DNA基础知识

FISH检测要求使用中性福尔马林（不恰当的pH值会损伤DNA）固定24-48小时。固定时间不足会导致组织较软，在预处理过程中会丢失部分组织和信号。固定时间过长导致组织变脆，不利于切片，也会导致大分子交联情况严重，很难进行消化。福尔马林固定石蜡包埋的组织需要用蛋白酶进行消化以去除多余的组织来暴露细胞。如果消化不足（酶浓度低、温度不适合、时间太短），镜下会出现云雾状组织覆盖在细胞上，无法观测到暴露独立的细胞核，从而降低 ...

伸手党请注意：转帖请注明来自丁香园论坛1：NEBcalculator用途：计算载体连接比例，酶切位点和buffer的选择地址：http://nebiocalculator.neb.com/#!/2: Biomath Calculator用途：溶液稀释、溶液配制计算和核酸浓度的计算地址：http://www.promega.com/resources/tools/biomath-calculators/3：IDT sciTool用途：引物和 ...

基因芯片技术及其应用　基因芯片(DNA Chip) 又称DNA 芯片、DNA 微阵列等等,是伴随人类基因组计划而产生的,是近年来分子生物学及医学诊断技术的重要进展。该技术的突出特点在于其高度的并行性、多样化、微型化、自动化,被认为是生命科学研究中继基因克隆技术、基因自动测序技术、PCR 技术后的又一次革命性的技术突破1 　基因芯片技术简介基因芯片将半导体工业的微型制造技术与分子生物学技术结合起来,通过把巨大数量的寡核苷酸、肽核酸或cDNA 固定 ...

以下是我构建载体的思路，但自己心里没底，不知是否可行，请各位老师指教!目 的：构建hPOT1正反义基因真核表达载体材料 DH5α大肠杆菌由学校细胞生物教研室提供；含全长hPOT1 cDNA的pLPCNMyc POT1质粒由美国Rockefeller大学的de Lange教授惠赠；pcDNA-3.1(－)真核表达载体购自美国Invitrogen公司；限制性内切酶BamHⅠ、Xho Ⅰ、Nhe I、T4DNA连接酶和牛小肠碱性磷酸酶（CIP）购自 ...

连接非常丰富，值得收藏：http://bioinformatics.vg/仅PCR就有很多内容：http://www.bioinformatics.vg/biolinks/bioinformatics/PCR%2520and%2520Primer%2520Design.shtml内容有：Sequence AnalysisManipulation, Search, Features, Retrieval, Alignment, Phylogeny ... ...

三院士PNAS杂志联合发表肝癌研究成果作者:何嫱 来源:生物通 发布者: 吴林寰 类别:新闻扫描近日，由中国科学院北京基因组研究所吴仲义所长及其科学团队与国立台湾大学医学院陈定信院士、陈培哲院士共同合作开展的“肝癌癌症基因组合作研究”计划获最新进展，相关学术论文在最新出版的《美国科学院院刊》（PNAS）杂志上发表。吴仲义教授早年毕业于台湾东海大学，1982年获得加拿大英属哥伦比亚大学遗传学博士，曾先后任职罗彻斯特大学和芝加哥大学 ...

核酸定量检测核酸的定量核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长 260 nm。每种核酸的分子构成不一， 因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg / ml 的dsDNA，37μg / ml 的ssDNA， 40μg/ml的RNA，30μg/ml的寡核苷酸。测试后的吸光值经过上述系数的换算， 从而得出相应的样品浓度。测 ...

以FAK为靶点的RNA干扰的黑色素瘤基因治疗RNA 干扰（RNA interference, RNAi）是由双链RNA 介导的序列特异性的转录后基因沉默现象。它通过识别与之序列相同的mRNA 来使特定基因在转录后水平被降解。RNAi 技术具有高的基因沉默效率和特异性, 为基因治疗等研究领域提供了一个新的研究手段。黏着斑激酶（FAK）是一种定位于黏着斑的非受体型酪氨酸激酶，参与调控细胞的运动和增殖等生命功能。FAK 在肿瘤的生成和恶化过程中 ...

我要开始做RFLP，需要买NEB的3种限制性核酸内切酶：RsaⅠ，DdeⅠ，BstUⅠ，但在NEB的网站上查到的这3种酶的说明却看不懂，因为不知道要买多少，所以也不敢买，急死我了！！！现在以RsaⅠ的说明为例，希望高手能解决我的燃眉之急，多谢了！！！Rsa I#R0167S 1,000 units $50 (USA)#R0167L 5,000 units $200 (USA)NEBuffer 1 2 3 4% Activity 100 100 50 1005´ ... G T^A C ... 3´3´ ... C A^T G ... 5´Source: An E. c ...

分子遗传学常用词汇(中文)腺嘌呤Adenine(A)：一种碱基，和胸腺嘧啶T结合成碱基对。等位基因(Alleles)：同一个基因座位上的多种表现形式。一般控制同一个性状，比如眼睛的颜色等。氨基酸（Amino Acid）：共有20种氨基酸组成了生物体中所有的蛋白质。蛋白质的氨基酸序列和由遗传密码决定。扩增（Amplification）：对某种特定DNA片段拷贝数目增加的方法，有体内扩增和体外扩增两种。（参见克隆和PCR技术）克 ...

Electrophoresis其实并不简单我们要学的还很多Chemical Safety . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 334What Is the Safest Approach to Working withAcrylamide? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 334What Are the Symptoms of Acrylamide Poisoning? . . . . . . 335What Is the Medical Response to Accidental AcrylamideExposure? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 335How Can You Dispose of Excess, U

前不久在本论坛对转基因食品的一些探讨，中间发生了很多插曲，今天我收到了某生物工程的药理专业jinlzhao博士回信：全文如下：哈药：你好，最近太忙，无暇仔细阅读您的帖子，今日看毕，给出我的一点意见，你可以在合适的时候发出。首先声明，本人不熟悉转基因食品，但是本人有幸做过转基因动物实验。以我的经验以及我和国外几位转基因同行的交流，我发现，转基因动物实际上是不可控的，或者说是很难控制的。转基因动物的制作过程，在此我就不 ...

看了下面的文章，我觉得◎＃￥％％￥＃◎碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 /25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然不过的了。那么50m ...

http://blog.bioon.com/user3/26347/archives/2007/148549.shtml含全文下载日本和美国科学家进行的两项独立研究，首次利用人体测表皮细胞制造出了类胚胎干细胞。这一技术有望用于特定疾病的干细胞研究和治疗，并且避开了利用晶胚或卵母细胞获得胚胎干细胞的伦理争议。相关论文分别在线发表于《细胞》和《科学》杂志。近些年来，从事干细胞研究的科学家已经试图将一些正常的体细胞直接转化 ...

琼脂糖糖凝胶电泳，是一门常规技术，需要熟练掌握。1．目的学会常用的DNA琼脂糖凝胶电泳、。2．原理DNA双螺旋分子骨架两侧带有含负电荷的磷酸根，在电场中会向正极方向移动。不同长度的DNA由于受到凝胶介质的阻力不同，表现为不同的迁移率而被分开。3．器材电泳仪，水平凝胶电泳槽和梳子及其制胶模块，250ml三角瓶，微波炉，台式离心机，旋涡混合器，凝胶成像系统，分光光度计，微量移液取样器，1.5ml离心管，双面微量离心管架，试管 ...

【鸡毛蒜皮】之3重组质粒是“筛”出来的吗？重组质粒的筛选是质粒构建的重要步骤，重组子是筛出来的，这个命题没有问题。问题是最关键步骤不在筛选。影响重组质粒构建效率的最关键步骤在于酶切，不管是否是定向克隆还是非定向克隆。酶切的关键在于切干净，彻底的酶切反应是成功的一半，尤其是载体的酶切。1）酶切反应的前提是对质粒载体的大致定量，一般大小的质粒（3－5kb）一次连接的用量在100ng左右，一般挖胶回收的损失在50%左右，为 ...

请问有哪些原核表达载体的mcs含有以下三个以上以下的酶切位点。谢谢AarI CACCTGC,4,8 MfeI C/AATTGAatII GACGT/C MluI A/CGCGTAccI GT/MKAC MmeI TCCRAC,20,18AceII GCTAG/C MscI TGG/CCAAclI AA/CGTT NaeI GCC/GGCAfeI AGC/GCT NarI GG/CGCCAflII C/TTAAG NdeI CA/TATGAgeI A/CCGGT NgoMIV G/CCGGCAhdI Gundefined*N~HNN_...

【1】请在标题前加上【原创】 【求助】 【交流】 【转帖】 【共享】 【建议】 【求购】 【申请加分】 【旧贴整理】等字样，以使版面整齐并便于浏(【】符号可在智能WB中打"v1",下翻几页就可,或自此拷贝)。【2】请在=No exact sub board=下拉框中选择相应的子版发帖。 NCBI生物信息学研究工具：http://www.ncbi.nih.gov/Tools/NCBI生物信息学研究工具网站由美国国家生物技术信息中心支持。该网站提供了许多程序的链接，内容包括数据挖掘、核 ...

DNA QUANTITATION--------------------------------------------------------------------------------AGAROSE-GEL METHOD WITH ETHIDIUM BROMIDE STAINING1) The DNA for assessment was removed from cold storage and heated at 37oC for 30 min (or 3 min at 60oC ). Flicking the bottom of tubes ensured that all the DNA has been suitably r ...

本是想回答一个网友的相关问题，可我找不到他/她的贴在哪儿，只好自己发一贴。谈一下：有关“KOZAK CONSENSUS SEQUENCE”I.Kozak Sequencehttp://www.sciencegateway.org/resources/kozak.htmMost eukaryotic mRNAs contain a short recognition sequence that greatly facilitate the initial binding of mRNA to ...