RFLP-PCR

限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism，缩写RFLP) 技术的原理是检测DNA在限制性内切酶酶切后形成的特定DNA片段的大小。因此凡是可以引起酶切位点变异的突变如点突变（新产生和去除酶切位点）和 一段DNA的重新组织（如插入和缺失造成酶切位点间的长度发生变化）等均可导致RFLP的产生。 技术路线： 缺点： RFLP分 ...

一、实验原理 聚合酶链式反应（PCR）是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应，可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板DNA置于高温（约93℃~95℃）下使之变性解链；人工合成的两个寡核苷酸引物在低温（约50℃~70℃）下分别与目的DNA片段两侧的互补序列复性结合；引物在DNA聚合酶作用（约70℃~75℃）下沿模板按5’→3&rs ...

概述 CAPs（cleaved amplification polymorphism sequence-tagged sites）CAPs技术又称为PCR-RFLP，限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）技术。是用特异设计的PCR引物扩增目标材料时，由于特定位点的碱基突变、插入或缺失数很少，以至无多态出现，往往需要对相应PCR扩增片段进行酶切处理，以检测其多态性。CAPs标记在二倍 ...

限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphismRFLP）分析技术是分子生物学的重要分析方法之一，用于检测DNA序列多态性。PCR-RFLP 是将PCR 技术、RFLP 分析与电泳方法联合应用，先将待测的靶DNA 片段进行复制扩增，然后应用DNA 限制性内切酶对扩增产物进行酶切，最后经电泳分析靶DNA 片段是否被切割而分型。 本实验将应用R ...

PCR-RFLP HLA结果分析参照限制性核酸内切酶酶切位点在HLA等位基因DNA序列上的分布情况，根据样本的PCR-RFLP结果，对样本的HLA基因型别进行判断。由于篇幅限制，仅介绍DR1纯合子亚型的鉴定作为说明。DR1纯合子样本各种等位基因的PCR-RFLP带型DR1等位基因组合限制性核酸内切酶Ava IIPst I0101/0101110102/0102100103/0103010101 ...

一、 材料 　　基因组DNA(大于50kb分别来自不同的材料)。 　　二、设备 　　电泳仪及电泳槽， 照相用塑料盆5只，玻璃或塑料板(比胶块略大) 4块，吸水纸若干，尼龙膜(依胶大小而定)，滤纸 ，eppendorf管(0.5ml)若干。 　　三、试剂： 　　1、限制性内切酶(BamHⅠ EcoRⅠ HindⅢ XbaⅠ)及10×酶切缓冲液。 　　2、5×TBE电泳缓冲液：配方见第一章 ...

随着生命科学迅猛的发展，与之相适应的实验技术手段越来越复杂和专业化，对于科研人员实验技能要求也越来越高。由于生物学实验高度的复杂性、使得一个科研人员往往只能精通某一方向的实验。因此许多生物技术公司应孕而生，他们提供了许多专业的服务，其中最常规的技术服务包括核酸、蛋白测序、引物合成，SNP分型动物培养及转基因动物实验。 在国外，生命科学的研究已经初步形成了一个大型技术平台共享的研究形式，科研人员的 ...