经典遗传学实验

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相关专题 因为钙离子和镁离子会影响胰酶的消化能力，导致胰酶消化能力下降，培养细胞时，消化的细胞数量有限，加上细胞的密度依赖性，所以细胞培养时最好使用不含有钙镁离子的PBS缓冲液。 ...

相关专题 最长听说的是Oligo(dT)，主要是由T(胸腺嘧啶）构成的核苷酸链，其次Oligo引物设计软件，由于其操作的简便性和引物分析设计的功能强大而风靡全球Oligo芯片是微阵列的一种，又称寡核苷酸微阵列。 oligo(dT) 定义 多聚胸腺嘧啶、T重复寡核苷酸，就是只有胸腺嘧啶组成的核苷酸链。 应用 1.oligo(dT) captu ...

相关专题 万能缓冲液PBS 一、缓冲液 1. 0.01MPBS(PH7.2)液 NaCl 8g Na2HPO4 1.15g KH2PO4 0.2g (NaH2PO4) 加双蒸水至 1000ml 2. 0.05MTBS(PH7.4)液 Tris(三羟甲基胺基甲烷) 12.1g Nacl 17.5g 加双蒸水至 1500ml 在搅拌下加浓HCL至 ...

相关专题 纯水和超纯水是分子和细胞实验中常用的实验试剂，不同的实验需要的水的级别是不一样的，常常遇见刚进实验室的同学常有个疑问：纯水和超纯水是一样的么？下文主要讲述了纯水和超纯水区别以及纯水仪和超纯水仪的工作原理。 纯水和超纯水区别 在正确选择实验室超纯水机之前，我们必须很好地了解如下几个概念：什么是纯水?什么是超纯水?二者有何区别? 纯水 ...

相关专题 primer的一个重要参数是熔解温度(Tm)。这是当50%的primer和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.Tm对于设定PCR退火温度是必需的。在理想状态下，退火温度足够低，以保证primer同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比primer的 Tm低5℃。 ...

相关专题 从分析的标本中纯化核酸，即制备PCR反应的模板，是使PCR获得成功的重要的第一步。由于PCR的用途各异，用于抽提核酸的起始材料种类可能差异很大(包括新鲜的、储存的和古代的)。每种特殊样品类型有各自的限制和抽提核酸的不同要求，但它们都有一个共同的标准，扩增的灵敏性要求特别注意不同材料、PCR产物、质粒或对照之间可能存在的交叉污染。由 ...

相关专题 退火温度为引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃。 在模板变性后温度快速冷却至40℃～ ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 在PCR自动热循环中，最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示，其变性、退火、延伸的条件是：94℃60s 37℃60s 72℃120s，共25～30个循环，扩增片段500bp。在这里，每一步的时间应从反应混合液达到所要求的温度后开始计算。在自动热循环仪内由混合液原温度变至所要求温度的时间需要30～6 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ PCR引物设计中的一个重要参数即是熔解温度(Tm)。这是当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度。Tm对于设定PCR退火温度是必需的。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的Tm低5 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 温度梯度PCR是指在退火温度不太明确时，为了找到最优退火温度，在一台PCR仪上同时做多管PCR，每一管放在仪器内不同列(有的是不同行)上，分别进行PCR(如50℃~60℃可以分6管，分别为50，52，54，56，58，60度)，最后看看哪个温度的效果最好。总之是用来进行退火温度优化的。 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？PCR实验室产品选择指南 将退火时间从 20 秒改为两分钟并未改变扩增效率，但退火温度却是最重要的参数之一。尽管许多基因能在退火温度为 56 ℃ –60 ℃被特异的扩增，我们的经验表明 将退火温度降低 4 ℃ –6 ℃对于在多重 PCR 中扩增出同样的基因是必需的。单独扩增时退火温度为 60 ℃的基因在多重 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 降落PCR是在同一个PCR管内进行PCR，只是每个循环的温度不同(如每个循环降1度)。一般兼并引物用这种方法多些。 设计多循环反应的程序，以使相连循环的退火温度越来越低。由于开始时的退火温度选择为高于估计的Tm值，随着循环的进行，退火温度逐渐降到Tm值，并最终低于这个水平，用于确保第一个引物—模板杂交事件 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ DNA的双链主要是靠氢键联系在一起。 退火温度越高，断开氢键的热能越大，引物与模板越不易结合，反之，退火温度越低，越容易形成氢键，进行退火。 所以当温度高时，只有碱基匹配程度高的，也就是模板与引物形成配对数越多的引物，才能结合到模板上，这样扩增出来的条带最少，甚至只有一条，也就是引物和目的序列的完美匹配， ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 问题：请问一下 A 引物序列越长 退火温度越低 B 引物序列越短 退火温度越低 C 引物中C G 含量越高 退火温度越高 D 引物中A T 含量越低 退火温度越低 选择是A 退火就是复性 我想请问一下退火温度和引物序列为什么会有关系?也就是说退火到底是做什么，为什么序列会影响温度? 答案： 退火指的是是在 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 在模板变性后温度快速冷却至40℃～60℃(某个退火温度)的时候，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞，这就使PCR后期的过程成为可能。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸，G+C ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 这个要看你的ISSR的引物了，一般引物报告单上都会注明最佳的退火温度。但我一般都是在最佳温度的上下10度做梯度来确定的。 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 问题：引物单上数据如下 上游TTACAAGATGGAGCCTCACC(GC含量50%) Tm(1M Na+)：68.2 Tm(50mM Na+)：46.6 下游CAAAGAATAACCCAGGACGA(GC含量45%) Tm(1M Na+)：66.2 Tm(50mM Na+)：44.6 顺便问下大家，Tm ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ GC含量高，说明解链温度高，目的条带在较高温度才会解链，而在未达到解链温度时，引物会以未完全解链的DNA为模板，进行PCR非特异性扩增，所以易出现非特异性条带。降低退火温度，DNA复性减缓，增加非特异性互补机会，使非特异性条带增多。 ...

相关专题 电穿孔是一种将外源的大分子物质导入动物或植物细胞内的一种方法。其原理是根据细胞在受到某种强度的电脉冲时，细胞膜表面会产生一些小孔，大分子物质即可通过这个小孔进入到细胞内。在进行电穿孔实验室时，电穿孔应用的缓冲液是实验成功与否的重要因素之一。 专利类型：发明 专利号：02808704 专利申请日：2002/04/23 公开(公告) ...