解决？ Jimmy_ok：乙睛和甲醇没有多大区别的，只是乙睛黏度小，对于柱子保护有利，当然价格也高些，个人感觉完全可以用甲醇替代冲柱（当然实验室有钱就另说了）。从你的流动相 ...

按柱子说明书的方法去做即可，进口柱一般都有详细说明。不同品牌的柱子可能不尽相同。我的phenomenex色谱柱说明书上把氰基柱列为正相柱（其实也可用于反相色谱），保存时用异丙醇或正己烷。柱效下降时的清洗程序为：用做正相柱时其清洗过程为氯仿、异丙醇、二氯甲烷10倍柱体积依次冲洗；用做反相柱时其清洗过程为5%乙腈水溶液、四氢呋喃、95%乙腈10倍柱体积依次冲洗。 氨基柱的使用： 需要注意的是，氨基柱的 ...

1)． 严格过滤色谱纯流动相，根据需要选择不同的滤膜。 2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气20～30分钟。 3)． 打开色谱工作站，连接好流动相管道，连接检测系统。 4)． 有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，冲洗时速度不要超过10ml/min。 5)． 调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大， ...

一台品质优良的液相色谱系统应从以下几个方面考虑： 一．主要技术指标优异 首先是如何看指标。液相色谱仪的指标很多，有泵的、检测器的、色谱柱等等。我们认为要看主要技术指标，根据国家标准，仪器的主要指标有噪音，漂移，最小检测浓度，定性定量重复性等。这些指标都要放在系统，回路里去看，去比较。就是需要把各单元装置都要联接好，如接好色谱柱，进样阀，并且要通上流动相。因为您在分析中也都是联接好以后才可以进行分析 ...

某些国产仪器在公布其技术指标时，大多只写了“噪音和漂移”的指标。用户觉得指标都差不多，但却忽略了另外二个较为重要的指标：“最小检测浓度和光程”，这二个指标有什么作用呢？它们代表了什么含义？ 这里来解释一下： 最小检测浓度是考验仪器的灵敏度。最小检测浓度数值大，仪器的灵敏度就小，不能反应真正的噪音和漂移水平。例如：有些仪器的最小检测浓度小于1&time ...

1、认真阅读色谱柱使用说明书； 2、使用填充良好的色谱柱； 3、尽量减少压力波动，避免机械及热冲击； 4、使用保护柱及在线过滤器； 5、经常以强溶剂冲洗色谱柱； 6、充分过滤样品及流动相，尽量避免杂质微粒与强保留成分； 7、用稳定的固定相（C18最稳定）； 8、在中等pH值操作时（6～8）， 用有机缓冲溶液； 9、色谱柱使用温度最好小于40℃； 10、硅胶基质的的色谱柱，应保持流动相的pH值范围 ...

一、保留值与分离度重现性不好原因分析 二、造成色谱峰（ 不对称）拖尾的原因1．色谱柱本身填装问题筛板堵塞或填料塌陷；2．柱头有污染；3．样品超载；4．样品溶剂不合适；5．柱外效应；6．化学或二次保留（硅羟基）效应；7． 缓冲容量不足或不合适；8． 重金属污染。 三、如何解决峰形拖尾的问题A. 与化学有关的拖尾问题1．流动相中，加入30mM的三乙胺（用于碱性化合物）或醋酸胺（用于酸性化合物）， 未知 ...