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Dynabeads® DNA DIRECT Blood

实验试剂 Dynal® magnet: see www.invitrogen.com/magnets-selection.Sterile round-bottomed 2 ml microcentrifuge tubes.Micropipettors and sterile disposable pipette tips.65°C water-bath or heating block (onl ...

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不同植物SBP-box基因家族的比较分析

实验原理 SBP-box基因家族是植物特有的转录因子基因家族。这类基因编码的蛋白质序列中包含一个高度保守的SBP结构域,并能够特异结合在植物花分生组织识别基因SQUAMOSA及其同源基因的启动子区段,以调控其表达。 实验步骤 1. 拟南芥和水稻基因组中SBP-box基因的鉴定在TAIR数据库(http://www.arabidopsis.org)中获得拟南芥中已知的SBP- ...

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E-Z 96 X-press Plasmid Vacuum Protocol

实验试剂 Materials to Be Provided by User1. Nuclease Free 1.5 and 2.0 mL Centrifuge Tubes2. Ice 3. Isopropanol (100%) 实验设备 Materials to Be Provided by User1. Tabletop with swinging-bucket rotor capa ...

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Immunofluorescence / Confocal Microscopy Protocol

实验步骤 B or T cells in suspension adherent cells on chambered coverglass or chamberslides cryostat sections of unfixed OCT embedded tissue:1. Wash cells 1x cold RPMI (no wash for cryostat sections).2. ...

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厌氧微生物的培养

实验原理   厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,作用也日益引起重视。培养厌氧微生物的技术关键是要使该类微生物处于除去了氧或氧化还原势低的环境中。  焦性没食子酸与碱性溶液作用后,形成碱性没食子酸盐,在此反应过程中能吸收氧气而造成厌氧环境;牛肉渣内既含有不饱和脂肪酸能吸收氧,又含有谷胱甘肽(glutathione)能形成负氧化还原电位差;厌氧罐是采用某种方法除去其中的氧,例如将镁与氧化锌制成产 ...

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小鼠角质细胞的分离和培养

实验试剂 HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L 实验材料 妊娠期BALB/c小鼠 实验步骤 1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流水彻底冲洗,然后用70%乙醇洗两次。小鼠应立即使用, ...

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On-chip Isotachophoresis for Separation of Ions and Purification of Nucleic Acids

实验材料 NameCompanyCatalog NumberCommentsDistilled waterGIBCO10977RNase/DNase freeClorox UltraClorox02489CTsodium hydroxide (NaOH)Mallinckrodt7708hydrochloric acid (HCl)EMD ChemicalsHX0603-4Trizma b ...

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DNA extraction for Buccal Swabs

实验步骤 1. Collect buccal cells on swab and allow the swab to dry. Drying time is approximately 10 to 15 minutes.Note: Due to the low volume of solution used for DNA extraction a foam tipped swab should ...

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E-Z 96® M13 Isolation Vacuum Manifold Protocol

实验试剂 1. Sterile deionized water (or TE buffer) 2. Absolute (96%-100%) ethanol 实验设备 1. Microcentrifuge capable of at least 10000 x g2. Sterile 15 mL centrifuge tubes3. Sterile 1.7 mL centrifuge t ...

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Mag-Binds Plant DNA Kit Magnetic 96 Protocol

实验试剂 Regents to be provided by user 1. Absolute (96%-100%) ethanol 实验设备 Equipments to be provided by user1. Centrifuge capable of 4000 x g.2. 96 well Plate3. Water bath preset at 65-70°C 4. Equ ...

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E.Z.N.A. Endo-Free Plasmid Mini Kit II Spin Protocol

实验步骤 Harvesting of Bacterial Cells:IMPORTANT: DO NOT EXCEED MAXIMUM CULTURE VOLUMES!High-copy-number maximum culture volume = 15 ml1. Harvest the bacterial cells: Pellet 10-15ml overnight culture by ...

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抗坏血酸过氧化物酶(AsA-POD)活性的测定

实验原理 AsA-POD催化AsA与H2O2反应,使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸(MDAsA)。随着AsA被氧化,溶液中290nm波长下的消光度值(A290)下降,根据单位时间内A290减少值,计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算,酶活性可用μmolAsA/(g FW•h)表示。 实验试剂 50mmol/L K2HPO4- ...

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ELISA: Sandwich

实验试剂 Tween-20 (Sigma Cat. # P-7949); BSA (Sigma Cat. # A-7030); ABTS Liquid Substrate Solution (Sigma Cat. # A3219); Dulbecco’s PBS (Gibco BRL Cat. #14200-075). RECOMMENDED SOLUTIONS All solutio ...

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Transformation of E. coli by Electroporation

实验材料 Buffers and Solutions Glycerol (10% v/v) (molecular biology grade) ice cold Pure H2O Milli-Q or equivalent sterilized by filtration through prerinsed 0.45-μm filters. Sto ...

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无血清的细胞培养

实验原理 无血清培养基(serum free mediumSFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却不适合,如观察一种生长因子对某种细胞的作用,这时需要排除其他生长因子的干扰作用。而血清中可能含有各种生长因子;又如需要测定某种细胞 ...

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AbC Anti-Mouse Bead Kit

实验步骤 1. Using the AbC™ Anti-Mouse Bead Kit1) Completely resuspend the AbC™ capture beads (Component A) and negative beads (Component B) by gently vortexing for 30 seconds before use.2) ...

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E.Z.N.A.® Dried Blood DNA Spin Protocol

实验步骤 1. Cut or punch out the blood spot from the filter paper (up to 200ul of blood can be used per spot). Tear or cut the filter paper into small pieces and place them into a microfuge tube.2. Add 2 ...

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脉冲场凝胶电泳实验

实验原理 大分子DNA(一般长度超过20kb,在某些情况下,超过40kb)在电场作用下通过孔径小于分子大小的凝胶时,将会改变无规卷曲的构象,沿电场方向伸直,与电场平行从而才能通过凝胶。此时,大分子通过凝胶的方式相同,迁移率无差别(也称“极限迁移率”),不能分离。脉冲场凝胶电泳技术解决了这一难题,它应用于分离纯化大小在10~2000kb 之间的DNA 片段。这种电泳是在两个不同方向的电场周期性交替 ...

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光敏生物素对探针的标记

实验试剂 光敏素试剂盒光敏素试剂醋酸盐亲和素-碱性磷酸酶检测系统亲和素-碱性磷酸酶BCIP(实验时 10mg溶于200μlDMF中)NBT (实验时 15mg溶于200μl70%DMF中) 二甲基甲酰胺(DMF),仲丁醇,3MNaAC无水乙醇 实验设备 光标记灯、离心机 实验步骤 1. 在一支灭菌的Eppendof离心管中加入20μl探针DNA( ...

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专一性和温度、pH、激活剂及抑制剂对淀粉酶活性的影响

实验原理 酶具有高度专一性,一种酶只能催化一种或一类底物发生反应,如淀粉酶只能水解淀粉,不能水解蔗糖。当淀粉被淀粉酶彻底水解为还原性麦芽糖和葡萄糖时,能使班氏试剂的Cu2 还原成Cu1 ,生成砖红色Cu2O沉淀。淀粉酶的活性受温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素影响,因而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精。不同程度的水解糊精可与碘反应生成紫色、棕色或红色络合物。通过上述特征 ...

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