实验原理 DNA多态性是指DNA碱基顺序的差异性。这种差异性不仅存在于不同的植物之间,也存在于同一种植物的不同个体之间。RFLP多态性是指DNA限制性内切酶酶切片段长度的多态性(restniction fragment length olymophorphism)。由于碱基顺序的差异,在不同的种或同一个种的不同个体之间,它们的基因组DNA限制性内切酶位点的种类和数目不同,经特定的限制性内切酶切割 ...
实验试剂 Carbonate Coating Buffer8.4 g NaHCO33.56 g Na2CO3Add ddH2O up to 1.0L pH to 9.5Phosphate Buffered Saline (PBS):80.0 g NaCl14.4 g Na2HPO42.4 g KH2PO42.0 g KClAdd ddH2O up to 10 L pH to 7.2 with ...
实验试剂 1. Absolute ethanol ( 96-100%) 实验设备 1. Sterile RNase-free pipette tips and microcentrifuge tubes2. Table top microcentrifuge at room temperature.3. 2-mercaptoethanol4. Disposable latex glov ...
实验试剂 Prepare the following reagents fresh daily except for the citrate buffer. 1. Citrate buffer: Dissolve 23.5 g trisodium citrate dihydrate and 25.5 g citric acid monohydrate in 850 ml distilled wa ...
实验步骤 Procedure1.Using at least 106 cells aspirate off the media and wash X1 with ice cold PBS (1-2 ml)2.Aspirate off the PBS (Remove as much as possible) and add 1 ml of trizol3.Scrape the plate b ...
实验原理 E.Z.N.A.® SQ Tissue RNA uses a highly efficient solution based system to provide a convenient fast reliable and non-toxic method to isolate high quality RNA from various samples. Samples are fir ...
实验原理 LoWry法是双缩脲法(BIureT)和福林酚法(FolIn-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂后,在碱性条件下,这种被作用的蛋白质上的酚类基团极不稳定,很容易还原酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸(PHosPHoMolyBdATe & PHosPHoTungsTATe),使之生成磷钨蓝和磷钼 ...
实验试剂 T12G、T12C、T12A、10-mer的随机引物、RT-PCR试剂盒、测序胶、银染系统 实验设备 PCR仪、电泳仪、测序槽、银染设备 实验步骤 1. 总RNA提取(略)2. 残留DNA的去除反应体系 1-5ugRNA 10×DNA酶缓冲液 2ul RNA酶抑制剂 1ul ...
实验步骤 1.Remove Penicillin-Streptomycin solution and histidine solution (1 tube/ 500 ml) from -20 freezer to thaw.2.To a flask as close to the final volume of the media you wish to prepare add approx ...
实验试剂 高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇),高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar),无水乙醇,无菌去离子水,12.5 M CaCl2,0.1 M亚精胺,等渗培养基(MS培养基) 实验设备 高速离心机,1.5 ml Ep管,涡旋器,超净台,基因枪,气瓶,激光共聚焦显微镜 实验材料 洋葱内表皮 实验步骤 1. OsAGAP瞬时表达载 ...
实验试剂 1. RIPA Buffer配制基础成分: Tris-HCl(缓冲液成分,防止蛋白变性) NaCl(盐份,防止非特异蛋白聚集) NP-40(非离子去污剂,提取蛋白;用H2O配制成10%储存液) 去氧胆酸钠(离子去污剂,提取蛋白;用H2O配制成10%储存液;避光保存) 注意:准备激酶(致活酶)实验时,不要加去氧胆酸钠,因为离子型去污剂能够使酶变性,导致活性丧失。 RIPA蛋白酶抑制剂 苯 ...
实验原理 传代培养是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。这种培养,第一步也是制备细胞悬液,当细胞长成致密单层时,它很容易被蛋白水解酶和EDTA)所破坏。所以—般采用胰蛋白酶和EDTA(乙二胺四乙酸盐)的混合物,做为消化液。细胞培养是一种操作繁琐而又要求十分严谨的实验技术。要使细胞能在体外长期生长,必须满足两个基本要求:一是供给细胞存活所必需的条件,如适量的水 ...
实验原理 用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法,取决于线性 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。许多年来,纯化大量质粒 DNA 的首选方法是 CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法.但由于这种方法耗时费钱,于是发展了许多其他方法,包括差异沉淀法和柱层析法.尽管如此,许多坚持传统的人仍然认为,用 CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法纯化的质粒 DNA 是 ...
实验试剂 1. 大鼠弓形虫IgG抗体定量检测试剂盒(ELISA)2. 蒸馏水 实验设备 1. 37℃恒温箱2. 标准规格酶标仪3. 精密移液器及一次性吸头4. 一次性试管5. 吸水纸 实验步骤 1. 准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2. 配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3. 加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设 ...
实验试剂 Dexamethasone 10 mM in DMSO solution 1 x 250 μL (supplied in excess)Maintenance Cocktail solution 1 x 20 mL containing:2.5 mL penicillin-streptomycin 10000 U/mL5.0 mL ITS (insulin transferri ...
实验材料 Kit ContentsCellTrace™ CFSE (Component A) 10 vials each containing 50 μg of lyophilized powderDMSO (Component B) 1 vial containing 0.5 mL of high quality dimethylsulfoxideMaterials Needed bu ...
实验原理 核酸分子中的碱基集团含有共轭双键,它们对紫外光有强烈的吸收。核酸的最大吸收波长在260 nm,吸收低峰在230 nm。可以利用核酸的这一特性对其浓度进行测定。在波长260 nm下,A260=1时,双链DNA的含量为50 µg/ml,单链DNA为 33 µg/ml ,RNA为 40 µg/ml,寡聚核苷酸为 20~30 µg/ml。测出核酸溶液在A260的值,即可得出浓度。根据经验数据 ...
实验原理 免疫传感器是应用固定有抗原或抗体的电极制造的一类生物传感器(biosensor)。创建于20世纪70年代,该免疫传感器巧妙地利用抗体与相应抗原间具有特异性识别和结合能力的原理设计而成。该传感器有两种,一是非标记光学免疫传感器,即直接用化学修饰法将抗原或抗体固定于金属电极表面,当电极上的固定化抗原与待测抗体相遇时,即于电极表面发生抗原抗体反应,因为抗体是带电荷的蛋白质,故能引起固定化抗原 ...
实验步骤 1. UniGene 分析根据小鼠Unigene基因数据用电子分析法确定Oct4相关基因。UniGene是定时更新的从不同器官、组织获得的表达序列标签(ESTs)的基因片段集合。之前,UniGene电子分析用来确定生殖细胞中表达增加的基因。可以在ftp://ncbi.nlm.nih.gov/repository/UniGene 查找小鼠UniGene数据库。每个UniGene集合是序列 ...
实验试剂 硫酸葡聚糖钠盐(可不用)、聚乙烯吡赂啉酮(PVP)、聚蔗糖、牛血清白蛋白(BSA)、100mM EDTA、3MnaAC、无水乙醇、电泳缓冲液、切变性鲱鱼精DNA(100ug/ml)20×SSC溶液 氯化钠3M 预杂交液 6×SSC 柠檬酸三钠 0.3M (含100ug/ul变性鲱鱼精DNA) pH 7.0 ...