活体电穿孔法介绍1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115μm ,这种通道能维持几毫秒到几秒,然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微小的通道进入细胞 。近年来活体 ...
本人有大量的资料资源,有需要的朋友欢迎来交换,邮箱:1739507720@qq.com:质粒类别抗性详细信息pGEX4T-1大肠杆菌质粒AmppGEX4T-2大肠杆菌质粒AmppGEX4T-3大肠杆菌质粒AmppGEX-6P-1大肠杆菌质粒AmppGEX-6P-2大肠杆菌质粒AmpPGEX-KG大肠杆菌质粒AmppGEX-6p-Caspase大肠杆菌质粒AmppET3a大肠杆菌质粒AmppET3b大肠杆菌质粒Am ...
真核基因表达调控 一、真核基因组的复杂性 与原核生物比较,真核生物的基因组更为复杂,可列举如下。 ▲真核基因组比原核基因组大得多,大肠杆菌基因组约4×106bp,哺乳类基因组在109bp数量级,比细菌大千倍;大肠杆菌约有4000个基因,人则约有10万个基因。 ▲真核生物主要的遗传物质与组蛋白等构成染色质,被包裹在核膜内,核外还有遗传成分(如线粒体DNA等),这就增加了基因表达调控的层次和复杂性。 ▲原核生物的基因组基本上是单倍体,而真 ...
LAMP法的原理该方法主要是利用4种不同的特异性引物识别靶基因的6个特定区域,且可在等温条件进行扩增反应。基因的扩增和产物的检测可一步完成,扩增效率高,可在l5~6O min扩增1O^9~lO^10 倍;特异性高,所有靶基因序列的检测可只通过扩增产物的有、无来判别。有、无扩增反应是利用荧光定量PCR仪检测反应的荧光强度或利用核酸扩增过程中产生的焦磷酸镁沉淀反应用浊度仪检测沉淀浊度来判定的1.引物的设计:基于靶基因3'端的 ...
1:DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12:BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克 ...
我从网上看到的,与大家分享。点此下载Highly Efficient Ligation for Large InsertsOne of the major problems with the success of ligation reactions, and thus the cloning experiment as a whole, is ensuring the restriction digests are complete and the dephosphorylation of the vector termini was successf ...
Star ActivityIt has been demonstrated that under extreme non-standard conditions, restriction endonucleases are capable of cleaving sequences which are similar but not identical to their defined recognition sequence. This altered or relaxed specificity has been termed “star” ...
可以肯定很多战友知道麻省理工学院的课件已经在网上全部公布,但有些战友可能不知道在哪里可以看到他们。下面提供支持在线浏览的生物学课件的网址给大家(并且这些教程是可以下载的)http://www.core.org.cn/OCW_CN/Biology/index.htm我想这对很多战友来说是不可多得的好教材。坦白来说,我把它当成一种财富,我近期已经阅读了他的遗传学教程,发现真的讲得很好,深入浅出的为我们讲述了遗传学的方方面 ...
The RNeasy Mini Kit from Qiagen is designed for RNA extraction, although the basic formatis similar to other Qiagen products designed to purify nucleic acids: ion exchange columnsspecifically bind RNA which is purified by wash steps and subsequently eluted in aqueoussolution. The RNea ...
分子生物学实验人员软件解决方案分子生物学实验人员软件解决方案在互联网上,有很多软件可以解决对单个基因进行研究的分子生物学实验人员从立项到最后写论文的实际问题。本文提供了对相同作用的很多软件进行比较后推荐给一线实验人员使用的Windows应用软件。一、资料收集整理阶段。本阶段需要查找某个项目专题的文章,并写出对该专题的综述,以便对自己所要做的课题的现状有一个基本的了解。推荐软件:Reference Manager 9 ...
刚才查文献时看到的,某机构发表的核酸相关研究的文章,都已经提供了PDF格式的链接。大家看看有没有自己需要的文献。http://genome.imb-jena.de/publications/index.pl2006:Birkenmeier G, Nicklisch S, Pockelt C, Mossie A, Steger V, Glaser C, Hauschildt S, Usbeck E, Huse K, Sack U, Bauer M, Schafer A (2006)Polymyxin B-conjugated ...
表达载体的构建方法及步骤一、载体的选择及如何阅读质粒图谱目前,载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。一个合格质粒的组成要素:(1)复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。(2)抗生素抗性基因可以便于加以检测,如 Amp+ ,Kan+(3)多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段(4) P/E 启动子/增强子(5)Terms 终止信号(6)加 poly(A)信 ...
一,酵母表达系统毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K,宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二,原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性带His标签(C端):PET21-(a)氨苄抗性 ...
1.目的学会用限制性内切酶切割质粒DNA。2.原理II型限制性内切酶能识别双链DNA内部的特殊序列并在识别位点处将双链切断,形成粘性末端或齐平末端,通过电泳酶切后的DNA混合物能够确认和分离酶切片段。3.器材旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5ml微量离心管,双面微量离心管架,水漂,恒温水浴。4.试剂Pinpoint™xa-3质粒,EcoR V,BamH I,内切酶缓冲液(10×),10×电泳加样缓冲液,荧光染料。5.实验 ...
Dear ×××(某外国机构名称),Thanks you for your kind assistance to our research project.I am an associate professor in ×××××××××(国内研究所或大学机构名称,最好不要用公司,以免被怀疑商业目的) and also member of the State Key Laboratory. And one of my projects focuses on ××××××(简单一句介绍实验目的). Isolating cells seems to be a problem hard to g ...
2,3-DPG:2,3-diphosphatidylglyceric acid,2,3-二磷酸甘油酸2-CdA:2-chlorodeoxyadenosin,cladribine,2-氯去氧腺苷3H-TdR:tritiated thymide,氚标记胸腺嘧啶核苷5-Aza:5-azacytidine,5-氮(杂)胞苷a2-PI:a2-antiplasmin, a2-纤溶酶原抑制物AA:aplastic anemia,再生障碍性贫血AAV:aden ...
做了好事——下载了,要留名啊!http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=2594627fbvwb0br3hfv59kfPrefaceGene therapy and vaccination with nucleic acids is one of the most striking innovations in medical and veterinary sciences. The treatment of a disease on the level of genes rather than on t ...
目录在苹果机(Macintosh)上的安装与升级 05通过因特网升级 06软件安装 07网络安装 08疑难解答 12在PC机(Windows)上安装与升级 17通过因特网升级 18软件安装 19从 EditSeq 开始 21从 GeneQuest 开始 31从 MapDraw 开始 44从 MegAlign 开始 54从 PrimerSelect开始 65从 Protean 开始 78从 SeqMan II 开始 89L A S E R G E N Ef o rWi n d o w s & M a c i n t o s hDNASTA R I n c . ( 6 0 8 ) 2 5 8 - 7 4 2 0 f a x : ( 6 0 8 ) 2 5 8 - 7 4 3 9e m a i l : s u p p o r t @ d n a s t a r. c o m在苹果机(Macintosh)上的安装与升级通过因特网升级必备条件 6下载升级程序 ...
外源DNA和质粒载体的连接反应外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口,当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化,这两种酶 ...
号召大家参加2004年“中国BBS社区100强”评选,支持丁香园! 请点击http://it.icxo.com/100bbs投票作为医药生命科学的唯一代表,丁香园已经被设定为此次活动的投票选项,真诚希望大家支持我们,投上您庄严的一票!2004年“中国BBS社区100强”评选全球互联网第二次发展热潮已经降临,国内外风险投资家都在大规模搜寻投资对象,据世界权威的IT评测机构--世界IT实验室2004年10月研究报告显示:互联 ...