光遗传学(optogenetics)是结合了光学(optics)及遗传学(genetics)的技术,借助其,我们能在活体动物甚至是自由运动的动物脑内、脊髓、外周神经内,精准地控制特定种类神经元的活动。光遗传学在时间上的精确度可达到毫秒级别,在空间上的精确度则能达到单个细胞级别。2010年,光遗传学被Nature Methods选为年度方法,同年被Science认为是近十年来的突破之一。这项技术目前在神经科学领域应用非 ...
化学遗传学技术(或称药理遗传学技术)是近年来与光遗传学一起出现的重要新技术。该技术通过对一些生物大分子实行改造,使其能和先前无法识别的小分子进行相互作用,从而达到可控、可逆(可以随时加入或除去化合物,从而启动或中断特定的反应)控制生物大分子的活性,该技术已经在信号转导、药物开发、功能基因组学等方面的研究中得到了广泛的应用。他们被广泛用于以细胞特异性、无创地增强或抑制神经元的活动。虽然DREADD缺乏像光遗传学那 ...
成像技术(Imaging)一、钙离子成像技术(Calcium imaging)钙离子成像技术(Calcium imaging)是指利用钙离子指示剂监测组织内钙离子浓度的方法。在神经系统研究中,我们常用钙离子成像技术监测神经元内钙离子的变化,提示神经元活动。有了钙成像技术,原本悄无声息的电生理活动就变成了一幅形象地、斑斓闪烁的壮观影像,研究人员可以同时大量追踪神经元活动,研究其关系,因而被全世界神经科学家们追捧。1)钙离子成 ...
神经元之间的环路连接非常复杂,完整而准确地显示这些环路的结构和变化,对揭示许多疾病的病因和新治疗方法的开发具有非常重要的意义。传统的神经示踪方法如电镜、Golgi染色、染料、肽类标记物等可以显示神经元的形态和投射,少数示踪剂如WGA、TTC等还可以实现跨突触标记,但这些方法都具有信号间接、方向不特异、跨突触后信号衰减严重等缺点,最重要的是,这些染料无法携带基因,因此只能显色。自20世纪80年代,Kristenss ...
病毒是由核酸分子(RNA 或 DNA)和 / 或蛋白质组成的非细胞形态,这是一种无法独立生长的生命体,其复制过程必须通过感染宿主细胞,将遗传物质导入宿主细胞,并依靠宿主细胞进行复制,组装成病毒颗粒。对病毒的研究可以分为「抗病毒」和「利用病毒」两种思路,而病毒载体正是「利用病毒」的思路。二十世纪七十年代,分子生物学家 Paul Berg 利用病毒的这一特性,改造 SV40 病毒感染猴子肾脏的培养细胞,做成第一个病毒载体。后来,科学家们开始从利用自然界中存 ...
研究简介噬菌体是迄今为止所研究的所有微生物群落中大量的成员,通过与其细菌宿主的相互作用影响微生物群落。尽管噬菌体在功能上很重要,而且无处不在,但与细菌相比,它们在城市环境中的探索还不够充分。废水是微生物生命的丰富来源,含有细菌、病毒和其他微生物,这些微生物存在于人类排泄物和环境径流源中。2020年6月16日,纽约大学基因组学与系统生物学中心E. Ghedin研究团队在mSystems发表了题为Initial Mapp ...
药物及其代谢物可以在用药者的尿液中被检测到,所以用药者的尿液经常被作为检测样本用来判别是否存在滥用药物行为或检测药物代谢情况。目前,临床及毒理实验室对尿液中药物及其代谢物的检测方法主要有气相色谱法(GC)、液相色谱法(HPLC)、气相色谱质谱法(GC-MS)、液相色谱质谱法(LC-MS)等,这些检测方法通常需要对尿液中药物或其代谢物进行提取处理,主要的提取处理方法有:液液萃取法(LLE),固相萃取法(SPE),固相微萃取法 ...
第1代测序技术——荧光标记的Sanger法在第一台全自动测序仪出现之前,使用最为广泛的测序方法就是 Sanger 在 20 世纪 70 年代中期发明的末端终止法测序技术。 Sanger 也因此获得 1980年的诺贝尔化学奖。 他的发明第一次为科研人员开启了深入研究生命遗传密码的大门。G1.1 最早版本的第1代测序仪是20世纪80年代中期在CalTech的LeroyHood实验室发明的。这一测序仪通过修改Sanger法得以实现。最关键的改变是采用具有 ...
BCA 蛋白定量法是实验室常用的蛋白质定量方法。Invent 所有蛋白提取试剂盒提取的蛋白均可使用 BCA 法进行定量!那么今天小编就手把手的教大家该如何用 BCA 来定量!BCA 法原理碱性条件下,蛋白将 Cu2+还原为 Cu+,Cu+与 BCA 试剂相互作用形成紫色的络合物,该水溶性的复合物在 562nm 处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。实验操作具体步骤1. 梯度稀释牛血清白蛋白(BSA)标准品( ...
按时间顺序整理1、 细胞房和生物安全柜(或超净工作台)先开紫外照射30min。作用:对环境灭菌(空气)。(备注:如果着急,至少也要开15分钟)在做实验之前考虑好需要哪些物品。开始照射之前,将所需要用到的物品都放到生物安全柜(或超净工作台)里面。常用移液枪或电动移液器等,需要在工作台上放置一套专用设备。细胞培养箱一般都已经调整好。定期留意一下二氧化碳是否足够。不够及时更换。2、 显微镜需要定期消毒酒精擦拭。注意:显微镜一般都放在细 ...
实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块样本2. 无水乙醇,二甲苯3. 移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1 ml); 1.5 ml,2.0 ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机,金属浴/水浴实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在漂洗液RW中加入无水乙醇,加入量请参见瓶上标签。在加入无水乙醇后在瓶身做好标记。
实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇 二甲苯3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
啊啊啊,要怎么样才能 KO 肿瘤小怪?急求,在线等!--日夜奋斗的医学君「嘿嘿,让小编来拯救陷于水火中的你,教你如何四步打败肿瘤小怪,顺利升级。第一步:体细胞变异检测,知己知彼方能百战不殆。第二步:易感基因筛查,铺开战线,地毯式搜索。第三步:NMF 突变频谱和突变特征分析,搞清局势,开始攻城略地。第四步:高频突变基因统计及通路富集分析,见缝插针,顺利 KO!小伙伴们,看明白了吗?贴心的小编将结合真实案例,为大家详细讲解肿瘤对抗攻略,Let's go ...
腺相关病毒属于微小病毒科(parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒,基因组大小约4.7kb.腺相关病毒可利用病毒载体将外源基因转入动物组织和细胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、表达稳定等多种优点,广泛应用于动物体内研究。腺相关病毒血清型众多(12种),不同血清型对不同组织亲和性不同,因此在具体科学研究中,以下问题往往困扰着广大科研工作者:选择何种血清型?如何注射?注射多少病毒?注射部位如何选择?注射多 ...
基因枪法 ( Gene gun) 又称粒子轰击、高速粒子喷射技术或基因枪轰击技术, 是由美国 Comel 大学生物化学系 John. C. Santord 等于 1983 年研究成功。首先在植物中获得成功应用。通过动力系统将带有基因的金属颗粒 ( 金粒或钨粒) ,将 DNA 吸附在表面,以一定的速度射进靶细胞,实现稳定转化的目的。小颗粒穿透力强,不需对靶细胞进行修饰。基因枪具有应用面广、方法简单、对治疗基因的大小要求不严格、转化时间短、瞬时表达持续时间长、一次处理多个细胞、安全性高等优点 ...
寨卡病毒通过识别放射状胶质细胞垂直传播影响小鼠后代的大脑皮层发育 寨卡病毒(Zikavirus,ZIKV)是一种单链RNA病毒,可通过蚊子进行人类之间的传播。可引起无症状传染或者温和病症,包括发热,身体不适,发疹以及结膜炎,极少数会通过损害周围神经系统引发急性感染性多发性神经炎(Guillain-Barre syndrome)。最近ZIKV在美洲地区,尤其是巴西大规模流行,导致了新生儿头小畸形比例的增加。有文献报道了小头 ...
我们都知道基因剪刀 CRISPR/CAS9 技术今年大火,之所以这个技术这么火和其对基因操作的方便性,高效性,准确性及高性价比是分不开的。CRISPR/Cas9 是一种能够对任何物种基因组的特定位点进行精确编辑的技术。其原理是核酸内切酶 Cas9 蛋白通过导向性 RNA (guide RNA, gRNA) 识别特定基因组位点并对双链 DNA 进行切割。一旦 DNA 链被切开后就能对特定基因引入敲除、敲入、突变等编辑。图注:基于非同源末端修复和同源重组原理可进行基因敲 ...
huazhan5 有没有自制探针的?而不是去买已经合成好的探针。。。希望可以交流哈~huazhan5 有没有人啊~帮帮我啦。biolinkphilic 可以看看这张帖子http://www.dxy.cn/bbs/thread/13765082其实做探针的进口试剂费用也不便宜。国内现在也有公司可以合成。huazhan5 biolinkphilic wrote:可以看看这张帖子http://www.dxy.cn/bbs/thread/137650 ...
xmu_2008 各位大虾,有个问题想请教,就是使用NF-KB抑制剂PDTC抑制NF-KB后,怎样能知道是否抑制成功?时间紧迫,希望高手们能积极赐教,谢谢!00501101 PDTC的作用是抑制IkB的降解(prevent NF-kB activation by a mechanism that involves inhibition of I-kB degradation followed by IKK-induced phosphorylation,一篇文献的原话)RNA干扰 ...