DNA基础知识

dm0920 我有一篇文章修回。审稿人怀疑我结果的可靠性。其中一个结果是将细胞在缺氧的条件下培养4小时后，检测两个目的基因的转录和表达，RT-PCR以及细胞免疫化学染色都提示该目的基因发生了转录并表达。但是，审稿人认为仅仅4个小时这些基因（CD31和CD34）还不能转录和表达，因为4小时太短。一般基因得48小时以上方可表达。因此，审稿人怀疑我的结果。我想请教各位大侠，是否能帮忙查找一些文献表明很多基因的转录/表达可以 ...

cuixueying531 首次来请教，请大家多多帮忙，谢谢Fasta921 那你为什么选择这样的基因？说出你选择的理由，也许我们大家可以给点建议。呵呵是你发现的新基因？为什么下这样结论：在正常组织及癌组织都不表达的基因？各种组织细胞类型你都检测了或者你都有文献可供参考了？呵呵PS：我也好奇，跟贴学习！落梅风 我也好奇，正常组织和癌组织都不表达，怎么研究？sleepyabby LZ为什么要研究这个基因呢?从哪里得到它的?zfv2 ...

chacha2118 各位大侠：我想问一个问题，我做的课题的一个基因，用到它的其中一个外显子的序列，参考外国文献都说这个外显子是第四外显子，外国文献都是参考的Gene Bank的同一个登录号的序列，可是我去Gene Bank查这个序列却发现老外们说的第四外显子的序列前面标记的却是number5,这是怎么回事？谁能帮我解答一下。谢谢lalala_2004 查到的能确定是同一个基因吗。给个登录号看看。chacha2118 是NM-0 ...

00501101 NF-kB在不同的情况下，作用不一样。NF-kB不同的功能是因为什么原因，现在有没有报道？NF-kB可以对于基因的转录是一个充分条件，还是一个必要条件？NF-kB在不同的情况下，转录的基因不同吗,机制是什么呢？有没有几个特定的功能区，分别起到不同的转录作用？不同亚基或者和不同的辅助转录因子结合，或者磷酸化的位点不同等等可能性，而引起转录的不同，导致NF-kB的功能不同？这些问题还是至今没有解决？如果上述 ...

zhaomingong 本人正在进行一种物质的研究，该物质可以进入作用于特定基因的启动子序列，抑制顺式或反式作用因子与启动子序列的结合，从而影响该基因的表达。现在两个问题请教各位大侠：1、不同类型的细胞（比如内皮细胞和血管平滑肌细胞）的同一种基因的启动子序列是不是同样的结构，即一、二、三级结构是不是都是一样的？2、不同类型的细胞（比如内皮细胞和血管平滑肌细胞）应该有着同样的核染色体，那么为什么在同样的刺激因素作用下（ ...

wywdxfsh 经常看见文献里提到这2个单词，我没搞明白，举个例子，比如我用lipo2000转染一个质粒，在设对照的时候，一个孔只加Lipo2000，一个空什么也没加，那这两个空分别叫什么呢？先谢过走过路过的xdjm，更谢谢留言回复的同志！：）freecell NC: non-specific control，非特异性对照 ，例如你的问题中的“只加Lipo2000”，以探讨某种效应是否由转染试剂影响的。mock: 空白对照，例如你的问题中的 ...

zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题，未得其解，恳请帮助。做荧光素酶报告基因的时候，检测的是细胞因子的启动子。换句话说，是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内，通过刺进因素作用后，检测启动子的表达情况。这个是背景。问题是，怎么通过使用内参的方法，去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。因为，个人认为，细胞数对报告基因的表达量影响比较大。谢谢。daidaiyidaidai 好像现在比较常用的是双报告基因检测吧， ...

yaoliduli82 本人是个新手，不知核转录调控因子有哪些，抑或哪位高手能否介绍篇文献参考下，敝人将感激不尽～◎！freecell 此帖可以转到生化版。:Dcatonetwo 好像有个FOXP3，我老板研究这个 幸亏没有要我搞catonetwo 你可以自己去查查文献 。。。不过既然是新手 应该先学学如何查阅文献资料 把这本领掌握了 其他手到擒来yaoliduli82 谢谢大家。yaoliduli82 catonetwo wrote:好像有个FOXP3，我 ...

wanglingyun1981 :)各位大虾帮帮忙，用绿色荧光蛋白以及neo构建载体，转染牛成纤维细胞后，开始是绿色荧光还很亮，可是G418筛选一段时间后，会荧光会越来越弱，到最后筛出单克隆，也几乎没有有荧光的单克隆了。原因是什么？有好的解决办法吗？谢谢各位 ！！绿色荧光蛋白用的cmv启动子。slytjiaofei 1.开始时的荧光很强，这个很好解释，因为开始时未进行G418筛选，所以发绿色荧光的细胞有两部分，一是未稳定整合的 ...

gn0301 某一基因由DNA转录为mRNA，再由mRNA翻译为蛋白质，最后蛋白质经修饰变成有功能的蛋白，有诸多的调控因素参与其中。我曾听说：蛋白表达的增加，需要基因启动子的活化，或者在转录后水平存在调控，增加mRNA的翻译，总之，可能存在多个水平参与蛋白的合成。想请学基础的战友帮个忙，我急需这方面的权威文献，哪位战友可以奉献在下一篇。非常感谢！邮箱：bai_qx@126.com细胞因子 已发，不知道能不能解决你的疑问。gn ...

andyg272727 请哪位大侠帮我查查SHGC-149152这个基因片段有没有外显子和内含子？多谢了！freecell http://howdy.jst.go.jp/HOWDYCL//HOWDY.pl?Cls=GenBank&Key=UKEY&Val=al590128andyg272727 谢谢你的关注，但是你给的网址里边没有关于外显子，内含子的信息啊？请指教！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实 ...

babyzxl 如题，怎样寻找一个基因的转录调控因子？拜托啦！希望有详细的说明，我照做就可以啊。chenxsng 推荐你看看这篇文章 Cell, 136, 175-186.附件大小有限制，传不上去....Purification of Proteins Associated with Specific Genomic LociCell, Volume 136, Issue 1, 9 January 2009, Pages 175-186Jérôme Déjardin, Robert E. Kingstonfreec ...

et83214 我做水稻基因后期功能验证的时候，需要构建基因沉默载体，然后转基因至正常植株中，看有没有目标表型现在我照着用得比较多的，自己重组改造了pNW55得到artificial miRNA，然后装到过表达的载体中，然后转基因。不过因为实验室还没有这方面的成功先例，怕不保险，所以也想做一下siRNA，网上有很多在线设计，通过Blast验证以后，基本确定了几个RNAi的目标。想问一下这方面的专家1. artificial m ...

xiongran 急求ISRE报告基因质粒，干扰素信号通路的报告基因，愿拿其它质粒作为交换！shuyangsy1986 大哥，现在你弄到ISRE的报告基因的质粒没有啊，还有β-干扰素的啊，我也需要啊，先谢了啊xiongran 几百年前的事情了，没有求到，我都不做这个了本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

summityoung 那位学长有ISRE质粒，谢谢。我有多种质粒可以交换zfv2007 Do you have any lentivirus plasmid?zhujoker 我有，就是具有IRES启动子的质粒吗？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

wenzhu24 本人正准备进行课题设计，找到了一个比较感兴趣的抑癌基因，但是不清楚它在我所研究肿瘤中的表达情况。后来看到了我们实验室做的一个关于肿瘤和癌旁组织的基因芯片（需要注明的是由于经费问题只做了一组癌和癌旁组织），发现这个基因在癌和癌旁组织的改变不明显。想咨询各位：仅仅一组癌和癌旁组织的基因芯片是否能够做参考？这个基因在癌中的表达就真得没有变化呢？ebio66 一对样本太少，说明不了问题。建议再做上几个样本的 ...

chichao0000 小弟是个出做实验的新兵，问一个比较初级的问题：计划从活体上去组织，然后检测基因多态性，全部检测，不是针对某个基因，请问各位战友，怎么做呀，是用DNA测序吗？是不是得很贵呀？望各位战友解答！感谢！西门飘脸 基因多态性检测没必要用测序的啊不是很明白你说的是什么意思多态性检测，还全部检测，好矛盾啊suny0354 你是要寻找新突变，还是检测已知的突变，如果是发现新突变可以测序，如果是已知的，也不一定用测序cp ...

river33617 大家好，学生我最近做悬浮细胞的转染。转染入对照质粒的细胞生长正常，但表达目的基因的细胞渐渐成团生长。初步考虑是该目的基因激活了黏附因子的表达，请问高手们这些黏附因子有哪些啊？ 如果能提供一两篇综述就更感激了。谢谢。river33617 顶一个，继续求助，谢谢了。jing3324 做个芯片去GO分析，这样还能有很多意外收获。lwjssry 这个课题非常有意思啊river33617 lwjssry wrote:这个课题非 ...

sjgao 我做信号通路的课题，想用基因芯片来做。请问是否要和公司商谈在设计基因芯片时要把哪些信号通路的分子放在芯片里？还是一张芯片可以包含所有的分子？请高手指点！不甚感激！ebio66 除非做的芯片的量很大，可以考虑定制。否则，建议直接做全基因组芯片。现在有一款全基因组芯片价格很便宜，做起来省时间也省钱。除了信号方面的信息外，其他信息可以提供一些支持或补充。daikey_xie supperarray的功能分类基因芯片针 ...

minminlhm 不知道哪位大侠有比较成熟的基因串联的方法，或者相关的比较牛的实验室的参考文献。希望不吝赐教。minminlhm dingbentz 我试过利用T载体的制造方法把基因串联起来...具体就是先把载体改造一下,插入一个EcoRV位点,切之然后加T制成T载体,然后把基因P出来(引物设计的时候加上一个EcoRV位点),按T克隆的做法把基因克隆进去(在载体上另设一对引物用于克隆筛选).因为引物上带了EcoRV位点,又 ...