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实验基础

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纯种微生物的分离、转种和培养

一、 实验目的 1、了解微生物分离和纯化的原理;2、掌握常用的分离纯化微生物的方法;3、掌握菌落特征的观察。4、学习掌握微生物的几种接种技术 5、 建立无菌操作的概念,掌握无菌操作的基本环节二、实验原理 从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。平板分离法普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求 ...

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土壤细菌的分离与纯化

一 教学要求 通过从土壤中分离纯化细菌,初步掌握微生物的分离纯化方法和无菌操作技术。二 实验原理 - 常用的分离纯化方法 microorganisms exist in nature as mixed populations. However to study microorganisms in the laboratory we must have them in ...

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病毒感染检查方法(形态学观察与免疫学诊断)

一、病毒感染后的形态学观察 (一)电镜观察病毒的形态 电子显微镜技术可直接观察病毒的大小、形态、结构以及病毒在细胞内增殖的动态过程。制作电镜标本的方法主要有超薄切片(厚度为100nm左右),磷钨酸负染法等。 通过观看病毒的电镜照片、幻灯片、多媒体,了解病毒(大肠杆菌噬菌体、流感病毒、腺病毒、脊髓灰质炎病毒、乙型肝炎病毒、甲型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、狂犬病病毒等)的形态结构特点,以及它们与被感染细胞 ...

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牛肉膏蛋白胨培养基的制备、微生物的分离与纯化

实验目的:掌握培养基的配制原则与方法; 掌握划线分离纯化微生物的原理与方法 熟悉手提式高压灭菌器的使用方法和注意事项; 实验材料:器材:试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅等。 试剂:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等 实验原理: 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素、能源和水。根 ...

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双歧杆菌酸口服液的发酵制备

一、实验目的 1、学习分离和纯化菌株的方法; 2、学习营养口服液的制作方法及过程;3、初步了解食品药品生产时的管理规定和技术标准。二、实验原理双歧杆菌、乳酸杆菌和乳酸球菌等对人体有明显有营养保健作用,是微生态试剂的重要生产菌株。双歧杆菌是一种厌氧菌和微好氧菌株,它对生存环境的要求非常苛刻,易受氧、水分、光线、保护基质等条件的影响。微好氧菌株经过驯化,能承受一定氧压,既有利于生产,又能促进正常 ...

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细菌的转导

一、基本知识与原理 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转身已成为基因精细结构分析的常用方法之一。 根据噬菌体转导供体菌基因的差异,转导可分为普遍性转导和局限性转导。这里以局限性转导为例说明转导的基本原理。局限性转导实验中常用的是大噬菌体,它能整合在大肠杆菌染色体DNA上的半乳糖基因(gAl)和生物素基因(bib)之间,因此,它能转导半乳糖 ...

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发酵乳酸饮料的制作

一、实验目的 1、学习酸乳的制作方法;2、从酸乳中分离和纯化乳酸菌;3、自制乳酸质量品尝;4、初步了解食品药品生产时的管理规定和技术标准。二、实验原理酸乳是以牛乳为主要原料,接入一定量乳酸菌,经发酵后而制成的一种乳制品饮料。当乳酸菌在牛乳中生长繁殖和产酸至一定程度时,牛乳中的蛋白质就因乳酸菌产酸而凝结成块状,并产生一些次生代谢物质使它具有清新爽口的昧觉。此外,由于酸乳中含有乳酸菌的菌体及代谢 ...

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土壤中微生物分离纯化培养

一、实验目的掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术;了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征;进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术;掌握微生物培养方法。 二、实验原理从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的分离、纯化方法:单细胞挑取法,稀释涂布平板法,稀释混合平板法,平板划线法 稀释涂布平板法步骤:倒平板-制备 ...

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微生物糖发酵(生化)试验

一、单糖发酵试验 (一)、实验原理 单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为0.75~1%。并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养18~24小时,若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄,若能分解甲酸有CO2和H2等气体形成,小倒管内则聚集有气泡;不分解,则指示剂不变色。 (二)、实验材料 1.菌种:大肠杆菌,伤寒杆菌18~24小时琼脂斜面 ...

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细菌形态观察及单染色

一、实验目的1.了解简单染色法的原理,并掌握其操作方法。2.学习并掌握微生物涂片、染色的基本技术和无菌操作技术。3.巩固显微镜(油镜)的使用方法。4.初步认识细菌的形态特征。 二、实验原理 细菌个体微小,且较透明,必须借助染色法使菌体着色,与背景形成鲜明的对比,以便在显微镜下进行观察。根据实验目的不同,可分为简单染色法、鉴别染色法和特殊染色法等。简单染色法是最基本的染色方法,是利用单一染料对 ...

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细菌的分离与培养

实验目的: 掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。 实验材料: 菌种、普通琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。 实验内容: 一、平板划线接种法(分离培养法) 原理:通过在平板上划线,将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长繁殖,形成单个菌落,以达到分离纯种的目的。若需从平板上获取纯种,则挑取一个单个菌落作纯培养。 用途: 分离出 ...

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细菌培养技术

给细菌提供适宜的条件,细菌即可以生长繁殖,形成具有一定特征的培养物,学习细菌培养技术可以纯化细菌,了解细菌的生长特征,并能进一步检测细菌生化反应、变异性,制备细菌抗原,深入进行分子生物学工作等。了解细菌的培养特征也有助于鉴别细菌。 细菌培养基的制备 培养基是用人工方法将适合细菌生长繁殖的各种营养物配制而成的营养基质,以供细菌培养使用。一般培养基的主要成份为蛋白质、糖类、盐类、水分等。另外还有一 ...

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棉铃虫病毒的扩增及分离纯化

一、目的与任务1. 学习病毒的分离纯化方法2. 通过病毒的分离纯化进一步理解病毒与宿主的相互关系二、基本原理杆状病毒是一类寄生于节肢动物的杆状的病原微生物。其宿主主要是鳞翅目、膜翅目和双翅目的昆虫 还有一些杆状病毒可以感染甲壳纲的节肢生物。杆状病毒常常包埋于由蛋白质组成的包含体基质(polyhedron/granulin)中。根据包含体的形态和病原微生物在(昆虫)细胞中的分布 可以将杆状病毒划分为 ...

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细菌的生化反应检测

不同细菌由于所含的酶系统不完全相同,因而对营养物质的分解能力及代谢产物亦不一致,据此,可用以鉴别细菌的种类。 一、单糖发酵试验 【原理】 单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为0.75~1%。并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养18~24小时,若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄,若能分解甲酸有CO2和H2等气体形成,小倒管内则聚集 ...

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病原性球菌检查(二)

实验目的 1掌握病原性球菌培养物性状。 2掌握血浆凝固酶试验原理方法。 3掌握密集接种法,熟悉药物(如抗生素)抑菌杀菌原理并了解纸片法、试管法的试验方法及应用。 实验材料 1、菌种:金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌6~8小时肉汤培养物。 2、培养基:普通琼脂平板、肉汤培养基。 3、药品:青霉素溶液(50u/ml)、抗生素滤纸片。 4、器具:恒温箱、接种环、酒精灯、试管、无菌棉拭、无菌小镊子、无菌吸管、玻片 ...

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细菌分布及外界因素对细菌影响的检测

一、自然沉降法 检查空气中的细菌 【材料】 普通琼脂平板。 【方法】 取普通琼脂平板一个,打开皿盖,让培养基直接暴露于空气中,置于实验台上或需要测定的地方15~30分钟。盖上皿盖,用记号笔或蜡笔注明放置地点、实验日期和实验者班级、姓名等,放入37℃温箱培养18~24小时,观察细菌的生长情况和数量。并分析其意义。 二、倾注法检查水中的细菌 【材料与方法】 1 ...

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病原性球菌的检测

一、主要病原性球菌的形态、培养特征 【形态示数】 1. 葡萄球菌(革兰染标本):革兰染色阳性,为正圆形,呈葡萄串状排列,亦有单个散在分布。 2. 链球菌(革兰染色标本):革兰染色阳性,圆形或卵圆形,呈链状排列。 3. 肺炎双球菌(小鼠腹腔液涂片,HiSS染色):革兰阳性球菌,矛头状成双排列,平端相对,尖端相背。荚膜染色片中,菌体呈红色,菌体周围的荚膜呈淡红色或无色。 4. 脑膜炎双球菌(脑脊液涂片 ...

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细菌的分离培养、纯培养和生化试验

一、目的 掌握细菌培养、纯培养与基本微生物操作技能,了解生化试验原理、方法和意义。 二、实验内容 (一)细菌的分离培养:倾注法和划线法(倾注法:此法很少应用)本次试验采用前一种方法)划线法:融化普通琼脂培养基,倒平板,杂检。取1号菌如图1之一方法划线,37℃培养24h。图1 细菌分离培养的划线法图2 细菌纯培养划线方法(二) 钓菌和纯培养:观察菌落,选单个菌落,标记后,钓取目的菌落,如图2之一 ...

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病原性真菌实验

真菌是一大类不含叶绿素,无根、茎、叶,由单细胞或多细胞组成的真核细胞型微生物。大部分真菌对人类有益,能引起人类疾病的病原性真菌主要包括浅部真菌和深部真菌。 实验目的: 观察真菌的基本形态及菌落特点,了解浅部及深部真菌的检查方法。 实验内容: 一、常见单细胞真菌的形态观察(示教) 1、新型隐球菌墨汁负染色片:可见菌体呈球形,大小不一,有很厚的荚膜,包围在菌体周围,透明发亮,并可见发芽的菌体。 2、白 ...

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血清学实验—玻片凝集与肥达反应

【材料】 伤寒杆菌,甲、乙型副伤杆菌,痢疾杆菌诊断血清,载玻片,生理盐水等。 【方法与结果】 根据初步鉴定结果,用已知诊断血清作玻片凝集试验,如发生凝集,即可确定。如疑集阴性,应复查后再定。 (二)继续鉴定:根据需要可进一步作生化反应,血清学分型等鉴定。 【注意事项】 1. 作分离培养时宜取脓血便接种于鉴别培养基或选择培养基上。 2. 挑取可疑菌落时,每份标本可选取2~3个菌落,每个菌落接种一支双 ...

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