DNA基础知识

1．目的学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。2．原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的DNA酶切片段。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，台式离心机，琼脂糖凝胶电泳系统，微波炉，水漂，恒温水浴 ...

1溶液配制:1.1 Buffer P1:(悬浮用)成分：50mM Tris.HCl, pH8.0, 10mM EDTA, 100ug/mL Rnase A配制：2M Tris.HCl, pH 8.025mL0.5M EDTA, pH 8.020mL双蒸水至 1L，灭菌。使用前每1L buffer加入100mg RNAse A，并于4℃保存。1.2 Buffer P2：（裂解用）成分：200mM NaOH, 1% SDS配制：8g NaOH固体溶解于500mL双蒸水中，成0.4M NaOH溶液10g SDS溶于500mL双蒸水中，成2% SDS ...

看到有很多人问质粒抽提的有关问题，恰巧手头上有一篇相关的文章　　　　　　　　　　　　　　　　 从质粒抽提谈起　　碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域 ...

Science：CRISPR热潮科学家们有望利用一种细菌免疫机制开发出革命性的新型基因组编辑技术（genome-editingtechnique）。细菌虽然不会对我们真核生物产生太多的同情之心，但是它们也的确是会生病的。而且细菌得病也不是和我们人类毫无关系的，至少就会对乳制品业带来很大的影响，因为在生产酸奶和奶酪的过程中都会用到嗜热链球菌（Streptococcusthermophilus）这样一类细菌。嗜热 ...

1．电转化感受态细胞的制备1. 用枪头挑取单克隆菌落，投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。（同时做培养基和枪头的空白对照）2. 37℃，220rpm，培养14-16个小时。3. 第二天，以1：100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中，37度，220rpm，振摇2-3小时，每半小时测一次OD，当OD值达到0.3-0.4时，停止培养。4. 将菌液在冰上预冷30分钟，随后将菌液分装到500ml 预冷的离心杯中，4℃，250 ...

【鸡毛蒜皮】之巧用PCR—重组质粒的快速高通量筛选近几年，随着国内更多的公司掌握了Taq酶的制备技术，市场竞争进入白热化，Taq酶的价格一路猛跌，有的公司甚至推出跳楼价—1毛钱一单位。且不说具体哪个公司的质量好，单单从价格上就已经让人感觉到了类似北京冬天的大白菜和夏天的西红柿的味道。从另外一个方面来看，限制型内切酶的价格却多年不变，我们曾经一度以价格优势占领大片国内市场并把内切酶普及到更多实验室的华美公司近几 ...

This is latest verion of Current Protocols in Molecular Biology, which is best book on Protocols in Molecular Biology. The total page is more than 4000 pages with pdf files (not scan version). More introduction could be found in http://www.does.org/masterli/cpmb.html. Price in dollar is $775.00 ...

带绦虫.ppt Download url: http://www.fs2you.com/files/53c9ffdc-1c06-11dd-abc6-0014221f3995/黑热病.ppt Download url: http://www.fs2you.com/files/95b8bf4f-1c06-11dd-90b5-0014221f3995/棘球蚴绦虫.ppt Download url: http://www.fs2you.com/files/8c6d1ee6-1c ...

网上有两种pGEX-KG序列，请各位准备使用该质粒的朋友们注意啊！SEQ1Addgene_VectorDB_5100 pGEX-KG 5006 base pairsacgttatcgactgcacggtgcaccaatgcttctggcgtcaggcagccatcggaagctgtggtatggctgtgcaggtcgtaaatcactgcataattcgtgtcgctcaaggcgcactcccgttctggataa ...

Introduction to Biotechnology and Genetic Engineering by A. J. Nair | Publisher: Infinity Science Press | English | ISBN: 1934015164 | 1000 pages | 2008 | PDF | 7 MbDescription: Biotechnology is a rapidly-developing 21st century technology and interdisciplinary science that has already ma ...

转染求助http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/204073_1.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/719072http://www.dxy.cn/bbs/thread/1153373http://www.dxy.cn/bbs/thread/501069http://www.dxy.cn/bbs/thread/1479097共转染问题http://www.dxy.cn/ ...

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在园中看到有些战友对质粒提取的问题有些误解。现把我找到的关于质粒提取的原理列在下面，希望对大家有所帮助。碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后 ...

国外癌症基础研究的主要进展黎彬 随着人类基因组计划的完成，加快了癌症分子水平研究的发展，本文对最近国外癌症分子水平的主要研究进展进行了分析。阐述了癌细胞作为侵袭性细胞所具有的6大特性。细胞癌变过程中关键的癌基因和抑癌基因如何发挥作用以及对抗癌治疗的影响。现代癌症基础研究的发展能够为癌的诊断和治疗提供更多途径以及更新的发展思路。通过癌症的基础研究为现代癌症治疗医学带来创新科学思维和行而有效的科学方法。1．有发展 ...

本版精彩幻灯集锦中所有链接均来自DXY和网上,朋友各取所需吧!同贺DXY四岁生日!由于本人还不知怎样使用超连接,所以有点浪费版面!1 基因敲除幻灯(219.5k)http://www.dxy.cn/bbs/user/download/401898/last%20result.ppt2 一些RNAi的幻灯片a http://www.genesil.com/docs/index.asp?toPage=1&mySort=8b 因只是单个都超过了粘贴上 ...

丁香医学期刊征集《因特网医学信息应用》讲座专刊丁香园满3岁了。在过去的岁月里，许多战友通过学习检索知识，对于因特网的专业资源有了新的认识。论坛在专业知识交流的同时，仍希望在检索和医学信息的寻找和利用方面，继续保持特色。丁香医学期刊（电子版），是丁香园即将推出的专业在线杂志。在登载专业战友的研究成果以外，为了增强知识性和可读性，结合期刊的内容，准备不定期地开设专业医学信息应用方面的讲座。开设讲座的目的：1． 总结丁香园论 ...

肿瘤转化研究杂志TCR“DNA断裂与修复”翻译工作全面启动目前，TCR杂志“DNA断裂与修复”特刊翻译人员招募工作已顺利完成，自在丁香园发帖招募翻译人员后，深受广大战友们的欢迎，大家踊跃报名，共有近20位报名人员。经组织专家讨论，确认由南京大学医学院附属鼓楼医院顾劲扬担任本特刊的主译。一叮等10位站友担任译者（见表1），其他报名人员拟按排TCR杂志其他特刊的翻译工作，感谢大家的积极参与！现将具体任务安排公布于下。表 ...

师兄精选：核酸实验板块 牛贴汇总，标题: 【交流】有求必应----DNA克隆URL: http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=13864679点击: 4175作者: dnaworm发帖时间: 2009-02-09 15:07:49标题: 【原创】RNA抽提细节系列之四： 解读OD值与RNA纯度的关系URL: http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=15495042 ...

这是我的引物在ncbi上blast的部分结果，我看不懂。是不是说我的引物和以下的都是同源的？这些都不是同一个基因？也就是说我的这个引物不能用了？:(为什么会有这么多的同源片段那？我想找到全长的基因，这个引物是前面的和后面的一段，我想我都的要，怎么办那？1，Homo sapiens protein translocase, JM26 protein, UDP-galactosetranslocator, pim-2 protooncogene homo ...

减肥促排卵的作用我只知道用于肥胖型糖尿病，其他还真不知道，学习一下在妇科，我知道了可用于不孕患者，特别是肥胖的多囊卵巢综合征患者，除了改善胰岛素抵抗，还有促排卵的作用作为胰岛素增敏剂的降糖药物二甲双胍具有抗肿瘤的多种生物活性,它能够抑制肿瘤细胞的增殖、促进凋亡、增强肿瘤对化疗药物的敏感性、并且能逆转部分肿瘤细胞对化疗药物的耐药性、甚至还能抑制肿瘤新生血管的生成对二甲双胍在AD-T2DM中的作用感兴趣 老年人使用二 ...