Chemicals needed:GlucoseL-(+)-Arabinose Sigma Cat # A3256L-RhamnoseSigma cat # R3875Cb (carbenicillin) Sigma cat # 1389DL-p-Chlorophen ...
RNA i Glossary Dicer - Dicer is a member of the RNase III family of nucleases that specifically cleave double-stranded RNA s. Dicer processes long dsRNA into siRNA of 21-23 nt. Interferon - A small ...
1.NCBIshRNA资源库 http://cgap.nci.nih.gov/RNAi About RNAi on CGAP The NCBI is part of the consortium supporting the preparation of human and mouse libraries containing RNAi constructs that target cance ...
检测基因特异阻断的最常用的方法是进行westernblot分析,比较导入siRNA 前后蛋白表达水平的变化。在一些情况下可能使用检测报告子基因的报告子系统例如β-半乳糖苷酶。也可以应用实时PCR(例如通过使用LUX™引物)或者其它类型基于细胞的分析检测细胞中转录本的水平。 ...
RNA interference (RNAi) is a phenomenon in which the introduction of double-stranded RNA (dsRNA) into a diverse range of organisms and cell types causes degradation of the complementary mRNA (Figure 1 ...
小分子干扰RNA (Small interfering RNA ,siRNA ) 是一种非常有效的工具,能够在包括哺乳动物细胞在内的多个体系中抑制特定基因的表达,从而研究某个基因的功能或者是相关信息。但是这种强有力的方法的难题之一是需要设计,合成siRNA s 和验证其效果,从而找到最有效的siRNA s 。这个过程需要花费相当的时间和经费。以化学法合成基因特异的siRNA s 为例,由于设计好的 ...
大约在十年前,2006年诺贝尔生理/医学奖得主CraigMello和AndrewFire发现,他们能够将短RNA 分子插入到线虫中并沉默特定基因的表达。今天,研究人员也常常使用这种强大的RNA 干扰方法来研究哺乳动物系统中的特定基因功能。 为了进行这种基因沉默实验,研究人员通常需要依赖化学合成的RNA 分子,而这个合成过程是相当昂贵的。本月《冷泉港实验手册》(ColdSpringHarborPro ...
本文来自于哈佛大学医学院果蝇RNAi 筛选中心的经典实验方法,专门用于果蝇RNAi 实验方法。感谢哈佛大学医学院果蝇RNAi 筛选中心的支持! A.Primer Designed dsRNA B.Template Selection C.PCR D.In vitro RNA Transcription E.dsRNA Purif ...
RNAi 实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程,本实验方法来自于加州大学Jim教授实验,很权威! Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi 1.Design polymerase chain reaction (PCR ) primers that will amplify 600-800 bp of sequenc ...
1) Place gene of interest between T7 promoters in Òdouble T7Ó plamsid. (slightly more difficμlt alternative: Place gene of interest in hairpin/inverted repeat config ...
pSico Oligo Design Click on the Mac OSX program pSicoOligomaker 1.5 to select and design oligos for pSico and plentilox3.7. To operate it simply paste your sequence in the "sequence" window ...
RNA干扰(RNA interference RNAi)正在迅速成为最受欢迎的阻断特异基因表达的技术。RNAi技术允许科学家关闭他们想要研究的基因,这是一种全新的令人激动的研究方法,通过研究基因表达缺失时细胞的表型,以确定基因的功能。最初,通过在无脊椎动物如:果蝇(Drosophila)和线虫(C. elegans)导入长的双链RNA,揭示了RNAi是一种降低特异基因表达的强有 ...
RNA 酶污染是全体从事 RNA 相关实验的人员的头号公敌。即使是100度高温或者是高压灭菌也不能完全灭活无孔不入的 RNases 。因而相关的实验中往往要用到RNA 酶抑制剂。最常用的 RNA 酶抑制剂 Human Placental ribonuclease inhibitor ( HPRI )是一种蛋白质,可与多种 RNA 酶(包括 RNases A B C 类)非共价结合成为等摩尔复合物, ...
RNA沉默是广泛存在于生物中的一种古老现象,是生物抵抗异常DNA的一种保护机制同时在生物生长发育过程中扮演着基因表达调控的角色。文章对RNA沉默研究中的几个热点问题进行了介绍,按RNA沉默持续时间的不同对其在植物中应用的方法进行了分析,并重点论述了RNA沉默在植物功能基因组研究、作物品质改良以及抗病毒植物培育等方面的应用及其发展前景。 RNA沉默(RNAsilencing)是一种结合和降解特异mR ...
How does RNAi work? Genetic and biochemical data indicate a possible two-step mechanism for RNA interference (RNAi): an initiation step and an effector step. a | In the first step input double-strande ...
RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(doublestrandsRNA,dsRNA)引起的,广泛存在于动物植物中的序列特异性转录后基因沉默过程,是生物体在进化过程中,抵御病毒感染及由于重复序列和突变引起基因组不稳定性的保护机制。Elbashir等发现,一种称为短干扰或小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)的RNA干扰中间体,能在果蝇中导致mRNA的降解。这种iRNA为2 ...
000" height="300" width="500" classid="clsid:D27CDB6E-AE6D-11cf-96B8-444553540000" How does RNAi work? Genetic and biochemical data indicate a possible two-step mechanism for RNA i ...
We use the Promega Ribomax Large Scale RNA Production System T7 (Cat. No.: P1300) to produce dsRNAs and the RNAi Exp.html" target=_blank> Jack Dixon protocol ( RNAi _Dixon.html" target=_b ...
目前RNAi技术已经进入了生物科学研究的许多领域,成为了一种主要的生物学研究工具,发展得相当迅速,并受到了此次诺贝尔奖评审委员会的青睐,获得2006年诺贝尔奖医学/生理奖。然而这一才历经十个年头的技术依然对于许多研究人员来说还是很陌生的,以下是有关 i技术在哺乳动物细胞中应用的具体设计策略,主要来自于《遗传》杂志2005年“ 干涉(i)技术应用于哺乳动物细胞的研究策略”,希 ...
Restriction Map and Cloning Site of the RNAi-Ready pSIREN-DNR Vector. Unique restriction sites are in bold. RNAi-Ready pSIREN-DNR is pr ...