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HPLC入门问题FAQ

HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器 检测器衰减太多:调整衰减即可。 检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数 检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。 检测池中有气泡:解决办法为排气。 记录仪测压范围不当:调整电 ...

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气相色谱法的新进展及发展方向

1、仪器方面的最新进展 自动化程度进一步提高,特别是EPC(电子程序压力流量控制系统)技术已作为基本配置在许多厂家的气相色谱仪上安装(如HP6890,Shimadzu GC-17A GC-2010,Varian 3800,PE Auto XL,CE Mega 8000等),从而为色谱条件的再现、优化和自动化提供了更可靠更完善的支持。 _与应用结合更紧密的专用色谱仪,如天然气分析仪等。 _色谱 ...

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In-gel Tryptic Digest for Protein ID by Mass Spectrometry

This protocol is based on Shevchenko AWilm MVorm O& Mann M.Mass spectrometric sequencing of proteins from silver-stained polyacrylamide gels.Anal Chem 199668:850-8.I have used it with success on b ...

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色谱技术基础

色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。 分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土 ...

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多肽合成蛋白测序仪介绍

433 A多肽合成系统 ―― 公认的经典高效全自动合成系统 l 合成规模0.1- 1.0 mmol可采用Fmoc和tBoc两种方法 l 特有的涡流混合式反应腔和NMP溶剂系统:活化氨基酸与肽充分反应偶联率高达99%以上 l 专利的零死体积阀门设计:去除交叉污染减少试剂消耗 l 全套完备的试剂和树脂 l 全自动电脑控制程序编辑快速简便 l 特有回馈监控功能自动强化脱保护和偶联保证高得率 491型蛋白 ...

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DNA序列和大规模DNA测序策略的探讨(图)

人类基因组计划的核心内容之一是基因组测序。随着人类基因组图谱趋于完成,人类基因的 定位克隆、鉴定分析直至全基因组测序取得了突破性进展,测序策略的成熟、测序方法的改进、自动测序仪的广泛应用、计算机数据分析系统的扩展以及测序分析能力的提高, 大大推进了大规模DNA测序的进程。 第一节 DNA测序的基本方法 一、Maxam-Gilbert的化学降解测序法①先用限制性 ...

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如何使用血糖检测仪来测血糖

一、工具: 1:血糖检测仪 2:弹射式扎指针 3:血糖接触用芯片 二、方法: 先用酒精擦拭手指,用弹射式扎指针扎中指或无名指,用接触芯片粘手指上的血,插入检测仪中,一会仪器会自动检测出血糖,等稳定不变时就是所测的血糖值。 三、注意: 餐前和餐后:餐前可做,餐后1-2小时可做,否则测定值不准确。 ...

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手持糖度计的原理及使用方法

一、糖度计的工作原理 光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象,且入射角正弦之比恒为定值,此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下(同一温度、压力)成正比例,故测定果蔬汁液的折光率,可求出果蔬汁液的浓度(含糖量的多少)。 常用仪器是手持式折光仪,也称糖镜、手持式糖度计,通过测定果蔬可溶性固形物含量(含糖量),可 ...

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Methods for DNA sequencing

A. Bst-catalyzed radiolabeled DNA sequencing Bst DNA polymerase-catalyzed radiolabeled two-step sequencing reactions (26) are modified from those presented earlier (25) by altering the absolute amount ...

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DNA Sequencing

The sequencing reactions described below work perfectly well if you are short of cash to buy sequencing kits. It is based on the Dideoxy sequencing method of Sanger et al. 1977. However due to the num ...

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Preparation of G+A Marker

Procedure Add the following to a sterile microcentrifuge tube: Labeled target DNA (3-6ng) 1-8ul Calf Thymus DNA (0.5ug/ul) ...

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Maxam-Gilbert Sequencing

A modified abbreviated version of the Maxam-Gilbert sequencing is described. A complete description including the methods to prepare and isolate asymmetrically labeled fragments of DNA and to prepare ...

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Chemical Sequencing of DNA

The method below works well for Sequencing of DNA of greater than ~40 bp. Typically about 150 bases of sequence can be read from analysis on a 6-8% urea acrylamide gel. For sequencing of short oligonu ...

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T7 DNA聚合酶测序技术

一、概述   T7 DNA聚合酶最初具有5'→3'聚合酶活性以及单链和双链3'→5'外切酶活性。当T7 DNA聚合酶用适当方法处理后,可使3'→5'外切酶活力明显下降。改造后的T7 DNA聚合酶又称T7测序酶。使用T7测序酶得到的测序数据具有在每个碱基位置都有相对均匀的配对参入。因此 放射自显影所得到的结果较为清晰易辩 对于许多模板来说 使用含有dGTP的混合物即可得 ...

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DNA测序技术

在分子生物学研究中,DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert(1977)发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生A,T,C,G四组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测,从而获得DNA ...

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Template Preparation

The quality of sequencing results is directlyrelated to the quality of the template. ABI recommends a minialkaline-lysis/PEG precipitation procedure (the Core can supplyinformation on this protocol). ...

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Cycle Sequencing Protocol Using 33P-Radiolabeled Terminators

Extension/Termination Reactions The following procedure requires 75-100 fmol of plasmid templates 10-100 fmol of PCR product and 25-50 fmol of phage templates. ~undefinedNOTundefined: The amount of templ ...

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DNA SEQUENCING REACTIONS

DNA priming reaction x ul DNA2 ul Reaction buffer minus DTT1 ul primer (20 ng)10 ul totalHeat 90-100C 2 min. Cool room temp. 30 min. Enzyme mix 4 ul radioactive nucleotide (12 l)&nb ...

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Cycle Sequence Reactions For Large Insert Plasmid Templates

The following dye-labeled terminator reaction chemistries have been designed to balance conservation of reagents with the resulting sequence product signal strength. When coupled with BACPAC Res ...

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