RNAi的实验原理与方法近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。一、RNAi的分子机制通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effe ...
几乎所有的siRNA都不可避免的产生off-target效应,好一点的也许只会off-target几个基因,差一点的甚至可以off-target几十个基因。关于off-target的机制,以前认为是siRNA的sense strand对于其他基因mRNA的干扰造成,对于这个效应,可以利用最新的化学修饰方法削弱sense strand与RISC的结合,同时增强anti-sense与RISC的结合力,按照这个原理虽然也可 ...
我用附件传不上来,只能用这种笨法了,希望大家用的上 近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。 一、RNAi的分子机制 通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(initita ...
最近要写一篇关于RNAi的综述,昨天在nature上面找了一篇关于rnai全文的综述,觉得写的挺好,拿出来分享Nature(C) 2004 Nature Publishing Group----------------------------------------------Volume 431(7006) 16 September 2004 pp 338-342----------------------------------------------Revealing the world of RNA interferenceMello, Craig C.1 ...
The Knowledge Foundation: RNA in drug developmenthttp://www.knowledgefoundation.com/events/5071225_p.pdfA Link Between RNA Interference and Nonsense-Mediated Decay in C. eleganshttp://www-hhmi.genetics.utah.edu/bass/papers/science00.pdfRNAi in Cup ...
1998年Andrew Fire等首次发现并命名了RNA干扰(RNA interference,RNAi)。RNA干扰是指在真核细胞中引入双链RNA(double-stranded RNA)分子从而导致具有序列同源性的基因产生特异性基因沉默(gene silencing)的现象。属于转录后水平的基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS)。该技术的出现为功能基因组学、基因治疗学、药物开发等 ...
RNAi介绍1. RNAi现象RNA 干涉(或者叫做RNA干扰)指的是细胞内由双链RNA诱导降解与其配对的特定mRNA的过程。在一些生物系统中,少量拷贝的双链RNA能导致细胞内所有同源基因的降解。这个现象在进化过程中保守而且广泛,许多基因在这个过程中发挥了重要的作用。 人们发现这个现象在线虫、昆虫、哺乳动物、植物和真菌中广泛存在。而在RNAi现象在线虫中发现之前,其机制被认为是一种转录后基因沉默,共抑制或者是压制,被认为是 ...
RNA干涉(RNAi)1995年,康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA(sense RNA)以期观察到基因表达的增强。但得到的结果是二者都同样地切断了par-1基因的表达途径。这是与传统上对反义RNA技术的解释正好相反的。该研究小组一直没能给这个意 ...
RNAi片段siRNA设计原则RNAi target selection rules:1.Targeted regions on the cDNA sequence of a targeted gene should be located 50-100 nt downstream of the start codon (ATG).2.Search for sequence motif AA(N19)TT or NA(N21), or NAR(N17)YNN, where N is any nucleotide, R is purine (A, G) and Y is pyrimidine (C, U) ...
内容包括:1====humanaebook:RNA Interference, Editing, and ModificationAbstract:A comprehensive collection of cutting-edge methods for elucidating the function of new genes and altering gene expression. These readily reproducible techniques can be used either in transient ...
自己总结的RNAi干预的癌基因 75条(有部分重复) 大家一起来补全吧 最近在考虑做哪个基因 所以顺便总结了一下 大家多提意见AML1/MTG8 (205)APE1 #3ATF2 #3Bax (202)bcl-2 Antiapoptotic Esophageal adenocarcinomaBCL-2,xIAP(138, 213)BCR-AbL (136, 137)B-raf Serine/threonine kinase Malignant melanomaBRAF(V599E) (206) ...
RNAi药物,一针一百万?RNA interference RNA干扰 剂量 用量目前,用于动物实验的siRNA的通用剂量是10mg siRNA/公斤体重/每针。如果一个成人的体重是70公斤,那么一针就需要700mg siRNA。700mg siRNA多少钱?Qiagen目前的特别优惠价是0.15$/ug,Ambion的最低价格是0.19$/ug,Dharmacon的最低价格是0.12$/ug。按照这个价格,则700mg Qiagen的siRNA是1 ...
目前RNAi技术已经进入了生物科学研究的许多领域,成为了一种主要的生物学研究工具,发展得相当迅速,并受到了此次诺贝尔奖评审委员会 的青睐,获得2006年诺贝尔奖医学/生理奖。然而这一才历经十个年头的技术依然对于许多研究人员来说还是很陌生的,以下是有关RNAi技术在哺乳动物细胞中应用的具体设计策略,主要来自于《遗传》杂志2005年“RNA干涉(RNAi)技术应用于哺乳动物细胞的研究策略”,希望能给从事或者准备从事RN ...
RNA 干扰是一种自然发生的基因沉默机制,应用于基因功能研究和临床疾病治疗,就成为一种功能非常强大的工具。不过,开展RNAi实验并不难,不需要特殊的仪器,RNAi实验所需的4大要素一点不复杂:1对应目标基因的dsRNA(siRNA,长dsRNA,shRNA载体,看实验需要);2适合的转染或者其他将dsRNA递送进入细胞的方法;3适当的对照;4检测目标基因表达情况的方法1. 对应目标基因的dsRNA在非哺乳动物细胞中,直接 ...
RNAi在药物最佳靶点筛选和鉴定中的应用摘要最佳药物靶点的筛选和鉴定是新药研发的核心,是药物开发的第一步,也是药物筛选及药物定向合成的关键因素之一。在过去十年里,科学界已经在此领域做出了巨大的提高,如:基因组学和蛋白质组学以及人类基因序列的测定,而且在制药工业的投资不断加大。然而新药研发受到多因素调节、单因素之间相互作用等复杂药物调节机制的制约,临床上药物疗效还涉及到药物代谢以及药物的毒副作用。因此急需能够 ...
Optimizing RNA interference for application in mammalian cells来源:http://www.biochemj.org/bj/imps_x/pdf/BJ20040260.pdf是一篇34页的综述,自己感觉不错就推荐给大家上传不了,自己下吧AbstractOver the last two years the scientific community has rapidly embraced novel technologies th ...
做RNAi的战友可以先学习学习了。1、PTGS转录后基因沉默(post transcriptional gene silencing)一种首先在植物中确定,然后发现在动物中也存在的现象。尽管PTGS最初被描述作一种病毒防御和转位子沉默的内源方法,现在它已经成为一种新的令人激动的研究工具――RNA干扰。2、协同抑制(Cosuppression)基因沉默的一种特殊情况,来源于转基因的RNA与同源内源基因同时被抑制。3、静息作用( ...
RNAi实验原理与方法近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。一、RNAi的分子机制通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effec ...
RNA InterferenceALEX ECCLESTON AND ANGELA K EGGLESTONSenior EditorsThe most familiar role for RNA is as a relatively passive intermediary in the translation of information from genes into proteins. But other functions for this versatile molecule have been emerging. This Insight ex ...
RNAi实验原理与方法近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。一、RNAi的分子机制通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effec ...