DNA基础知识

相关专题 随着分子生物学技术的发展，检测基因结构和突变的方法不断涌现.尤其是PCR技术问 世以后，各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展.如不对称 PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage，RNAase)、限制性 片段长度多态性分析(Restriction Fragment Len ...

相关专题 DNA斑点印迹的制备 预备1．冰浴中以70W左右的超声波处理基因组DNA 1min，用琼脂糖凝胶电泳检测片段大小，这些片段大小均应为7～10kb。2．用TE缓冲液将DNA稀释至0.5μg/μl。 斑点印迹的制备1．加热5μg DNA（在10μl TE缓冲液中）至95℃ 10min，冰浴5min。用微量离心管短暂离心收集液滴，置冰浴。 ...

相关专题 1、提取DNA的简易方法:1)、从全血中提取DNA：取20μl抗凝血于0.5ml无菌管中，加500μl左右的ddH2O混匀后，12000rpm离心2分钟，弃上清，（若沉淀中仍 有红细胞需重复此操作1-2次）加入样品提取液20μl混匀100℃煮10分钟(可在扩增仪上进行)后12000rpm离心5分钟取上清2μl进行扩增。2)、从其它有 ...

相关专题 提取鸡血细胞的细胞核物质析出含DNA的黏稠物过滤含有DNA的氯化钠溶液DNA的鉴定 ...

相关专题 HHMI News-January 092004-New Insight into Control of Parental Gene Expression in Eggs 　　Researchers have identified a crucial step in a genetic process required for th ...

相关专题 越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA（small interfering RNAs，siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子，能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的mRNA，这个过程就是RNA干扰途径（RNA interference pathway）。RNAi的应用包括功 ...

相关专题 【1】．DEAE－葡聚糖法 一、实验材料： 1．50mg/ml DEAE-葡聚糖溶液（500mg DEAE-葡聚糖溶于10ml水，1ml分装，高压灭菌，储存于-20℃） （Sigma） 2．TBS溶液(PH 7.4) NaCL 8.0g/L KCL 0.2g/L Tris 3.0g/L 酚红 0.015g/L (HC ...

相关专题 实验原理：在去污剂SDS及EDTA存在下，通过蛋白酶K消化细胞蛋白质，RNA酶消化RNA获得细胞基因组DNA。本方法获得的DNA可用于Southern杂交及构建文库。 一、实验材料： 1．细胞消化缓冲液： 100mM NaCL 10mM Tris·CL (PH=8.0) 25mM EDTA (PH=8.0) 0.5% S ...

相关专题 Sanger法DNA测序的试剂　　现行的逻终止法人加减法序列测定技术（Sacger和Coulson，1975）发展而来的。加减法首次引入了使用特异引物在DNA聚合酶作用下进行延伸反应、碱基特异性的链终止，以及采用聚丙烯酰胺凝胶区分长度差一个核苷酸的单链DAN等3种方法。尽管有了这些进展，但加减法仍然太不精确，也太不得法，因此难以广为 ...

相关专题 一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度，并能对实验结果进行分析。 二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针，同 ...

相关专题 一．实验目的1．以pGLO质粒转化大肠杆菌为例，学习转化的基本原理及方法。2．验证DNA是遗传物质，加深对中心法则的理解。二．实验原理转化（transformation）是指一段同源或异源的DNA转入受体细胞并得到表达的水平基因的转移过程，是现代分子生物学研究和基因工程不可缺少的重要技术。目前常用的转化方法有CaCl2法(化学转化法 ...

相关专题 实验内容 采用CTAB法从植物叶片中提取基因组DNA并进行纯度分析和琼脂糖凝胶电泳. 目的要求 掌握CTAB法从植物叶片提取DNA的原理和方法. 实验原理 1原理 核酸是生物有机体中的重要成分在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起以核蛋白的形式存在.核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两大类在真核细胞中前者主要存在于细胞核 ...

相关专题 焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术是新一代DNA序列分析技术，该技术无须进行电泳，DNA片段也无须荧光标记，操作极为简便。Pyrosequencing技术是由4种酶催化的同一反应体系中的酶级联化学发光反应（参见Pyrosequecing的原理），在每一轮测序反应中，只加入一种dNTP，若该dNTP与模板配对，聚合酶就可以 ...

相关专题 PCR 的问题，无疑是绝大多数学生物的人都关心的问题。今天我们把相关内容整理出来，与大家共同讨论，希望对大家能有所帮助。 一、引物设计所谓“工欲善其事，必先利其器”，这年头手工设计引物的人似乎不多，还是用软件方便些，防止你一不小心看走眼，丢一个碱基，同时计算起来也方便。设计软件有很多，既可以在线设计（如Primer3 http:// ...

相关专题 随着PCR技术的发展，人们在此基础上建立起了一系列基于基因分离的新技术新方法。如mRNA差别显示技术（DDRT-PCR）、以及进一步改进的代表性差示分析（RAD），抑制性扣除杂交（SSH）和交互扣除RNA差别显示技术（RSDD）。 差别显示ＰＣＲ是根据绝大多数真核细胞mRNA3’端具有的多聚腺苷酸尾（polyA）结构， ...

相关专题 PCR基础 聚合酶链式反应（PCR）过程利用模板变性，引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列。这是一个指数增长的过程，因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板，使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术。一般，经过20-30个循环得到的扩增产物就足够在溴化乙锭染色的凝胶上观察到。反应包括几个成分（表1）。模板可以为纯化的基因组或质 ...

相关专题 错配PCR-限制性片段长度多态性分析检测HBV前终止密码变异株技术的建立及临床应用　周伯平 徐六妹 王火生 付涌水 李卫宁 韩红星 马为民 袁 静深圳市东湖医院 深圳市肝病研究所 518003　摘要 采用错配聚合酶链反应(mpPCR)对HBV前C区基因进行扩增，对PCR产物进行限制性片段长度多态性分析(RFLP)，鉴定前C区第83位 ...

相关专题 　　幽门螺杆菌（Hp）感染在人群中广泛存在，Hp的分型鉴定对其感染的临床及流行病学研究具有重要意义。国外文献报道的几种基因型技术使Hp的分型鉴定成为可能，而PCR及单链构象多态性（Signle-strand conformation polymorphismsSSCP）分析在菌株分型鉴定中的应用则尚未见报道。作者采用PCR-SSCP ...

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相关专题 一、 目的 熟练掌握抽提细菌DNA的一般方法 二、原理 要进行重组DNA 实验，就离不开外源基因的纯化，而外源基因主要来源之一就要直接从生物的染色体DNA上制备，所以制备高质量的染色体DNA样品经常为基因工程实验所需要，抽提细菌染色体DNA的方法目前已有许多种，这里所介绍的两种方法：一适用于枯杆菌染色体的抽提;另一种方法则适用于大 ...