免疫检测分析

目的 评估所建立的CA50时间分辨免疫分析法（CA50 TRFIA）的技术指标及应用价值。方法 建立CA50时间分辨荧光免疫分析法，分析其曲线的性质参数，研究该方法的特异性、精密度和回收率、灵敏度、稳定性、平等性，以及和免疫放射分析方法（IRMA）法间的相关性。结果 10批标准曲线拟合相关系数均值R为0.9978±0.0022,最大结合比Bm/Bo为127.26±9.85,批内和批间变异分别为2.6%和3.5%，平均回收率为108.61%，灵敏度为1.08U/mL，测定结果与进口CA50 IRMA药盒测定值比较相关系数为0.94,其他肿瘤标志物无明显干扰，同批试剂连续6个月应用分析结果稳定。结论 CA50 TRFIA本底低于干扰小，特异性强、稳定性好，灵敏度高，无放射性污染，是一种非放射性的标记免疫新访求，值得推广应用。

本文探讨了时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）的背景、不同模式优缺点以及新配基设计原则，并讨论了TRFIA的未来研究方向。

研制CA125时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）试剂盒。方法 采用双抗体夹心法建立CA125TRFIA试剂盒，对试剂盒各项指标进行评价。结果 该试剂盒的工作范围为10~600U/mL，分析灵敏度为1.07U/mL，批内、批间的精密度分别为4.5%~8.1%，V6.9%~11.5%。与CEA、AFP、CA50、CA15-3、CA19-9无交叉反应。稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年，37℃稳定7d。425份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0~37U/mL。123份血清标本用本试剂盒与国外其他方法的同类试剂盒同时检测其相关系数为0.939。结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品试剂盒。

β2为了建立β2微球蛋白（β2-m）时间分辨荧光免疫分析。以羊抗兔抗体包被板条，双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺五乙酸络合Eu3+及标记β2-m，发光增强系统为以β二酮体为主的增强液。采用竞争法建立β2-m时间分辨荧光免疫分析，数据采用双对数法函数和四参数logistic函数数据处理程序处理。结果此法的批内和批间CV分别为2.25%和2.91%平均回收率为101.06%，灵敏度为0.06%mg/L，可测范围为0.06~12mg/L。本方法与白蛋白、肌红蛋白均无交叉反应。溶血对本法无临床初步应用所检测结果与放免法吻合。试验结果表明，β2-m-TRFIA法的敏感度、特异性、准确度等指标符合临床诊断要求。

为建立抗-HCV的时间分辨免疫荧光分析法IFMA，以HCV抗原包被微孔板，样品中的抗-HCV、Eu3+标记羊抗人IgG形成夹心，以β-二酮体为增强液，数据采用Log-Logit函数和四参数Logistc函数数据处理程序处理。结果表明，方法的批内和批间CV分别为3.64%和4.39%，平均回收率105.58%，可测范围为1.01—17.34NCU/mL，灵敏度为0.03NCU/mL。本法与HB-sAg有0.23%的交叉，与 HBeAg有0.04%的交叉。278例正常对照组血清抗-HCV浓度均小于1NCU/mL。结果提示，高度灵敏、稳定的抗-HCV IFMA方法的建立为临床和科研工作提供了一种非放射性标记定量检测分析的方法。

目的:合成固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂的中间体-4,4'-二溴-6,6'-二甲基2,2'-联吡啶。方法:根据自行设计的合成路线，以2-氨基6-甲基吡啶为原料，经重氮化、乌尔曼偶联合成6,6'-二甲基-2,2-二吡啶，再经氧化、硝化、溴化、脱氧等合成4,4-二溴-6,6'-二甲基2,2-二吡啶。结果：经元素分析、红外光谱 ,核磁共振波谱等方法证明，成功的合成了4,4-二溴-6,6'-二甲基2,2'-二吡啶。结论：通过自行设计路线完成了4,4'-二溴-6,6'-二甲基-2,2'-二吡啶的合成，为固相时间分辨荧光免疫分析的应用提供了有价值的中间体和制备方法。

通过固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂4,7-二氯磺基苯-1,10菲罗啉-2,9-二羧酸标记抗-乙型肝炎表面抗体（HBsAb）IgG实验，对于BCPDA标记蛋白质的方法进行了研究。结果表明：BCPDA在相对温和条件下能与蛋白质反应，反应后蛋白质的相对生物活性高于78%，标记比为 23～55，蛋白回收率达60%以上。在一定条件下与铕离子形成稳定的BCPDA-Eu3+-（HBsAb）IgG标记物。利用自建的分析方法，测定了标记过程的有关参数。并对标记物的某些光学特性进行了研究。

目的 　用竞争法建立抗HBc时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）方法。方法 　以基因重组HBcAg包被板，Eu3+.异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 （Eu3+-DTTA）标记抗 HBc-IgG单克隆抗体，建立抗HBcTRFIA方法。数据采用Log2Logit函数和四参数Logistic函数数据处理程序处理。结果 　方法的批内和批间变异系数分别为2.30%和6.30%，回收率为96.72%，灵敏度为0.2NCU/ml。本方法与抗HBs和抗HBe无交叉反应，Eu3+标记物稳定6个月以上。结论 　TRFIA是一种新的抗HBc免疫检测技术，具有灵敏度高和稳定性好等优点，能够用于定量测定抗HBc-IgG。

目的 　研制人C肽（C-peptide）时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）试剂盒。方法 　采用双抗体夹心一步法建立C肽TRFIA试剂盒，对试剂盒的各项指标进行评价。结果 　试剂盒的可测范围为0.5～22ng/ml，灵敏度为0.045ng/ml，批内、批间的变异系数（CV）分别为4.1%～6.7%和5.4%～6.8%；与胰岛素无交叉反应，与胰岛素原的交叉反应率为9.0%。30份血样用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测，其相关系数为 0.992。结论 　试剂盒各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品试剂盒。

(一)实验目的 了解细菌生长曲线的持点及测定原理，学会用比浊法测定细菌的生长曲线。 (二)实验原理 将一定数量的细菌，接种于适宜的液体培养基中，在适温下培养，定时取样测数，以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定期及衰亡期四个时期，各时期的长短同菌种本身特征、培养基成分和培养条件不同而异。 比 ...

目的　利用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立人血清促卵泡激素（hFSH）的检测试剂。方法　采用双抗体技术建立hFSH- TRFIA的检测试剂，对试剂的各项指标进行评价。结果 hFSH- TRFIA检测试剂的测量范围为1～256U/L，灵敏度为0.08U/L，分析内和分析间的精密度分别为26%～42%，6.1%～8.6%，与人黄体生成素（hLH）、人促甲状腺素（hTSH） 和人绒毛膜促性腺激素（hCG）的交叉率分别为0.14%，0.08%和0.01%。30份异常血样用该试剂同类试剂同时检测，其相关系数为0.993。结论　试剂各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品。

目的 利用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA)技术建立人生长激素（human growth hormone, hGH）的快速检测方法并研制其诊断试剂。方法 采用双抗体夹心法（一株抗GH的单抗用于包被微孔板，另一株抗GH的单抗用于Eu3+标记）建立hCG-TRFIA。结果hCG-TRFIA的线性测量范围为0.1×10 ～100×10 U/L 0.036×10 U/L 5.3%～8.6% 和7.6%～12.8%，与促甲状腺激（TSH）、卵泡生成素（FSH）、人胎盘催乳素（LH）和黄体生成素（HPL）均无交叉反应，将43份血清标本用本法与Wallac试剂盒同时检测相关系数（r）为0.957。 结论hGH-TRFIA可作为一种具有灵敏度高、特异性强和测量范围宽的新方法 用于临床GH水平的测定。

【摘要】基于可溶性抗原和抗体在液相中特异性结合，形成一定大小的抗原抗体免疫复合物，使反应液出现浊度。采用流动注射光度分析法联用单片机，优化了实验条件；采用合并带技术节省试剂与试样，寻找到了抗原抗体反应的最佳浓度比与最佳反应时机，从而建立了流动注射免疫比浊测定人体血清免疫球蛋白Ａ（IgA）的新方法。整个测试系统联用单片机，使测试过程实现程序操作。本法简便、快速，节省试剂和试样，进样频率高，每小时进 ...

对自制时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原（CEA）试剂盒进行临床应用研究，为该试剂盒临床应用及临床疗效评价提供科学依据。方法　收集血清标本326份，用自制试剂盒按试剂盒操作说明书对血样进行测定，并以化学发光法（Roche）为对照方法，WALLAC公司的CEA时间分辨免疫测定药盒（AutoDELFATM hCEA）作为复核试验，获取相关目标实验数据，并计算得“真实性”和“可靠性”等统计学数据。结果　以化学发光法为对照试验，其阳性符合率为95.83%，阴性符合率为98.73%，检验无显著性差异；自制试剂盒的定量测定值与化学发光法的测定值较为一致，相关系数达0.93，相关性好。结论　试剂盒检测性能与现在临床广泛应用的方法相仿，能满足临床应用的需要。

类风湿因子(RF)是诊断类风湿关节炎(RA)的一个重要的实验室指标，其检测方法很多，国外主要采用免疫比浊法(ITA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫法(RIA)等，国内仍普遍采用乳胶凝集试验(LAT)，该方法操作简单，不需要特殊仪器，成本低，但只能进行半定量结果分析。本文采用ITA和LAT同时检测了RA和其他结缔组织病(CTD)患者及正常人的血清RF含量，并比较分析两种检测RF方法的结果。 ...

【摘要】 目的 评价用自动生化分析仪免疫抑制比浊法测定糖化血红蛋白（HbA 1c ）的可靠性，并与常规方法（微柱法）作相关比较。 方法 根据美国国家试验室标准委员会（NCCLS）EP5-A、EP9-A文件要求进行方法精密度、准确度和线性范围的评价试验。 结果 该方法的批内和批间CV<4%，试验总不精密度为:x（HbA 1c ）为4.85%时，CV为2.8% ...

【摘　要】目的：评估透射免疫比浊法和速率散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的灵敏度和特异性。方法：用免疫透射比浊法和速率散射比浊法同时检测了80例各种患者血清中CRP浓度。结果：两种方法在8—20mg／L、20～40mg／L、40～80mg／L、80～160mg／L、160～300mg／L范围内测定C反应蛋白的相关系数是0．990、0．996、0．995、0．992、0．997．说明两 ...

【检测方法】 速率散射比浊法 【方法学原理】 抗原(免疫球蛋白)与抗体(抗免疫球蛋白)在液相中可快速反应，形成的免疫复合物颗粒具有特殊的光学特性，使反应液出现浊度。速率是指单位时间内抗原、抗体形成免疫复合物(CIC)的速度。随着时间的延长免疫复合物总量是逐渐增加的，而速率变化则由慢一快+慢，其反应速率最快的某一时间称为速率峰。当反应体系中的抗体(抗免疫球蛋白)量保持过剩时， ...

【摘要】目的：评价快速免疫比浊法测定尿微量白蛋白/肌酐在诊断糖尿病早期肾损害的临床应用价值。方法：以放射免疫法作对照，用快速免疫比浊法测定30例糖尿病患者的尿微量白蛋白/肌酐。结果：以放射免疫法为金标准，快速免疫比浊法的敏感性为92.3%，特异性为82.4%，准确度为93.3%，两者测定结果差异无显著性(P>0.05)。结论：快速免疫比浊法作为一种方便、快速、定量的测定尿微量白蛋白/肌酐的方 ...

补体(complement，C)是由近20种不同血清蛋白组成的多分子系统，约占血清球蛋白总量的10％。补体在血清中的含量相对稳定，不因免疫应答而增加，仅在某些病理情况下才会发生波动。补体系统的基本组成包括9种血清蛋白成分，按发现的先后顺序而分别命名为C1-9。补体是一个复杂的反应系统，除了溶解细胞和协助杀菌作用外，还可促进炎症反应，与其他生物活性系统有相互促进、相互制约的关系，这些关系的紊乱是导致 ...