1. After electrophoresis of protein gel transfer gel to round staining tray. Add ~200 ml protein gel stain. 2. Microwave for ~45 sec until the s ...
Hahn Lab 1.In microfuge tubesspin down 0.1 ml of uninduced cells grown to near saturation or 0.15 ml of IPTG induced cells.Remove YT (or LB)media with a pipetman or drawn out pasteur pipette and freez ...
最佳的银染灵敏度和最快的染色速度 SilverQuest™ Silver Staining Kit实验步骤专门设计,确保最快地得到结果的同时保证最好的银染灵敏度和清晰的背景。90分钟内就可以检测到0.3ng蛋白(图1)。 图1 使用SilverQuest™ Sliver Staining Kit得到亚纳克级灵敏度 下面列出的样品在NuPAGE® Novex 4- ...
1x 40min - overnight 50% MeOH 12% Acetic Acid 1x 30min ...
Fix gel in 50% methanol for greater than 1 hour. rinse gel in dH2O 3 times 5 minutes each place back in 50% methanol for 1 hour. Stain gel in 100 mls of stain solution for 30 minutes Rinse gel in dH2 ...
一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液,pH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液,pH6.8;电泳缓冲液,pH8.3;10%SDS溶液;10%过硫酸铵溶液;样品处理液;染色液;脱色液;电泳玻璃板,电泳电源架,电泳槽,电泳仪等;蛋白Mark。 二、方法与步骤 1)分离胶和浓缩胶配制 按下表比例分别配制分离胶和浓缩胶: 表2-7:聚丙烯酰胺 ...
型号 排阻的下限 ( Mr ) 分级分离的范围 ...
本文根据华东理工大学生物工程学院的酶工程课件整理而成 一、实验流程 二、实验安排 第1次菌体超声破壁、离心、包涵体复性、装离子交换柱 第2次测酶活、定蛋白离子交换层析 层析样品进行浓缩、透析 第3次 ...
快速方便的染色步骤 SimplyBlue™ SafeStain的实验步骤易于操作,在不到3个小时的时间内就能完成,条带在染色液中马上可以显现,不需要脱色,但是为了达到最佳灵敏度,可以使用基于水的脱色步骤。 灵敏的染色结果 SimplyBlue™ SafeStain融合了独特的胶体状考马斯G-250染色液和一种优化的染色步骤,达到纳克级的灵敏度,1微克蛋白在染液中5分钟就可以 ...
一、原理 细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上,不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色,可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量,可筛选阳性表达的重组体。 二、试剂准备 1、30%储备胶溶液:丙烯酰胺(Acr)29. ...
Protocol for Silver Staining Silver staining is less compatible with the mass spectrometric analysis.Thereforewe don't recommend using silver staining for any samples that will subsequently be submitt ...
一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS)大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而消除了蛋白质原有的电荷差别,使蛋白质分子电泳的迁移率主要 ...