DNA基础知识

生物科学正迅速地演变为一门信息科学。最明显的一个例子就是目前正在进行的HGP（human genome project），最终要搞清人类全部基因组的30亿左右碱基对的序列。除了人的遗传信息以外，还有其它生物尤其是模式生物（model organism）已经或正在被大规模测序，如大肠杆菌、啤酒酵母、秀丽隐杆线虫以及中国和日本科学家攻关的水稻基因组计划。但单纯知晓生物基因组序列一级结构还远远不够，还必 ...

生物芯片是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术，是由微电子学、物理学、化学、计算机科学与生命科学交叉综合的高科技。 生物芯片可分为基因芯片、蛋白芯片和芯片实验室等几种。 蛋白芯片是将大量蛋白质分子按预先设置的排列固定于一种载体表面行成微阵列，根据蛋白质分子间特异性结合的原理，构建微流体生物化学分析系统，以实现对生物分子的准确、快速、大信息量的检测。 蛋白芯片反应结果的检测要依据标记的报 ...

摘要： 基因芯片技术是近年兴起的一项重要的生物技术。作者介绍了基因芯片的概念、分类、主要技术流程、用途、存在的问题和展望，并就基因芯片在猪繁殖中的应用和开发进行了初步阐述。 随着人类基因组计划（human genome project）即全部核苷酸测序的完成以及分子生物学相关学科的迅猛发展，越来越多的动植物、微生物基因组序列得以测定，生物科学研究的重心逐渐进入后基因组时代（postgenome E ...

获得蛋白质的晶体结构的第一个瓶颈，就是制备大量纯化的蛋白质（>10mg），其浓度通常在10mg/ml 以上，并以此为基础进行结晶条件的筛选。运用重组基因的技术，将特定基因以选殖（clone）的方式嵌入表现载（expressionvector）内，此一载体通常具有易于调控的特性。之后再将带有特定基因的载体送入可快速生长的菌体中，如大肠杆菌（Escherichia coli），在菌体快速生长的同 ...

有的试剂需要60%浓度，如葡萄糖等，这么高的度是质量体积比（w/v）还是什么，是不是就是加60g葡萄糖然后用水补足至100ml啊? 固液的百分比一般是质量体积比（w/v）.60%的葡萄糖=60g葡萄糖用水补足定容至100ml. ...

实验中的一些好习惯加入试剂之前把它混匀一下以免放置时间长了浓度不均移液枪用完之后要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性一定要记着关水浴箱，切记切记多和大家讨论，同时多关注别人讨论的经验，这几乎是最快提高的捷径了所有的试剂都自己配，出了问题才好找原因一、防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用 ...

2007年QIAGEN技术讲座,PPT图片。

目的：类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一个多基因多因素参与的病理过程。实验中通过建立与RA发病机制相似的胶原诱导性关节炎（Collagen—induced arthritis，CIA）大鼠动物模型，运用蛋白质组技术对正常大鼠和CIA大鼠模型不同时间点滑膜组织的蛋白质点进行比较分析，为鉴定CIA大鼠滑膜病变相关蛋白质及研究RA发病机制奠定基础。方法：用牛 ...

染色质免疫沉淀法（Chromatin immunoprecitation，ChIP）是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况，还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰，如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等，这些共价修饰与真核基因的表达密切相关。根据“组蛋白密码”假说，组蛋白的各种共价修 ...

　　尽管我们现在对真核基因表达调控知道还不多，但与原核生物比较它具有一些明显的特点。 　　真核基因表达调控的环节更多 　　如前所述：基因表达是基因经过转录、翻译、产生有生物活性的蛋白质的整个过程。同原核生物一样，转录依然是真核生物基因表达调控的主要环节。但真核基因转录发生在细胞核（线粒体基因的转录在线粒体内），翻译则多在胞浆，两个过程是分开的，因此其调控 ...

一、基因表达调控是生命的必需 基因表达 (gene expression)是指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程。rRNA 或 tRNA 的基因经转录和转录后加工产生成熟的 rRNA 或 tRNA也是 rRNA 或 tRNA 的基因表达，因为 rRNA 或 tRNA 就具有在蛋白质翻译方面的功能。 基因组 ( ...

随着医学科学的发展及人们对深部真菌感染的重视，越来越多的新技术用于临床真菌的检测和鉴定，随机扩增DNA 多态性（RAPD）是在PCR基础上发展起来的一种新的基因分型方法。本文综述了假丝酵母菌RAPD分析技术应用的研究进展及前景。近年来，随着肿瘤、自身免疫病、器官移植、糖尿病、获得性免疫缺陷综合征（AIDS）等患者的不断增多，侵入性诊断治疗手段的广泛实施，各类免疫抑制剂和广谱、超广谱抗生素的 ...

桑格是英国生物化学家，1918年8月13日生于英格兰格洛斯特夏郡，在剑桥大学圣· 约翰学院获哲学博士学位，毕业后到著名的剑桥医学研究会分子生物学实验室工作。桑格的工作主要研究蛋白质的结构，特别是研究测定胰鸟素分子的结构，成功地测定了胰鸟素的精细结构，因而获得了1958年的诺贝尔化学奖。60年代后他致力于核糖核酸（RNA）和（脱氧核糖核酸）DNA的结构研究，利用酶解图谱法确定了RNA中 ...

DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法 。自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、 3700和3100型等DNA测序仪，其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型号。本实验介绍的是ABI PRISM 310型DNA测序仪的测序原理和操作规程。 【原理】& ...

SNP是可遗传的，做F2代主要是验证Hardy－Weinberg遗传平衡定律。 群体遗传平衡定律，即哈迪一魏伯格定律，是群体遗传学一个最基本最重要的定律，这是由英国数学家哈迪(Hardy)和德国医生魏伯格(Weinberg1在1908年先后独立地证明过的： 在一个随机交配的大群体．如果没有其他因素(如突变、选择、迁移、漂变)的干扰，总是处于一种平衡状态，即从上一代到下一代基L大J型频率不改变，也意 ...

引言生物芯片是指在硅片、玻璃、凝胶或尼龙膜上，通过机器人自动打印或光引导化学合成技术，制作的生物分子微阵列探针，然后与标记的样品分子进行杂交，通过检测杂交信号的强度及分布对靶分子的序列和数量进行分析的一项技术，目前广泛应用于生物医学和生命科学研究中，而生物芯片扫描仪是生物芯片能否得到广泛应用的关键仪器。生物芯片的荧光信号检测方法，根据检测中采用的光电探测器的类型，可分为光电倍增管（PMT）型和CC ...

一、兼并引物（Degenerate Primer）PCR 密码子具有兼并性，如表22-4，单以氨基酸顺序推测编码的DNA序列是不精确的，但可以设计成对兼并引物，扩增所有编码已知顺序的核酸序列。用兼并引物时寡核苷酸中核苷酸序列可以改变，但核苷酸的数量应相同。兼并度越低，产物特异性越强，设计引物时应尽量选择兼并性小的氨基酸，并避免引物3’末端兼并，针对兼并的混合引物已成功地用于未知靶DNA ...

1.如何测定引物的OD值？ 用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量，请注意紫外分光光度计的使用，测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2-0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA 干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后，取部分溶液稀释到1ml并在1ml标准比色皿中测定其吸光度，即为所测体积的OD值，进而可以计算出母液的OD值。 举例：您拿到一管干粉的DNA ，用1ml水溶解成 ...

Ⅰ.Isolation of Single Stranded DNA 1.Transform plasmid to be mutagenised into JM109. JM109 is endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk- mk+) relA1 supE44 l- d(lac-proAB) traD36 proA+B+ lacIqdM15. JM109 must ...

Sugden labMcArdle Laboratory for Cancer Research University of Wisconsin-Madison Medical School DnaseI Footprinting (Based upon the protocol from the Promega Core Footprinting Kit) 5x Binding Buffer ...