DNA基础知识

最糟糕的心态-实验失败了，抱怨试剂不好。实验人员本来是应该拥有修正主义、机会主义、怀疑论等诸多“不完美的”意识，所以一定要用“完美的”自我批评意识来平衡。我为什么没有一双慧眼选择可靠的供应商？我为什么不做预实验检测所购试剂？ 最糟糕的知识-RNaseA的作用。RNaseA是内切酶，内切酶的作用结果是产生片段，而不是单个核苷酸，所以，RNaseA作用于 ...

一、质粒的提取及鉴定 （一）质粒的提取及鉴定 1、收获细菌 （1）将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中，接入一单菌落，于37℃剧烈振荡培养过夜。 （2）将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中，用台式离心机于4℃以12000g离心5min，将剩余的培养物贮存于4℃。 （3）吸尽培养液，使细菌沉淀尽可能干燥。 2、碱裂解法小量抽提质粒 （1）将细菌沉淀重悬于100&m ...

Immediately before indcution it is advisable to test the culture to determine the fraction of cells that still carry the target plasmid. This in ...

基因工程：有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。 载体：能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA分子。 转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。 转导：指以噬菌 ...

Probes should be stored frozen both when lyopholized or in solution. Aliquoting your probe into additional vials after resuspension can help to minimize potential breakdown due to ...

一、克隆 的早期研究 克隆 一词是英文单词clone的音译，作为名词，c1one通常被意译为无性繁殖系。同一克隆 内所有成员的遗传构成是完全相同的，例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆 ，例如：同卵双胞胎实际上就是一种克隆 。然而，天然的哺乳动物克隆 的发生率极低，成员数目太少（一般为两个），且缺乏目的性，所以很少能够被用来为人类造福，因此，人们开始探索用人工的方法 ...

helvetica" size="2"Use of oligonucleotides in various research applications requires certain basic storage and handling techniques in order to ensure trouble-free experiments. Proper storage of your ...

什么是克隆？ 克隆是英语单词clone的音译，clone源于希腊文klone，原意是指幼苗或嫩枝，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如杆插和嫁接。 如今，克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。克隆也可以理解为复制、拷贝，就是从原型中产生出同样的复制品，它的外表及遗传基因与原型完全相同。 1997年2月，绵羊“多利” ...

转染的定义是“将具生物功能的核酸转移或运送到细胞内并使核酸在细胞内维持其生物功能”。其中，核酸包括DNA （质粒和线性双链DNA ），反义寡核苷酸及RNAi（RNA interference）。基因转染技术已广泛应用于基因组功能研究（基因表达调控，基因功能，信号转导和药物筛选研究）和基因治疗研究。基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。早期的磷酸钙转染法转染效率很低，且对很多细胞株无效，因此不能满足很多科 ...

The following guidelines should be taken into account when designing modified oligonucleotides. 1.Sequence Length - SYNTHEGEN can synthesize oligonucleotides from 5 to 110 bases in length. Most seque ...

1997年2月22日，英国罗斯林研究所的研究人员向公众宣布，经过几个月的精心呵护，他们用体细胞克隆技术培育出来的小绵羊“多利”正在茁壮成长。5天后，也就是2月27日，英国《自然》杂志全文刊登了罗斯林研究所的实验结果。这一消息震惊了世界，人们在措手不及之中迎来了克隆时代。 在中国科学院动物所研究员陈大元的办公室里，摆放着他克隆成功的牛的照片，书柜里陈列着各种有关克 ...

提取外周血淋巴细胞时注意事项 如果取外周血淋巴细胞 (PBMC) 进行ELISPOT检测，最好采用新鲜血液。在保证无菌操作的前提下，首先应保证取血时抗凝剂应及时充分的与血液混匀，避免血凝块的出现。抗凝血最好及时提取PBMC，避免放置时间过长，室温下避免过夜。应选用分离效果好的淋巴细胞分离液，避免PBMC中混有过多其他细胞成分或杂质。 外周血出现溶血后，在使用淋巴细胞分离液分离PBMC时，溶血产生的 ...