PCR扩增

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1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug. 2. RT按要求做,一般不会出太大问题. 3. PCR,按常规.但如需扩长片段,则对前两步要求较高,需要有完整的cDNA存在,不是单改变Mg2+浓度、退火温度能解决的. 1)RT和PCR时的引物设计是不是一定要先知道目的基因的序列?必须

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