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实验原理 该技术的原理及过程主要为转移到NC等膜上的蛋白带。用其它蛋白作为封闭液，将膜上余下的其它蛋白可结合点封闭。加入与待检测目标靶蛋白有特异性的第一抗体，经免疫反应，一抗将与目标蛋白结合，再经用洗膜液洗涤后，膜上仅在靶蛋白上结合有第一抗体。再加入与第一抗体有免疫特异性的二抗，使之与一抗反应，反应后，经洗膜液洗涤，二抗就仅存在于结合靶蛋白的一抗上。因为这种二抗都为酶标抗体，所以通过酶标反应，在 ...

实验原理 外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响 ...

实验原理 The E.Z.N.A.™ MicroElute® Total RNA Kits combine the reversible binding properties of HiBind® matrix a new silica-based material with the speed of mini-column spin technology. A specifically for ...

实验原理 带有地高辛标记的dUTP（图1）通过缺口翻译、随机翻译或PCR等反应而使探针核酸片段带有地高辛，进一步可与带有AP、CSP等各种抗地高辛抗体复合物发生免疫反应，使探针上带有AP等分钟，进一步能催化化学或发光反应。图2为各种DIG标记探针及检测类型汇总；图3为DIG标记探针的方法；图5为标记探针应用；图4为DIG标记探针的检测方法。 图1图2 图3 图4 图5 实验步 ...

实验试剂 1.Cell Culture Media 2.Antibiotics puromycin (P9620) or G418 (A1720) 实验设备 1.Tissue culture incubator—37 °C 5% CO2 100% relative humidity 实验材料 1.Cells- inlog growth and at 50% con ...

实验试剂 Materials provided by user1. Tabletop microcentrifuge2. Sterile 1.5ml centrifuge tubes3. Waterbath4. RNase stock solution5. Absolute ethanol6. OB Protease stock solution 7. PBS Buffer 实验 ...

实验步骤 Generating labeled coa standards(1) Thaw frozen cells directly into the SILEC expansion medium.(2) For Hepa 1c1c7 (adherent) cells allow cells to reach confluence (3–4 d) wash two times with PBS ...

实验步骤 1. 清洗器具用品：清洗所有的干胶条套件，包括胶条槽、盖片、托盘等。用Ettan IPGphor胶条槽清洗剂(Amersham Biosciences.)，并用大量去离子水冲洗，自然干燥备用。2. 第一向等电聚焦电泳 1) 加样和IPG干胶条再水化：采用样品加在再水化液中方法进行加样。24cm IPG胶条(PH3 -10Non-line )。银染蛋白质上样量为40ug-50ug。 ...

实验原理 利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异，可采取分级差速离心的方法，将细胞核与线粒体逐级分离出来（差速离心技术）。线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆，在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中（选用离心机的一定转速），球心颗粒的沉降速度取决于它的密度、半径和悬浮介质的黏度。在一均匀的悬浮介质中离心一定时间，组织匀浆中的各种细 ...

实验试剂 1. Isopropanol (100%)2. 70% ethanol3. Using different volume of Solution according blood volume as following: 实验设备 1. Centrifuge capable of 2000 x g2. Nuclease-free 15 ml microcentrifuge t ...

实验原理 质粒是基因工程中常用的载体之一。质粒是染色体外小型双链环状的DNA，大小在1～200kb之间。碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们的。在pH值介于12.0～12.5这个狭窄的范围内，线性的DNA双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，共价闭合环状质粒DNA的氢键会断裂，但两条互补链彼此缠绕，仍会紧密的结合在一起。当加入 pH4.8的乙 ...

实验试剂 ALT Positive Control Detail：LyophilisedALT Substrate Detail：LyophilisedPyruvate Standard (100 nmol/µl) ALT Assay Buffer ALT Enzyme Mix Detail：LyophilisedOxiRed™ Detail：in DMSO solution ...

实验步骤 Frozen sections: Once mounted on APES coated slides frozen sections are best kept at -80°C until needed.1. When required leave to warm at room temperature for 5 min.2. Pre cool the fixative (ace ...

实验原理 在基因工程实验和分子生物学实验中，细菌是不可缺少的实验材料。质粒的保存、增殖和转化；基因文库的建立等都离不开细菌。特别是常用的大肠杆菌。大肠杆菌是含有长约3000kb的环状染色体的棒状细胞。它能在仅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的无机盐的培养基上快速生长。当大肠杆菌在培养基中培养时，其开始裂殖前，先进入一个滞后期。然后进入对数生长期，以20~30min复制一代的速度增殖。最后，当 ...

实验原理 The ChargeSwitch® Technology is a novel magnetic bead-based technology providing a switchable surface that is charge dependent on the surrounding buffer pH to facilitate nucleic acid purificatio ...

实验原理 1. E. coli 表达系统E. coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E. coli 菌株以后，通过温度的控制，诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质，将表达样品进行SDS-PAGE 以检测表达蛋白质。2. 外源基因的诱导表达提高外源基因表达水平的基本手段之一，就是将宿主菌的生长与外源基因的表达分成两个阶段，以减轻宿主菌的负荷。常用的有温度诱导和药物诱导。本实验采用异丙基硫代-& ...

实验原理 冷冻蚀刻法(Freeze Ftching)，也称冷冻复型法(Freeze Replica)或冷冻切断(Freeze Fracture)，是研究生物膜结构的重要方法之一。其主要步骤首先是将样品在液氮中冷冻，然后放到真空喷镀仪中切断，切断后的切面上有细胞器，其间还有冻成洋的水分。再加热使冰升华，将水份蒸发，把细胞器的膜结构暴露出来，这一步骤就称为冷冻蚀刻。如不进行蚀刻就称为冷冻切断。向暴露 ...

实验原理 细菌对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产生的胞外酶，如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶将大分子物质分解。胞外酶能分泌扩散到细胞外，将物质分解成小单位如糖、氨基酸、甘油与脂肪酸。这些小单位的物质能被细菌吸收和利用。水解过程可通过底物的变化来证明，如细菌水解淀粉的区域，用碘测定不再产生蓝色；水解明胶可观察到明胶被液化；脂肪水解后产生脂肪酸改变培养基的pH，其中的中性红指示剂使培养基从淡 ...

实验原理 吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体非特异性免疫中发挥重要作用。小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。 实验试剂 1. PBS 缓冲液2. 3％硫代乙醇酸钠3. 1％羊红细 ...

实验原理 The GeneCatcher™ TechnologyThe GeneCatcher™ Technology is a novel magnetic bead-based technology that is designed to work on a wide range of blood samples including archived or poorly stored blo ...