抗体抗原实验

相关专题 在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时，需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法(double immunofluorescence labeling method)也分为直接法和间接法。 (1)直接法双重免疫荧光标记：将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合，滴加在标本上孵育，然后洗去未结合的荧光抗体，在荧光 ...

相关专题 免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(western blot)，它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性 ...

相关专题 免疫胶体金技术专题 要想获取良好的免疫胶体金银染色效果，首先取决于标本的处理是否恰当，其次是给高特异性和高效价的一抗选择最佳的稀释度。 由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科，所要检出的抗原种类繁多，性质也各不相同。因此，不可能有一种适用于所有抗原的固定剂，而是根据不同的抗原性质区别对待。 一、固定剂的选择及固定时间(详见表5-9 ...

相关专题 如何实现完美的免疫组化实验 1、石蜡切片和冰冻切片的比较? (1)要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。 (2)冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时 ...

相关专题 说到便于观察和保存的组织切片方法，我们的脑海里很容易就闪出四个字来：石蜡切片，不过，这一实验方法在不同的领域有不同的应用，当中的操作不尽相同。本文主要对其在免疫组化染色中的实验流程进行介绍。 1.烤片 烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上，以免染色过程中切片脱落。切片在56~60℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的 ...

相关专题 双向免疫扩散法是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应。即可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散，彼此相遇，在比例适当处形成沉淀线。根据沉淀线的有无、形状和位置对抗原或抗体进行定性分析，也可用于抗体的半定量检测。 将可溶性抗原(如小牛血清)与相应抗体(如兔抗小牛血清的抗体)混合，当两者比例合适并有电解质(如氯化钠、磷酸盐等)存在时，即 ...

相关专题 补体介导的细胞毒试验(Complement Mediated Cytotoxicity Test)是指特异性抗体与细胞膜上相应抗原结合后在补体的参与下可产生细胞膜损伤细胞死亡;不带相应抗原的细胞仍然存活.利用染料排斥实验判定淋巴细胞死活状态活细胞不着色具有折光性大小也正常.死细胞着色体积增大。 一、实验原理 带有特异抗原的靶细胞( ...

相关专题 针对旧方法的不足，SDIX公司研发出新方法可生产针对MMP胞外区域的高性能抗体。 新方法可生产针对MMP胞外区域的高性能抗体 抗体药物作为生物技术产业的关键驱动力，能安全有效地对癌症、自身免疫病和感染性疾病等进行靶向治疗，该药物在2012年创下全球645.7亿美元的销售额，占生物制药51.8%的份额。目前抗体药物的市场需求量仍在 ...

疾病简介 原发性膜性肾小球肾炎（MGN ，pMGN）也被称为特发性膜性肾病（IMN），是最常见的以肾病综合征为特点的肾脏疾病，可见于所有的种族和性别，更易出现在40岁以上的男性患者，怀疑患IMN的年轻女性，应考虑其是否患有狼疮肾炎。国内IMN发病率约占原发性肾小球疾病的9.9%～13.5%，居IgA肾病、系膜增生性肾小球肾炎之后，列第三位。随着蛋白尿的增加，IMN患者的肾衰竭发病率及死亡率风险也 ...

金庸版 但见超净台前是一对少年男女，男子容貌清俊，一身白衣胜雪；少女同是白衣紧身，身段好似嫩枝初发，不胜婀娜，面上笼了一层浅蓝色的柔纱，若隐若现，隐约看见琼鼻檀口，无法窥见全貌，乌黑的刘海下，双眼水波流动，仿佛对人言语。 “师妹！”少年男子开口道，“你这一式天山折梅手已越发纯熟了。” “师兄骗人，明明力量有余，巧劲不足， ...

　　（一）BCR复合物 　　B细胞抗原受体（B cell receptorBCR)复合物至少由四种不同的多肽链组成，抗原结合部位是由重链和轻链构成的膜表面Ig的四链结构，此外，在BCR中还含有Igα和Igβ两种多肽链，最近在白细胞分化抗原国际专题讨论会中分别命名为CD79a和CD79b。在人类B细胞，与mIgM相关的Igα和Igβ分别为47kDa和37k ...

（1） 原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标 ...

关于免疫印迹法（western blot） 原理：通过电泳区分不同的组分，并转移至固相支持物，通过特异性试剂（抗体）作为探针，对靶物质进行检测，蛋白质的Western印迹技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种特点，可检测到低至1～5ng（最低可到10－100pg）中等大小的靶蛋白。一、抗原的选择和制备 A：样品的制备 1组织： 组织的处理方法：组织洗涤后加入3倍体积预冷的PBS ...

ELISA即酶联免疫吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定，并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是：①使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；②使抗原（或抗体）与某种酶联结成酶标抗原（或抗体），而且此酶标抗原（或抗体） ...

一 免疫组化（ LP 法）操作步骤 ：1． 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ， 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。（注：孵 ...

一　PI单染色法 基本原理 　　其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面： 1. 细胞核的改变：由 ...

流式细胞分析（Flow cytometry，FCM）是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术，它具有如下几个特点：①标本只要是单细胞即可用于分析，如血液、骨髓、体液中的细胞、培养细胞等，实体组织只要经处理后制成单细胞悬液也能 ...

酶联免疫吸附实验材料，试剂，溶液 1．酶标板，100μltip头，1ml Ep管，湿盒2．包被稀释液（0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠bufferpH 9.6）碳酸钠0.15g碳酸氢钠0.29g叠氮钠0.02g加双蒸水至100ml调至pH 9.63.封闭液(5%小牛血清/PBS溶液) 小牛血清5ml undefinedPBS(pH 7.4)95ml4.洗涤液(PBST pH ...

1 . 取材 取材的好坏，直接影响切片的质量。医生在取材时，首先要有一把锋利的取材刀，在切割组织时要避免取材刀来回拖拉，切取的组织块厚薄要均匀，一般厚度以0.2 ～0.3cm为适，较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点，而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些；淋巴结应修掉两侧球冠，并尽量剔除周围的脂肪组织。在取材中还应十 ...

Western，也称Western blot、Western blotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。Western可以参考如下步骤进行操作。 1.收集蛋白样品(Protein sample preparation) Ø 可以使用适当的裂解液，例如碧云天生产的Western及IP细胞裂解液(P0013)、RIPA裂解液等，裂解贴壁细胞、悬浮细胞或组织 样品。对于某些特 ...