基础知识

哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能，在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白的蛋白质组学分析是被大家看好的辨识新的药物靶标和/或疾病的生物学标记的好方法，并已得到广泛应用。然而膜蛋白通过许多疏水氨基酸残基锚定在膜结构里面，很难溶解在水性缓冲液系统中。为了制备膜蛋白样品，传统的方法是采用“去污剂＋机械处理”的操作方法获取膜蛋白，用于增溶的去污剂有离子型（如SDS）和非离子型的（如Triton?-X）等，前者会使多数蛋 ...

我是第一次进行核蛋白提取，从文献上查到细胞裂解液和细胞核裂解液的配方如下细胞裂解液A液配方为：1 10mmol/L的Hepes（PH 7.9）2 10mmol/L KCl3 1.5mmol/L MgCl24 0.2%Igepal5 0.5mmo/L EDTA6 0.1mmol/L EGTA7 1mmol/L DTT8 0.25mmol/L PMSF配置细胞核裂解液B液方案：1 20mmol/L的Hepe（PH 7.9）2 420mmol/L NaCl3 1.5mmol/L MgCl24 2%Igepal5 0.5m ...

这本书学校图书馆可借的只有一本中文版，另外实验室还有一本。比较贵，中文版售价是198RMB英文版的价格就更贵了，希望需要的同学尽快下载。提供两种格式的英文版和一种格式的中文版。英文名称：GENES VIII中文版名称：基因八本书适用于分子生物学、分子遗传学及相关课程，是从事生物遗传学、生物化学、细胞生物学、基础医学等专业人员进行科学研究的重要参考书。20年前Benjamin Lewin 的Genes一书从根本上改变了当时分 ...

（一）第一向等电聚焦1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室温溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混匀。3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液，加入100ml样品，充分混匀。4. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的IPG预制胶条（17cm pH 4-7），室温中放置10分钟。5. 沿着聚焦盘或水化盘中槽的边缘至左而右线性加入样品。在槽两端各1 ...

觉得是非常实用的的文章，不是泛泛而谈，详细到连如何带手套都包括在内。考马斯亮蓝染色双向电泳凝胶胶内酶切方法的改进廖翔1 应天翼1 王恒樑1 王杰2 魏开华2 黄留玉1 黄培堂1（1、军事医学科学院生物工程研究所，北京 100071；2国家生物医学分析中心，北京 100085）1.2 胶内酶解制备样品用剪刀将200μl Eppendorf 吸头尖端剪掉约1cm，孔的直径约为1mm，用修剪后的吸头从凝胶上戳取蛋白质点，再转入200μl离心管中。每管加入50μ ...

1 材料和方法1.1 材料1.1.1 组织和细胞的来源：1.1.2 仪器设备机械组织匀浆器低温高速离心机 (40,000 g)超速离心机超生细胞破碎仪超纯水装置1.1.3 试剂三氯醋酸 (TCA)丙酮二硫苏糖醇 (DTT)尿素CHAPSPMSFEDTA乙醇磷酸考马斯亮蓝R350抑肽素A亮肽素试剂纯度均应是分析纯或以上。1.1.4 溶液配制(1) PBS：NaCl 8 g, KCl 0.2 g, Na2HPO4 1.44 g, KH2PO4，溶于800 ml水中，用HCl调pH至7.4，用纯水定容至1 L；(2) ED ...

首先我的目的就是单纯的Western,要看的是一个膜受体的表达,以前我们做的方法是:提取组织(血管),加入lysis buffer,玻璃匀浆,冰上半小时,12,000rpm离心5min,取上清,加入loading buffer, 煮沸5min,上样........ 实验室所有的人做所有的蛋白都是这个步骤.从来也没有想过选择12,000rpm是什么道理. (大概认为提取的是总蛋白),在我做的过程中,感觉Western结果很不稳定,而且每次都显示这 ...

蛋白质复性史晋辉(天津大学化工学院生物化工系，天津 300072)关键词：蛋白质复性；环糊精；分子伴侣重组DNA技术为大规模生产目标蛋白质提供了崭新的途径。但人们在分离纯化基因工程表达产物时却遇到了意想不到的困难：很多利用大肠杆菌为宿主细胞的外源基因表达产物如尿激酶、人胰岛素、人生长激素、白介素-6、人γ-干扰素等，不仅不能分泌到细胞外，反而在细胞内聚集成没有生物活性的直径约0.1～3.0μm的固体颗粒棗包含体［1］。这些 ...

什么是转录因子？l 转录因子（Transcription factor，TF）是一类能与特异性DNA序列结合并调节基因转录的调控蛋白。l 转录因子通常是细胞内信号通路的核心蛋白，是将外界刺激转化为基因表达变化的关键调控者。为什么要研究转录因子？l 人体的35000多个基因在不同的组织、不同的时间具有表达差异性，转录因子的调控起到重要的作用。l 2012年的诺贝尔生理学或医学奖得主山中伸弥，在小鼠成纤维细胞中表达Oct3/4、Sox ...

一、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，样品制备完成。蛋白质提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml2、甘油（Glycerol）75ml3、聚乙烯吡咯烷酮（Poly ...

Protein and Peptide Analysis by Mass SpectrometryPublisher: Humana PressNumber Of Pages: 360Publication Date: 1996-08-19Sales Rank: 1545476ISBN / ASIN: 0896033457EAN: 9780896033450Binding: HardcoverManufacturer: Humana PressStudio: Humana PressAverage Rat ...

珠蛋白基因数据库这是美国宾夕法尼亚大学创办的珠蛋白基因数据库网站。该网站主要提供研究与血红蛋白形成基因序列的数据与工具，其中包括天然存在的人血红蛋白突变体及其效应的信息，调节beta样珠蛋白基因的相关实验数据，以及用来作...http://globin.cse.psu.edu/三A类蛋白超家族数据库这是三A类蛋白超家族数据库的网站。三A类蛋白超家族是指：与不同细胞活性相联系的ATP酶，是较早的进化发明，也是当今科学 ...

我的蛋白样品到上海基康公司去作简单质谱分析，利用的叫maldi－tof技术（激光解吸电离－飞行时间），可以分析样品的肽指纹图谱，他们还通过源后衰变（post souce decay，PSD）来获得一级结构数据。我得到了结果，但我实在不太懂怎么分析。看了本站的一些讨论，还是有点稀里糊涂。因为我的样品是个未知蛋白，所以我不知道哪个匹配结果可信，可信度也没什么概念。像下面这个，55的得分，27％的覆盖相似性，说明得了多少问题呢？（附件 ...

Protein Lounge数据库Protein Lounge是系统生物学领域中的领先者。为了帮助生命科学工作者更好的理解系统生物学的复杂性，Protein Lounge已经开发了多个基于互联网的数据库和生物工具软件。系统生物学关注探索细胞间网络以及蛋白质相互作用（包括信号传导，细胞存活和细胞凋亡的机制）其目的是为了更好的发展和鉴别对不同疾病的药物选择。在后基因组时代，基因和蛋白质数据的组织是生命科学工作者最关注的问 ...

题目：Protein Identification by Mass Spectrometry: Issues to be Considered出处：MCP Papers in Press. Published on November 6, 2003 as Manuscript R300012-MCP200主要观点、创新点及学术、技术意义：• 文章指出在大量运用蛋白质组技术鉴定蛋白的同时，要探究该技术的可靠性和显著性，急需制定一个运用该技术的规范标准。但由于蛋白质组技术路线和数据处理的多样性 ...

David Whitford, «Proteins: Structure and Function»Wiley | ISBN: 0471498947 | 2005-05-20 | 542 pages | PDF | 31 MbThis text provides a superb introduction to the study of proteins, focusing on their structure and function. It covers the importance of proteins in biochemistry and introduces the co ...

DNA序列测定技术序列测定的技术和策略Sanger双脱氧链终止法Maxam－Gilbert DNA化学降解法测序策略　　目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都是同样生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组寡核苷酸都有固定的起点，但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱 ...

Wiley ebooks for biotechnologyProtein Crystallography in Drug Discoveryhttp://rapidshare.com/files/56066269/Protein_Crystallography_in_Drug_Discovery.pdfProtein microarray technologyhttp://rapidshare.com/files/56066804/Protein_m ...

分子伴侣与疾病刘慧萍 柴玉波 陈苏民（第四军医大学生物化学与分子生物学教研室，西安，710032）摘 要　　近十年来，由于分子伴侣的发现和深入研究，使经典的蛋白质折叠“自组装”学说受到挑战。越来越多的研究证实，“辅助性组装学说”更加符合体内蛋白质折叠的特点和途径：即蛋白质多肽链的正确折叠和组装需要其他蛋白质分子的帮助，分子伴侣与折叠酶一起，构成了两种重要的辅助折叠分子。这为揭示生理或病理条件下蛋白质的折叠机理提供了新的研究思路，因 ...

作者: 圭多·格兰迪出版社: 化学工业出版社出版年: 2006-7页数: 236定价: 40.00元ISBN: 9787502584887内容简介 · · · · · · 　　疫苗开发是首先得益于基因组学、蛋白质组学和生物信息学等高新技术的诸多领域之一。目前已获得了很多细菌的全基因组序列，并逐步了解了其致病性菌株(与非致病菌株比照)的作用机理，由此研制出的现代疫苗可以针对传统疫苗不能发现的特殊基因产物。本书阐述了疫苗开发领域的最新进展，结合实例详述了研制新型疫苗的不同 ...