其他PCR技术

感谢您的积极参与！银染背景深怎么回事此引物设计是否合理RNA 2100bp,ORF框1600bp 如何设计引物求教长链PCR扩增的问题哪位有35S启动子和 Nos 终止子的比较成熟的引物序列求助关于制作和应用PCR诊断试剂盒方面的资料MSP中醋酸铵用法MSP不见条带做病毒的基因的RT－PCR能否用oligo（dt）？急需有关基因测序方面的问题和测序仪发展史 多重pcr上下游引物Tm不同，该如何安排反应体系扩不出目的片段这个 ...

PCR实用技巧增加PCR的特异性：1. primers design这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量b. GC% 40%~~~~60% c. 5'端和中间序列要多GC,以增加稳定性d. 避免3'端GC rich, 最后3个BASE不要有GC,或者最后5个有3个不要是GCe. 避免3'端的互补, 否则容易造成DI ...

谢谢各位的解答，SORRY，这几天没上来，我的序列如下，请帮忙看一下：NM_190847. Oryza sativa (jap... LinksLOCUS NM_190847 1692 bp mRNA linear PLN 07-OCT-2003DEFINITION Oryza sativa (japonica cultivar-group) putative pectin esterase(P0415A04.26), mRNA.1 atgggtatca tccaccgagg ggacagcaca gtga ...

请教：高保真酶 关于taq plus 求教Pfu酶作PCR的要求 Pfu扩增求救！！！！ 请问哪一种高保真DNA聚合酶比较好呢？Pfu DNA 聚合酶的问题 pfu的扩增条件！ 关于高保真酶问题？ 求助：高保真酶关于高保真酶关于高保真的酶 pfu高保真酶怎么那么难用？Pfu DNA聚合酶------常见问题 请教如何做病毒的 pfu 请教Pfu扩增2kb片段 高保真酶咋还不如普通的Taq酶?请教关于高保真酶问题哪个公司的长距离TAQ酶好?请教长片段的PCR克隆技术 求助：大片断PC ...

一、分子生物学Promega:Promega公司是分子生物学研究工具的经典品牌，已有接近30年的历史，是生命科学这个朝阳产业中的“老字号”。该公司所特有的萤光素酶生物发光技术，灵敏度高，信号/背景比率低，在基础研究和药物筛选领域内得到广泛的应用和认可。应用范围涉及报告基因检测；细胞学活力、细胞毒作用、细胞凋亡检测；蛋白酶、蛋白激酶、核受体检测，以及描述药物先导物的吸收、分布、代谢、排泄等特征性参数的一系列检测方法。Pr ...

Routine PCR? Let’s be honest, there’s no such thing. Even with the simplest PCR reaction things can go wrong, so you need to have a good checklist of ideas for troubleshooting and rectifying the problem. Today I have brainstormed all of the ways I can think of to approach problems with standard PCR reactions. ...

希望战友们积极参与，加分从优！求助变性胶的电压求助LD-PCR的原理、应用、特点求助引物设计分析如何计算hardy-Weinberg平衡的理论值 ？可以用spss软件计算吗？求助NaI提取核酸对PCR的影响做PCR过程中有谁听说过或遇到过气溶胶污染吗? 哪个质粒可以做mRNA 稳定性的测定，可以实现定向连接?外周血抽提RNA是否有时间限制？ 用限制性内切酶切片段序列是不是要比环状的载体难得多？帮助分析电泳图求助RT-PCR的 ...

基因序列cds，引物，目的片段如下：atggggacgccgggggaggggctg301 ggccgctgctcccatgccctgatccggggagtcccagagagcctggcgtcgggggaaggt361 gcgggggctggccttcccgctctggatctggccaaagctcaaagggagcacggggtgctg421 ggaggtaaactgaggcaacgactggggctacag ...

以下是在我查的因物设计要注意的一些问题，和大家共享PCR引物设计的黄金法则1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。2.引物长度一般在15~30碱基之间。引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为 ...

我想根据keratin基因（有30多个亚型）的共有保守序列，设计引物扩增，那位大侠能帮我找一下好吗？谢谢！keratin 5atgtctc gccagtcaag181 tgtgtccttc cggagcgggg gcagtcgtag cttcagcacc gcctctgcca tcaccccgtc241 tgtctcccgc accagcttca cctccgtgtc ccggtccggg ggtggcggtg gtggtggctt301 cggcagggtc ag ...

邹承鲁院士写他是如何读文献的无论题目从何而来，都必需紧密追踪当前有关科学领域发展的动向。从研究生时代开始，在导师 教导下，以周围同学为榜样，我就养成了每周必定去图书馆浏览最新期刊的习惯，几十年如一日，雷打不动。如果确实有事，下周必定补上。我当时有一个小记录册，登录所有对本专业重要的刊物，每期读过后，一定做记录，决不遗漏一期，直至今日。现在可以在网上阅读所有重要刊物的目录和摘要，这就更容易做到了。掌握文献、对文献进行综合， ...

应助后请PM求助者！【求助】相同条件下，模板稀释后扩增不出来目标条带http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6324633&sty=1&tpg=11&age=0请问同一种属不同品系的同一基因的MRNA相同吗http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6328875&sty=1&tpg=10&age=0【求助】请教真菌中RT-PCR的内参http://www.d ...

PCR常见问题总结PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带　　PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及活性 ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。　　模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模板核酸 ...

精华内容，与EB相关： 电泳问题 电泳问题（2）EB的危害及安全问题： ask: DEPC AND EB 的英文全名 请问DEPC和EB的毒性何在 求助：EB有何危害？急！ 求救:EB大量污染的补救措施 PCR中涉及有毒物质的步骤 琼脂糖凝胶电泳的时候,EB的毒性问题 请问EB是不是多多益善啊 GoldViewTM DNA染料（溴化乙锭的替代品） MSP中的亚硫酸氢钠处理后... 实验用的EB都是怎么处理的呀EB的配制及使用： 急！向大家求助EB如何配制？ 溴化乙锭的浓度? 急问:已经有配好的0. ...

感谢您的积极参与关于real time PCR 熔点曲线分析检测点突变real time PCR中的疑问 重组质粒的选择哪里下载rflp－pcr的protocol长片断DNA如何扩增帮忙设计引物这篇文献用的是何方法提的RNA咋回事端粒PCR为什么试验结果不能重复求助M.SssI的使用说明帮分析自行设计的引物引物设计中的疑问一步法RT-PCR和两步法RT-PCR具体有什么不同呢两种逆转录酶（AMV 和M- MLV)的 区别为什么相同的序列用 ...

如何建立一个PCR实验室？为了对以个特定序列进行PCR做重复检测,需要三个不同的区域,每一个区域的具体技术操作和试剂在下面详细列出.1、样品准备区这个区域专门用作样品的准备，在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施：1）PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。2）组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理，以根据应用的需要提取DNA或RNA。3）用于样品处理的工具不能被用作普通 ...

友情整理 11月1日～11月15日 零应助贴求助血清中提取病毒RNA进行扩增http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=4774547&sty=1&tpg=20&age=0SMART RACE 高手看过来:http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=4774641&sty=1&tpg=20&age=0求各位帮我看看http://www.dxy.cn/bbs/post/view?b ...

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PCR产物的电泳检测时间　　一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带　　PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。　　模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时 ...

Applied Biosystems Veriti™ 96-Well Thermal Cycler,Veriti™ Thermal Cycler 技术特点如下：Block Format 0.2 mL AlloyFeatures Standard 0.2 mL format and sample block. Enabled to run FAST chemistry,Max Block Ramp Rate 3.9 ºC/SecMax Sample Ramp Rate 3.35 ºC/SecEnabled to run FAST Chemistry YesTemp ...