《临床实验室》:仲教授, 您好!2009年6月期临床实验室杂志的主题为自身免疫疾病,您是免疫学会临床免疫分会的主任委员,又是自身免疫疾病诊断的权威专家,我们知道现在有很多三甲和二甲医院都开展了自身免疫疾病的诊断,但是很多检验工作者对自身免疫疾病及其诊断不是非常清楚,现请您首先给我们解释一下自身免疫疾病的定义? 仲教授:自身免疫疾病(autoimmune disease,AID)是指由于某些原因(感染、遗传、内分泌等,原因较复杂 ...
我们在检测乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)中发现一现象,即加显色剂后未混匀时,有些反应孔内的侧壁上有一显色点,其颜色比较集中,然后逐渐向周围扩散,而其他阳性孔内的颜色却均匀地散布在孔周围。将其混匀后,目测其颜色相当于弱阳性或阳性不等,用同样的检验方法复查后其结果却都是阴性。观察其标本,发现无论溶血或者不溶血,都有此现象。后来我们在滴加显色剂后采用先目测观察结果的方法,发现上述现象166例,现报告如下。 1 方法 酶联免疫吸附 ...
补体成分激活后产生的裂解片段,能与免疫细胞表面的特异性受体结合。这对于补体发挥其生物学活性具有重要意义。 补体受体(complementruceptor,CR)曾按其所结合配体而命名为C3b受体、C3d受体等;但经详细研究后发现,补体受体并非仅与C3裂解产物反应,因而按其发现先后依次命名为CR1(CD35),CR2(CD21),CR3(CD11b/CD18),CR4(gp150,90:CD11c/CD18)。其主要特征列于表3 ...
1.1 基本概念 1.1.1 质量控制(Quaility Control,Q.C) 质量控制是监视全过程,排除误差,防止变化,维持标准化现状的一个管理过程。这一过程是通过一个反馈环路进行的。 1)确定控制的对象; 2)规定控制对象的标准(预期值); 3)制定或选择控制方法和手段; 3)测量实际数据; 4)比较或较对实际数据与预期值之间的差异,并说明产生这一差异的原因。超出预定误差范围,报警系发出信号,反馈通道中断。 5)采取行动,解决差异。恢复原状(原标准状态)的手段发挥 ...
血清游离轻链、细胞和分子遗传学检测已成为多发性骨髓瘤(MM)诊断和预后分层的重要指征,预后分层决定MM患者的治疗反应及其治疗策略的选择。作为治疗MM的一线用药,沙利度胺、硼替佐米和雷利度胺与传统化疗和造血干细胞移植联合应用显著提高了近期和远期疗效。多发性骨髓瘤骨病(MBD)的诊断和治疗是MM整体诊治中的重要组成部分,长期应用双膦酸盐导致的颌骨坏死应予重视,而靶向药物的开发和应用将给MBD治疗带来新希望。 新的诊断 ...
电化学发光免疫测定(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术,是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物。 它的标记物的发光原理与一般的化学发光(CL)不同,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括了电化学和化学发光二个过程。ECL与CL的差异在于ECL是电启动发光反应,而CL是通 ...
免疫印迹试验是目前检测自身免疫性疾病患者血清中自身抗体的主要方法,该法具有操作时间短、特异性好、重复性较强的特点,在临床上广泛应用。但目前免疫印迹试验大多是手工操作,试验步骤多,受人为因素影响大,对实验人员的操作要求高,操作不易标准化导致质量不易控制,且整个试验操作过程处于开放状态,存在一定的生物安全隐患。我们选用国产XD236自动蛋白印迹仪,对自身免疫性疾病患者的抗可提取核抗原(ENA)多肽抗体进行检测,并与手 ...
肝纤维化四项:⑴层粘连蛋白(LN)、⑵Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)、⑶Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)、⑷透明质酸(HA)。 一参考值: HA <120μg/L LN <130μg/L Ⅳ-C <140μg/L PⅢNP<12μg/L 二、临床意义: 1.LN:是一种大分子非胶原糖蛋白,主要存在于基底膜的透明层中,分子量约900KD,共有3条链构成。血清及组织中的LN含量甚微,肝脏纤维化时其合成增多,可导致血清中含量升高,LN与肝纤维化的形成有重要的关系,是门脉高压发生的主要基础,血清LN的 ...
一、概要 定义:应用广泛、先进的免疫分析技术,是生物活性物质分析方法的新领域;基本技术是将多种标记示踪技术和高度灵敏性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的分析技术。 特点:灵敏度高,特异性强,重复性好,准确性高,操作简便,易于自动化商品化。 发展:放射免疫分析,免疫放射分析,酶标记免疫分析,化学发光免疫分析,电化学发光免疫分析,荧光免疫分析,金属离子免疫分析。 应用:医学诊断,治疗监测,还可应用于药物监测,食品,兽医学,环境监测。 二、 ...
化学发光免疫分析(Chemiluminescence analysis,CLIA)诞生于1977年。根据放射免疫分析的基本原理,将高灵敏的化学发光技术与高特异性的免疫反应结合起来,建立了化学发光免疫分析法。CLIA具有灵敏度高、特异性强、线性范围宽、操作简便、不需要十分昂贵的仪器设备等特点。CLIA应用范围较广,既可检测不同分子大小的抗原、半抗原和抗体,又可用于核酸探针的检测。CLIA与放射免疫分析(RIA)、荧光免疫 ...
在外环境因素尤其是化学制剂、放射性物质等致癌因素作用下,健康的人体内经常会出现发生突变的肿瘤细胞,但绝大多数人体并不发病。这是因为人体的免疫系统象卫士一样保护着人体,对细菌等病原微生物进行“免疫防御”,对自身突变的肿瘤细胞进行“免疫监视”,不断清除随时出现的肿瘤细胞。但是随着人年龄的增长,尤其是步入老年,生理功能开始呈现进行性减退,免疫系统的功能逐渐下降,少数发生突变的肿瘤细胞一旦逃避了“免疫监视”,就有可能逐渐长 ...
长期以来医学界认为,人体免疫系统对已进入细胞内部的病毒束手无策。但英国一项最新研究发现,一些抗体能够随病毒进入人体细胞内部,并在细胞内一种蛋白质的作用下引发摧毁病毒的连锁反应,这一发现将有助于研发新的抗病毒药物。 位于英国剑桥的分子生物学实验室等机构研究人员在新一期美国《国家科学院学报》上报告说,他们发现人体免疫系统生成的抗体在血液中遇到病毒后,会一直附着其上,即使一些病毒穿过细胞膜进入了人体细胞,抗体也仍然附着 ...
一、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体是什么? 抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体是类风湿性关节炎患者体内中出现的针对瓜氨酸抗原的自身抗体,是早期诊断类风湿性关节炎(RA)的重要指标之一。 抗CCP抗体所针对的靶抗原是上皮细胞分化的终末阶段的细胞骨架成分Filaggrin上的主要抗原决定簇。目前用EL ISA检测法检测该抗体,实验中所采用的抗原是人工合成的CCP,它是由19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链中的2个丝氨酸替换为半胱氨酸而合成的。 二 ...
本法原理是以伤寒“O”,“H”;甲,乙,丙副伤寒分别培育,经甲醛处理杀死后,做成菌液供肥达氏应用,用以伤寒的辅助诊断。 根据凝集反应的强弱和有无,分别以4+,3+,2+,1+,-,记录,以呈现(2+)的血清最高稀释度为终点效价。 4+:液体清澈透明,菌体全部被凝成块,沉于管底。 3+:液体较透明,大部分菌体被凝集而沉于管底。 2+:液体稍透明,管底有少量凝集沉淀物。 1+:液体较混浊,可见极少量凝集物。 -:液体混浊,细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点(与对照管相似)。
近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。方法种类 比较指标ELISARIAIFA敏感性高高较低特异性取决于抗原制备同左较高重演性尚满意尚满意尚满意结果判断客观客观有主观因素抗原制备较容易 ...
免疫球蛋白是球蛋白家族中的一员,是免疫系统中的淋巴球用于攻击外来物并保护人体的一种抗体分子,然而,与其他基因相比,负责编码免疫球蛋白的免疫球蛋白基因(Ig)更容易频繁发生变异,为什么呢?如今,研究人员们发现一些线索,可以解释Ig频繁发生变异的原因,新成果发表在12月在线出版的《自然—免疫学》期刊上。在一种活化诱导胞啶核苷脱氨酶(AID)的引导下,Ig基因被一种程序化变异过程高度多样化。尽管AID总是优先倾向于靶向Ig ...
一、特异性抗体的鉴定 1.抗体特异性鉴定:常采用双向免疫扩散法。 2.抗体的效价的鉴定:常采用双向免疫扩散法。一是仅稀释抗血清,与同一浓度抗原反应;另一是抗血清、抗原同时稀释作棋盘滴定。 3.抗体的纯度鉴定:常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定。 二、抗血清的保存 动物血采集后,室温自然凝固后立即分离出血清,妥善保存。抗血清保存有三种方法: 第一种是4℃保存,通常可保存3个月~半年,效价高时可保存一年左右; 第二种是-20℃~-40℃低温保存,可保存5年 ...
单克隆是指利用在细胞融合基础上的B细胞杂交瘤技术。 杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即具有所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才能具有持续培养的能力,形成 ...
(一)J链:J链可连接Ig单体形成二聚体、五聚体或多聚体。IgA由二硫键相互连接形成二聚体,单体IgM由二硫键相互连接,并通过二硫键与J链连接形成五聚体。 (二)分泌片:分泌片是分泌型IgA分子上的一个辅助成分,具有保护分泌型IgA的铰链区免受蛋白水解酶降解的作用,并介导IgA二聚体从粘膜下通过粘膜等细胞到粘膜表面的转运。 免疫球蛋白的功能 V区的功能:主要由Fab介导Ig单体为双价;sIgA为4价;IgM理论上为10价,但 ...
【摘要】 目的: 建立检测甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法. 方法: 采用双抗体异位点一步夹心法,以甲胎蛋白单克隆抗体作为固相包被,采用改良过碘酸钠法进行甲胎蛋白多克隆抗体与碱性磷酸酶偶联制备酶标抗体;以金刚烷胺衍生物CSPD作为底物,优化CSPD与SapphireII发光体系;用国家标准品校定定量标准品,建立了人血清AFP的化学发光免疫定量分析法. 用该法检测800份正常人血清,确定正常值参考范围,将临床血清标本100份与ba ...