DNA基础知识

1.显性标记与选择效率 一部分分子标记系统如RAPD、AFLP具有显性或部分显性的特点，无法区分基因是纯合还是杂合，不能提供完整的遗传信息。Haley等（1994）提出相斥相（Repulsion－phase）的RAPD标记无论对显性还是隐性均可极大地提高选择效率，他们找到了和菜豆普通花叶病毒抗性基因bc-3连锁相引标记-1，相斥标记bc-2，用标记-1选择纯合抗病株、杂合体、纯合感病株分别占26. ...

磷酸钙-DNA 共沉淀法 核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时，可使DNA 附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA 仅有1%～5%可以进入细胞核中，其中仅有不到1%的DNA 可以与细胞DNA 整合，在细胞中进行稳定表达，基因转导的频率大约为10-4，这项技术能用于任何DNA 导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。此方法对于贴壁细 ...

1 转座 ...

RNA -gel b ...

常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（永久转染）。前者外源DNA /RNA 不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA 转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称 ...

There are ...

1 目的 ...

In t ...

一、导论 已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤: 细菌培养物的生长。 细菌的收获和裂解 质粒DNA的纯化。 (一)细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯化质粒，质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数，惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长 ...

一．概述：基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较成功的有基因的插入突变和iRNA ，它们同样可以达到基因敲除的目的。二．实现基因敲除的多种原理和方法 ...

实验目的 ...

DNA 限制性内切酶消化是基因分析中的关键步骤。内切酶是最关键的工具酶。限制性内切酶是一类具有严格识别位点，并在识别位点内或附近切割双链 DNA 的脱氧核糖核酸酶。 酶单位规定为：在最适反应条件下 1 小时完全消化 lμg λDNA 的酶量为 1 个单位。需注意酶单位数是以切割线性 DNA 为标准定出的。消化其它种 DNA 则应根据 DNA 分子大小、形状适当增加或减少所需 ...

&nbs ...

A gl ...

Purpose: The method is used to clone smaller portions of inserts (up to 15 kb in size) which previously have been cloned in YACs phage cosmids or other plasmids. Time required: &nbs ...

关于如何选择基因诊断技术有两层含义：第一，什么情况下选择基因诊断；第二，如果选择了基因诊断，应当采用哪一种基因诊断技术。以下分别介绍。1．选择基因诊断的依据。 （1）基因诊断可以弥补免疫学检测技术的缺陷 免疫学诊断主要依赖于抗原抗体反应，应用于临床只能在体内产生抗体以后，也就是病程的中期及晚期，不能应用于早期诊断，往往由于地区的流行及 ...

近日撰写了一个关于核酸抽提的基础现状的草稿；没有去找参考书润色，所以会有点凌乱。首先声明的是：这篇东西只为有一定核酸抽提基础知识的人准备，同时也将会及时修改。那些分子生物学的过客，最好不要看本文；一是我的思维有点跳跃，二则是没有必要糟蹋自己的时间。 写这篇东西的另外一个原因是，我一直在思考如何简化经典的无介质的核酸抽提程序。 ...

&n ...

i want to know why exactly tris is used as a buffer when we can use any inorganic salt also to reach pH 8 so what is the function of tris? ------------------------------------------------------------ ...

载体主要 ...