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膜片钳技术的基本原理和方法

膜片钳技术是在电压钳技术基础上发展起来的,电压钳是利用负反馈技术将膜电位在空间和时间上固定于某一测定值,以研究动作电位产生过程中膜的离子通透性与膜电位之间的依从关系。但电压钳只能研究一个细胞上众多通道的综合活动规律,而无法反映单个通道的活动特点,同时通过细胞内微电极引导记录的离子通道电流其背景噪声太大。膜片钳技术的优势是可利用负反馈电子线路,将微电极尖端吸附的1μm2至几个平方微米细胞膜的电 ...

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膜片钳的多种记录形式

在膜片钳技术的发展过程中,主要形成了四种记录模式,即细胞贴附模式(cell-attachedmode或on-cellmode)、膜内面向外模式(inside-out mode)、膜外面向外模式(outside-out mode)、常规全细胞模式(conventional whole-cell mode)和穿孔膜片模式(perforated patch mode),如图11-2所示。根据研究目的 ...

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神经药理学实验中实验动物的选择

在测定新药的急性毒性实验(LD50)时,动物如出现竖毛,活动增加,激动兴奋,以致发展为强直一阵挛性抽搐,可初步考虑为拟交感药。进而可观察其动物(或猫)血压的反应,如兴奋α-受体,则对血压影响较大,并反射地使心率减慢,如兴奋β受体,可见血压下降和心率明显增快。为了较确切地区分其对α、β受体的作用,还可采用α受体阻断药酚妥拉明,&bet ...

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阿戈美拉汀及片简介(高架十字迷宫应用)

一、作用机制褪黑素类似物阿戈美拉汀既是首个褪黑素受体激动剂,也是5-羟色胺受体拮抗剂。动物试验与临床研究表明该药具有抗抑郁、抗焦虑、调整睡眠节律及调节生物钟作用,同时其不良反应少,对性功能无不良影响,也未见撤药反应。阿戈美拉汀及片简介(高架十字迷宫应用)阿戈美拉汀抗抑郁的机制可能与增加海马部位神经元的可塑性及神经元增生有关。以免疫染色的方法测定成年大鼠脑部神经细胞的增生、再生及死亡,结果发 ...

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慢性应激对大鼠海马NGF、NT-3表达的影响及应激停止后的变化

摘要:目的 探讨慢性应激对大鼠海马神经元NGF、NT-3蛋白表达的影响及其应激停止后的变化。方法采用慢性强迫游泳制作动物模型。运用open-field法观察大鼠行为学的变化,运用免疫组织化学方法观察大鼠海马DG区、CA3区NGF、NT-3的表达。结果与对照组相比实验组1大鼠海马CA3、DG区NGF、NT-3的平均灰度值显著增加(p关键词:慢性应激 海马NGF、NT-3强迫游泳porsolt ...

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创伤后应激障碍(PTSD)动物模型的研究进展(强迫游泳应用)

多种创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorderPTSD)的动物模型已建立,其中最常用的是强迫游泳、电击和捕食者模型等,其病理变化及行为学表现与人类PTSD表现相似,是研究PTSD的病因、发病机制、药物治疗的较可靠的实验模型。PTSD 动物模型 研究进展 应激Research progress on the animal model of the post-tra ...

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避暗、穿梭实验(明暗箱)

本实验简单易行,反应箱越多,同时训练的动物越多。以潜伏期为指标,动物的差异性比较小。避暗视频分析系统对记忆过程特别是记忆再现有较高的敏感度。主动回避与被动回避回避实验是利用动物的好暗避光(明暗穿梭)、对厌恶刺激(如足电击)的恐惧和记忆而建立起来的。所以对实验者(而不是对动物)而言,回避实验在技术上与暗示关联条件恐惧相类似。所用的刺激为温和的足电击,发生的反应是动物逃避曾经受到电击刺激的地方。根据动 ...

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场景恐惧实验

场景恐惧实验系统(FCS)用于小型啮齿类动物(大、小鼠)环境相关条件性恐惧实验研究。啮齿类动物在恐惧时会表现出特有的不动状态(immobility),动物在这种情况下倾向于保持静止不动的防御姿势。抗抑郁药和抗中枢兴奋药可以明显缩短不动状态持续的时间。实验过程中,实验对象被给与一个声音信号(条件刺激),随后给予电击(非条件)刺激。该训练称为条件性训练,训练结束后实验动物进行声音信号或环境联系性实验。 ...

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八臂迷宫(8-Arm Maze)

一、实验设备 八臂迷宫(8-Arm Maze)用来检测药物或大脑受损状态下学习和记忆方面的表现,它由八个完全相同的臂组成,这些臂从一个中央平台放射出来,所以又被称为放射迷宫(Radial Maze)。八臂迷宫操作简便、可行,而且能区分短期的工作记忆和长期的参考记忆,现已被广泛用于学习记忆功能评价。二、实验方法1.动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后限制性地 ...

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水迷宫背景和原理

背景: 随着学习记忆脑机制研究的不断深入以及寻找有效防治认知障碍类疾病方法的需要 客观准确地评价实验动物的学习记忆水平已经成为神经生物学和神经药理学中非常重要的研究内容。人们在研究老年性痴呆的过程中 认为Morris 水迷宫可作为检测实验动物学习记忆水平的重要工具。为此 在实验中,我们想用水迷宫来测定糖尿病大鼠认知功能。 1981 年Morris首次创造性地运用水迷宫测试来 ...

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实验动物采血指南

采血方法的选择,决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破 组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能 的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、 ...

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实验动物各种体液、骨髓的采集方法

一、消化液的采集(一) 唾液1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。2. 制造腮腺瘘法在慢性实验中收集狗的唾液,要用外科手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分开,穿过皮肤切口引到颊外将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合腮腺分泌的唾液就流出颊 ...

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医学实验动物(medical experimentalanimals)的概念和意义及医学实验动物的类型

医学实验动物是生物医学研究不可缺少的部分之一,研究成果的水平高低与动物实验密切相关,它直接影响着研究工作的顺利进行。一、医学实验动物的概念及意义医学实验动物(medical experimentalanimals)是经人工科学育种、饲养和繁殖,受遗传学、微生物学和寄生虫学控制,供生物医学实验用的动物。其遗传背景明确,来源清楚,具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验的再现性。医学实验动物是 ...

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爬杆回避实验(pole-jump test)原理和方法步骤

【实验目的】1. 了解爬杆回避实验(pole-jump test)原理。2. 掌握爬杆回避实验方法。【实验原理】以灯光(和/或声音)和电击为联合刺激,使实验动物由被动回避到建立主动的条件反射。记录此条件反射建立过程中的主动回避反应指标可反应实验动物的学习、记忆能力的变化。【实验对象】成年小鼠,大鼠。【实验器材】爬杆实验装置为25cm×25cm×40cm的实验箱,箱底铺有电栅,可以通电,箱中央树立 ...

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药物成瘾实验模型

成瘾是一个多种因素共同行成的一种反复发作的脑疾病因此可以从多个方面来模拟制作动物模型.(1) 躯体依赖: (主要是阿片类 可以制作镇静催眠药和大麻类) 包括自然戒断和催促戒断然后观察阶段综合症(主要限于阿片类) 还有更精细的方法比如采用程序控制行为长期给药后突然停药或者使用受体拮抗剂后动物的反应速度明显减慢或者被abolish。(2)精神依赖:很多种动物模型,比如研究药物强化能力的自身给药技术(s ...

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抗抑郁药的临床前动物行为学实验检测指标

抗抑郁药的临床前动物行为学实验检测指标及注意事项:实验动物常用大鼠及小鼠。基本原则是以整体动物行为药理学方法为基础,根据在研抑郁药的基本药理作用,选择神经化学、电药理学、细胞和分子生物学技术和方法进行综合评价。整体模型有许多种,测什么指标和需要注意哪些问题需要仔细的实验设计,在此只能列一提纲,希望能对大家的工作有所帮助。行为学实验有如下几种:1 大鼠强迫游泳实验指标:不动时间。注意:A 应同时检测 ...

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实验动物科学

实验动物科学诞生于本世纪五十年代初期,现在已发展成为一门独立的、综合性的基础科学,它是融合生物学、动物学、兽医学和医学等科学,并引用了其它自然科学的成就发展起来的。因此这门科学是综合性的,它所涉及到的知识面很广泛,它所包括的内容极为丰富,其中不仅要以生物学、医学、药学、兽医学、畜牧学等为对象,以遗传学、育种学、病理学、生理学、营养学、微生物学等为基础,还要引用机械工程学、环境卫生学、建筑学等科学, ...

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条件恐惧训练对大鼠行为活动的影响

【摘要 】目的 诱导焦虑反应模型 观察焦虑反应对大鼠行为活动的影响。方法 条件恐惧训练 行为检测。结果 连续 4d的条件恐惧训练后 与对照组相比 F344大鼠在木僵行为实验中木僵反应增多884% ( P 小范围探究运动减少 88% ( P 进入开放壁的次数和在开放壁停留时间分别减少 75% ( P 踩格子数和在中央格停留时间分别减少 47% ( P 探究活动能力下降 它是一种诱导焦虑反应模型较理 ...

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动物悬尾实验、强迫游泳实验实例

【摘要】目的研究芒果苷(mangiferin)对实验性行为绝望小鼠的抗抑郁作用。方法采用小鼠悬尾应激实验和小鼠强迫游泳实验。结果芒果苷在60.0,30.0,15.0 mg·kg-1剂量下显著缩短小鼠悬尾不动时间(P﹤0.05或P﹤0.01),芒果苷60.0 mg·kg-1能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间(P﹤0.01)。结论芒果苷在小鼠行为绝望模型实验中具有一定的抗抑郁作用。【关键词】芒果苷 ...

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大小鼠强迫游泳实验方法的研究概况( 强迫游泳、 负重游泳、 水迷宫等)

【摘要】本文对大小鼠游泳实验的方法( 强迫游泳、 负重游泳、 水迷宫等) 、 评价指标( 不动时间、 负重游泳时间、 逃避潜伏期等) 及模型大、 小鼠生理生化的变化进行了综述,为进行抗抑郁、抗疲劳和益智药物的研究提供参考,本文还对计算机技术在大小鼠游泳实验中的应用作了简要的介绍。 【 关键词】 大鼠; 小鼠; 游泳大小鼠游泳实验是一种广泛应用于抗抑郁、抗疲劳和益智药物的芍 ...

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