体外转录相关技术

''这几天看到一个微信，科研不端将每年通报，或7年不得申国自然。前几天还看到，国自然资助的文章，全文公开。这对我们认真做科研的人来说，真是个好消息。''其实做科研，不管是出于什么目的，如果去做，那就按照科研的思路和要求，认真做好。虽然现在，很多人做科研并不是出于对科研的喜欢，而是工作的需要，生存的压力。我们改变不了环境，那么就改变自己。如何改变呢，拿出些时间，去了解科研，感受她的神秘，享受探索的乐趣。季博讲座和日志中给大家 ...

qisanni05 请问 做一种microRNA逆转录用哪家公司的试剂盒性价比较高？谢谢您的帮助！大鹏鸟 不知道你要做啥？RT-PCR？国内挺多的，不过广州复能基因的貌似挺全、挺专业的。http://www.fulengen.com/product/reagent/qpcr_detect.phpAll-in-One First-Strand cDNA Synthesis Kit采用RNase H活性缺失的莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶(M-MLV Rever ...

程程880309 求各位：我是研一学生，因课题组的研究方向是关于microRNA，请问用哪本书比较好？谢谢各位啦~~负极兔 友情帮顶smilewei15 马上读研，现在的毕设也是这个方向~~同求~~本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

southern 我用一段序列来搜索可能作用的miRNA，结果中出现“ — strand”，这是不是指反义链转录的？那么它们是如何发挥作用的呢，会不会和+ strand 转录的发生互补而作用抵消了呢？295546 你是怎么搜索的？southern miRBase有一个by sequence框，将序列粘贴进去，其他参数都不动，只选择了homo sapiens本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师 ...

fly6543210 各位大虾,向你们求救啦。心手上路，多多指点。我的实验室 一组对照组（不干预），一组实验组（干预），只养一种细胞。然后我要用miRNA 芯片检测。问题有如下：1. 每个芯片可以检测几个样本？ 实验组和对照组的样本检测是在同一张芯片上进行，还是分开在不同的芯片上进行？2. 实验组和对照组要最少重复做多少次芯片检测才能达到数据有统计分析意义？这样需要多少块芯片？3. 比如每块芯片可以测12个样本，那我的重复实验是不是可以在同一块芯 ...

liuchao8510 有没有人在细胞转染中应用加硫代硫酸修饰的胆固醇尾的miRNA inhibitor，加胆固醇文献中说是for delivery in vivo，硫代硫酸是为了stability，那在转染细胞的时候胆固醇会不会对转染效率造成影响，转染试剂用Lipofectamine RNAI MAX还是Lipofectamine 2000？有没有人比较过这种修饰的inhibitor与2-OMe修饰的inhibitor在细胞中对对应 ...

huangwenshu 请问“胱氨酸/谷氨酸反向转运体”的作用是什么，他的前体谷氨酸和半胱氨酸那个对他的作用影响较大？Fasta921 在生理状态下Glu/胱氨酸转运体（XC-）释放一分子的Glu，摄取一分子的胱氨酸入细胞内，两者藕联转运。胱氨酸在细胞内迅速被还原为半胱氨酸，一部分参与细胞内重要自由基清除剂谷胱甘肽的合成，另一部分则出细胞氧化成胱氨酸，重新参与XC-系统循环。在正常情况下，Glu与胱氨酸通过Glu/胱氨酸转 ...

RNA干扰（RNAi）：近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。MicroRNA（miRNA,微RNA）：即为长度为22nt左右的5′端带磷酸基团、3′端带羟基的非蛋白编码的调控小RN ...

概述microRNA(miRNA)是一类由大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA，广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式，都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此，对miRNA 的检测方法主要有Northern Blot 等基于分子杂交的方法，这些方法敏感度低、耗时长、RNA 的用量较大。miRNA Q-PCR Detection Kit 采用了国际上公认的核酸检测标准技术――Real-Ti ...

miRNA是一种重要的非编码RNA，调控至少 30% 以上的基因表达，参与多种生理病理过程。2011年4月27日，Sanger microRNA序列数据库(miRBase)升级至17.0版。在新版本中，发夹前体序列升至16769条，新增1597条；成熟miR和miundefined产物共19724条，新增2383条；新版本报道序列共涵盖153个物种。目前已公布的人成熟microRNA为1711个，还有大量预测的microRNA基因需要通过 ...

Methods in Enzymology ,Volume 427Elsevier Science,2007; 304стрISBN: 0123739179MicroRNAs (miRNA) are tiny bits of genetic material that were unknown nearly 10 years ago but now represent an exciting field of study in biology. Upon their discovery, researchers revealed for the first t ...

1 基因表达调控简介所谓基因调控，是指生物体内控制基因表达的机制。基因调控主要发生在3个水平上，即一是：DNA水平上的调控、转录控制和翻译控制；二是：微生物通过基因调控可以改变代谢方式以适应环境的变化，这类基因调控一般是短暂而可逆的；三是：多细胞生物的基因调控是细胞分化、形态发生和个体发育的基础，这类调控一般是长期而不可逆的。基因调控的研究有广泛的生物学意义，是发生遗传学和分子遗传学的重要研究领域。生物体内决定细胞 ...

Let-7与肿瘤的关系，一个经典实例的完整再现，一次实战演习microRNAs完整解决方案暨国内首次生物美学技术培训班广州莱德尔生物科技有限公司与您相约2009年3月9日-2009年3月18日不容错过的理由：专业的品质，丰富的经验，莱德尔带您步入小分子的殿堂，与您分享microRNA研究最完整的解决方案。群雄逐鹿的战场上一块仅存的处女地，microRNA研究最后一次不容错过的良机：microRNA启动子的表 ...

miRNA和siRNA的基本介绍及区别1998年，Andrew Fire和Craig Mello提出了一项新技术：通过dsRNA诱导特异基因的沉默，即所谓RNAi。2000年，Amy Pasquinelli等将lin-4和let-7作小时序RNAs(stRNAs，mall temporal RNAs)。RNA干涉（RNAi）在实验室中是一种强大的实验工具，利用具有同源性的双链RNA（dsRNA）诱导序列特异的目标基因的沉寂，迅速阻断 ...

.miRNA实验技术答疑专场microRNA（miRNA）作为非编码RNA的代表，是目前表观遗传学研究的热门领域。miRNA在生物体内发挥着重大的调控作用。通过对靶蛋白转录或翻译过程的抑制，miRNA参与调节细胞增殖、分化、代谢等各个生理过程。此外，miRNA在疾病的调控中发挥重要作用，特别是其可以行使原癌基因或抑癌基因的功能，影响癌症的发生、发展和迁移。由于miRNA含有的核苷酸数量较少，在提取、逆转录和荧光定 ...

又淘到一本好书，不知道是否有人发过miRNA Protocols,清晰电子版，2006 humana press,分子生物学实验方法系列中的一本，顾名思义是专讲miRNA的，做miRNA的各位可以不用拿siRNA的方法去套了，两者毕竟还是有区别的。目录如下：1. The MicroRNA: Overview of the RNA Gene That ModulatesGene FunctionsShao-Yao Ying, Donald C. Chang, Joseph D. Miller, ...

各位战友：一下是小妹在Invitrogen公司的siRNA designer设计的shRNA序列，均为小鼠基因，也经过Blast验证，质粒选择的是pGPU6/GFP/neo，酶切位点分别是Bbs 1 和BamH 1，请给位专家给予指导！Rictor（190-208、845-863）：1.5-CACCGCTGGGCCATCTGAATAAC-TTCAAGAGA-GTTATTCAGATGGCCCAGC-TTTTTTG-3 3-CGACCCGGT ...

摘要：微小RNA基因和小的干涉RNA是小RNA的最主要组成部分，它们的相关性密切，既具有相似性，又具有差异性。它们功能的重要性提示我们基因组非蛋白编码区的序列蕴含着极为重要的信息。对小RNA的深入研究将使我们更深一步了解生命的奥秘。关键词：小RNA，siRNA，miRNA，非蛋白编码区引言长度大小为二十几个核苷酸的小片段RNA在近年得到了极大的关注，这些小RNA中有些可直接调控某些基因表达，进而调控细胞发育、决 ...

【1】pSUPER vectorhttp://www.oligoengine.com/pSUPER_New/pSUPER_Main2.html【2】pSilencerhttp://www.ambion.com/catalog/ProdGrps.html?fkApp=25&fkSubApp=145【3】psiRNA VECTORhttp://www.invivogen.com/siRNA/psiRNA.htm【4】pGE-1http://www.s ...

microRNA（miRNA）是一种机体内源性表达的单链小分子RNA，位于基因组非编码区，本身不具有开放阅读框（open reading frame，ORF），具有高度保守性，时序性和组织特异性。miRNA广泛存在于各种真核细胞中，不编码任何蛋白质，长度仅为20～24nt。成熟的miRNA 5′端有一个磷酸基团，3′端为羟基，由具有发夹状结构的约70～90nt的单链RNA前体经过Dicer酶加工后形成。成熟的miRNA形成RNA ...