DNA基础知识

质粒DNA的大量提取和纯化　　在制作酶谱、测定序列、制备探针等实验中需要高纯度、高浓度的质粒DNA,为此需要大量提取质粒DNA。大量提取的质粒DNA一般需进一步纯化,常用柱层析法和氯化绝梯度离心法。（一）、碱法　　1、取培养至对数生长后期的含质粒的细菌培养液400ml，4℃下5000转离心15分钟,弃上清,将离心管倒置使上清液全部流尽。2、称重一般为3-4g.　　2、将细菌沉淀物重新悬浮于4ml/1g溶液I中,充分悬浮菌体细胞。(该步骤很 ...

国庆七天乐，积分多多，奖励多多【公告/领奖】在本版参与过讨论并得分的战友请进为感谢各位战友长期以来对核酸版的支持，将给予额外的积分奖励，以表心意，祝大家国庆快乐。条件：在任意连续的30天、60天、90天...内在本版得分≧5、10、15...的战友请跟帖领取 “奖金”（加1、2、3、4、5分，最多5分），此外，如果国庆期间（2008.10.01开始-2008.10.08上午截止）在本版得分超过3分的（本次活动奖金除外），可以再跟帖加1分。如某 ...

Procedure for Transfection of Mammalian CellsMaterials:LipofectamineIMDM containing 10% fetal bovine serum, 1% glutamine, 1% aaIMDM containing 1% glutamineIMDM containing 20% fetal bovine serum, 1% glutamine, 1% aa(1)In a six-well or 35 mm tissue culture plate, seed ~2x 105 cells per well ...

虽然是老东东了，虽然too old，但是我加上了我自己的整理：）http://www.postharvest.net.cn/films/UploadPhotos/molecular/在膜上杂交.rm　http://www.postharvest.net.cn/films/UploadPhotos/molecular/用磁珠法从总RNA中分离mRNA的原理.rm　http://www.postharvest.net.cn/films/Uploa ...

主题：染色质结构与基因表达调控胡建广　杨金水Chromatin Structure and Gene ExpressionHU Jian-Guang　YANG Jin-Shui(Institute of Genetics,　Fudan University,　Shanghai　200433)　　真核细胞中DNA与蛋白质结合形成染色质和染色体是生物进化的必然结果〔1〕。　　核小体(Nucleosome)是染色质的基本结构单位，其为长度约160bp的DNA绕由H2A, H2B, H3和H4 ...

a．将0.1μl载体ＤＮＡ转移到无菌微量离心管中，加等摩尔量的外源ＤＮＡ。b．加水至7.5μl，于45℃加温５分钟以使重新退炎的粘端解链，将混合物冷却到０℃。c．加入：10xT4噬菌体ＤＮＡ连接酶缓冲液 １μlＴ４噬菌体ＮＤＡ连接酶 0.1Weiss单位５mmol/L ATP 1μl于16℃温育１－４小时10xT4噬菌体ＤＮＡ连接酶缓冲液200mmol/L同Tris.Cl(pH7.6)50mmol/K MgCl250mmol/L二硫苏糖醇5 ...

质粒提取的原理http://www.bioon.com 生 物 谷 网 站碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的研究生水平都差不多， ...

此方法是我在国外的一个实验室工作时所用的。简单、批量、转化效率高。Simple and Efficient Method (SEM) to Make Competent CellsPreparation of Frozen Competent of DH5α1) 250 ml TB solution10mM Pipes or 10 mM Hepes, 0.65g15 mM CaCl2, 0.55g250 mM KCl, 4.66undefined55 mM MnCl2, 2.47gAll the components except for MnCl2 were mixed and the ...

资料太多，时间有限，只整理了这些，才知道分子生物学何其博大精深。第一次整理，经验不足。申请加分。;)分子生物学理论和书http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=1205089&sty=3&keywords=%B7%D6%D7%D3%C9%FA%CE%EF%D1%A7http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=105&id=552642&sty=3&keywords=%B7%D6%D ...

认领翻译的战友请跟帖注明“认领本文翻译，48小时内未完成，请其他战友认领！”欢迎大家认领校对，校对质量优秀者享受加分，投票，并奖励 5 个丁当请根据自己专业背景选择认领，如使用翻译软件翻译，被发现者扣分1-2分经常认领而不能及时提供优质稿件者将被列入黑名单，取消认领资格，请大家注意！新近参与本次活动的会员请查看：http://news.dxy.cn/bbs/topic/21537141寻找最近的翻译贴请查看：http://sear ...

这里是2010年1月份回复为0的帖子，由于各种原因沉淀了下去。为了发挥DXY的资源优势和互助传统，特此整理，请各位战友积极应助，加分从优！如果您是发帖者，并且有了很好的解决办法，也最好能发帖上来，这样，便于后来者再遇到类似问题的时候能够向您学习！thanks！1.请站友们推荐一个可免疫筛选cDNA表达文库方案。http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=16306123&sty=1&t ...

转基因动物基本概念转基因老鼠的命名1转基因老鼠的命名2外源基因导入方式及检测flox/cre recombination system 转基因动物基因打靶与核移植结合生产乳腺反应器转基因动物BALB/C小鼠质粒转基因EGFP转基因小鼠的检测转基因检测失败的原因细胞转基因丁酸钠增强基因表达bFGF的问题1bFGF的问题2AAV转基因植物转基因植物基因组DNA Southern Blot农杆菌介导的水稻转基因程序载体马铃薯 ...

DNA芯片技术基因芯片（又称DNA芯片、寡核苷酸芯片等）最早由E． Southern在1989年提出。其突出特点在于高度并行性、多样性、微型化和自动化。高度的并行性 可大大提高实验的进程，有利于DNA芯片技术所展示图谱的快速对照和阅读。多样性 在单个芯片中可以进行样品的多方面分析，提高了分析的精确性，避免因不同实验条件产生的误差。微型化 可以减少试剂用量和减小反应液体积，从而提高样品浓度和反应速率。高度自动化 可以降低制造芯片的成 ...

pEGFP-N1质粒图谱及信息多克隆位点区Restriction Map and Multiple Cloning Site of pEGFP-N1. (Unique restriction sites are in color or bold.) The Not I site follows the EGFP stop codon. The Xba I site ~undefined) is methylated in the DNA provided by CLONTECH. If you wish to digest the vector with this enzyme, you will need to transf ...

基因工程的诞生基因工程是分子水平对生物遗传作人为干预，要认识它，我们先从生物工程谈起：生物工程又称生物技术，是一门应用现代生命科学原理和信息及化工等技术，利用活细胞或其产生的酶来对廉价原材料进行不同程度的加工，提供大量有用产品的综合性工程技术。生物工程的基础是现代生命科学、技术科学和信息科学。生物工程的主要产品是为社会提供大量优质发酵产品，例如生化药物、化工原料、能源、生物防治剂以及食品和饮料，还可以为人类提供 ...

碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。每个曾经用碱法抽提过质粒朋友，希望你看本文后能有所收获。 为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然 ...

【交流】做了很多不一定清楚的知识----质粒提取的原理碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的研究生水平都差不多， ...

1.启动子基础知识http://www.dxy.cn/bbs/thread/1930452http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/58370_0.html2.怎样找到启动子http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/176817_0.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/176860_0.htmlht ...

http://61.167.57.67/dwhx/dwhx_26/教育网内都可在线看第八节 分子生物学技术 (1:21)一、 DNA重组技术 (0:48)DNA重组技术定义 (1:37)DNA重组技术别称 (0:11)（一）DNA重组技术的基础 (1:37)1.核酸的制备 (0:52)2.限制性内切酶 (0:36)限制／修饰系统 (0:32)限制性内切酶 (0:16)I型限制性内切酶 (0:31)Ⅱ型限制性内切酶 (1:08)EcoRI的识别序列 (0:47)限制性内切酶切割DNA的方式 (0:2 ...