最近碰到了好几个RNA提取的初学者来实验室学习如何提取RNA,对于如此简单的操作,却有如此多的人提取不出来,细问一下,原来他们的知识来源都是书本上或者网上的“RNA提取注意事项一类”的所谓经验,其实,他们提取不出来的真正原因,恰恰是他们严格遵守了所谓的经验,精力全放在不需要注意的地方,结果搞得自己很紧张, 真正需要注意的操作反而没有注意了。
发展了一种新的体外研究特异性结合pre-mRNA的方法。把寡核苷酸分成结合和未结合部分,然后使用双颜色阵列记录结合部分寡核苷酸的丰度,通过所获得的阵列数据生成高分辨率图谱,从而确定哪些是特异性序列,了解核蛋白结合pre-mRNA时的结构决定因素。
为了可视化RNA定位,我们合成了荧光标记的Vg1定位元件(VLE) RNA,然后将其通过显微注射转录至单个卵母细胞,最后用共聚焦显微镜成像卵母细胞。
细胞因子的分子生物学检测法 细胞因子基因的检测包括对其DNA的检测和mRNA表达水平的检测。特定细胞因子mRNA表达水平的检测有助于判断细胞表达该细胞因子的水平;而细胞因子DNA的检测可以判断该细胞因子基因存在与否及其变异情况。常用的方法有Southern印迹、斑点印迹、PCR,原位杂交及原位PCR等,Northern印迹及RT-PCR。这里简要介绍常见细胞因子mRNA表达水平的检测。一 ...
本文主要介绍了色氨酸操纵子以及它是如何发挥作用的
本文主要介绍了转录的几个步骤
本文主要介绍了不同σ因子对转录的调节
本文主要介绍了乳糖操纵子以及它是如何发挥作用的
本文主要介绍了RNA聚合酶Ⅲ基因包含哪些基因
本文主要介绍了转录的起始、延伸和终止
本文主要介绍了大肠杆菌RNA聚合酶的组成成分
本文主要介绍了mRNA的可变加工
本文主要介绍了tRNA的加工、RNA酶P和核酶
本文主要介绍了rRNA加工与核糖体
本文主要介绍了RNA聚合酶Ⅰ基因:核糖体重复
本文主要介绍了转录调控方面的一些例子
IntroductionNorthern blotting nuclease protection assays and RT-PCR are frequently used to analyze gene expression. While qualitative results from these assays are sometimes sufficient most researcher ...
RNA Marker ( RL1000; RL6000; RL10000) 可以进行一般琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。以RL10000为例,具体使用方法如下:普通琼脂糖凝胶电泳时1.按下列组份配置RNA Marker样品。2.均匀混合后65℃加热10分钟,迅速冷却至室温(最好用PCR仪)。3.使用高质量的琼脂糖,用1×TAE Buffer制备3%凝胶,制胶时凝胶中请加入溴乙锭(最终浓度:1 ...
Steve Hahn. last modified Sat Oct 17 1998Mix the following in an 0.5 ml eppendorf tube:10-20 micrograms total yeast RNA10 microliters hybridization mixH2O to bring the final volume to 25 microliters40 ...
ESTs(Expressed Sequence tags)是从已建好的cDNA库中随机取出一个克隆,从5’末端或3’末端对插入的cDNA进行一轮单向自动测序,所获得的约60-500bp的一段cDNA序列。ESTs的产生:从特定的状态的组织或细胞中分离mRNA,将mRNA逆转录成cDNA亚克隆到载体中,利用载体上的引物对插入片段测序测序出来的片段结果即称为ESTs(expressed sequenc ...