实验仪器使用技术

制备电泳与普通的分析电泳在原理上没有什么不同，只是用的凝胶厚些、加的样品量大些罢了。因为制备电泳的胶厚，电泳时有个散热问题，电泳后还有把所要分离的蛋白从胶中洗脱下来的问题。为了提高制备电泳的效率，有些公司（如BIO-RAD）生产了专为制备电泳设计的电泳槽。我们的实验用非变性条件下的聚丙烯酰胺凝胶电泳制备GFP，在整个的电泳过程中GFP始终维持其天然活性。电泳结束后，不用染色处理，在紫光照射下可以 ...

一、目的 1、了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 2、了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程 3、了解过氧化物酶同工酶电泳过程 二、实验原理 1、电泳原理及影响电泳的主要因素 带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动，这种现象称为电泳。用电泳技术分离、分析蛋白质、酶、核酸等生物大分子，有较高的分辨率，目前已成为生物科学研究中必不可少的手段之一。 带电离子在电场中的泳动速度（1）和迁移率（泳动度）（ ...

摘要： 分析粉状食品结块的机理，利用核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance，NMR）技术研究食品的结块与玻璃态转变温度、化学组成之间的关系，为延长食品的保质期提供理论基础。 食品结块问题在食品保藏中是一个急待解决的重要课题，而且在相关行业如：饲料、医药等，结块问题也普遍存在，它是影响产品质量和使用价值的一个重要因素。食品结块会产生很多不良现象，如：溶解度下降、油脂氧化程度提 ...

摘要： 本文就NMR与化学应用有密切关系的若干前沿新进展进行述评，内容包括NMR灵敏度的超增强，固体或表面化学反应的NMR跟踪以及简单分子体系中的超常NMR信号。这些方面分别涉及到NMR谱学技术的发展，新的应用领域的开拓及新的实验现象的阐明。 1995年是凝聚态核磁共振（NMR）发现50周年。NMR半个世纪的发展历史，向世人雄辩地证明了NMR在当代科学研究中不可替代的重要地位。NMR之所以能在当代 ...

摘要： 核磁共振（NMR）技术近年来发展突飞猛进，令人目不暇接。本文避开深奥的理论和技术，着重于新技术所能解决的问题。力争为应用工作者描绘一幅NMR发展现状的粗略轮廓。 前言 如果有人问最近几年在分析测试领域哪种技术发展最快的话，应首推NMR。假如有兴趣跟踪世界上该领域的进展，那么每一天几乎都有激动人心的事发生，新技术就象魔术一样不断涌现，来解决当今化学、医学和生物学等领域遇到的难题，去开拓原先难 ...

摘要： 核磁测井与实验室NMR研究的条件显著不同，要使核磁测井有足够的信噪比，关键问题是选择合适的设计及测量方案。核磁测井仪中多采用预极化方式或自旋回波法，所用的磁场已从最初的地磁场演变到现在的各种人工磁场，所用的测量方式要与采用的磁场设计相适应。现代核磁测井的测量技术已基本与实验室技术一致，核磁测井仪获取信息的能力也有了很大发展。 引言 石油测井中，到目前为止人们一直为不能直接获得束缚水饱和度、 ...

摘要： 从应用mq-20核磁谱仪测定聚丙烯等规指数的步骤开始，展开一系列试验，并将试验结果与国标（GB/T 2412-1980)测试下的结果作对比，找出影响其测试准确性的主要因素。 在聚丙烯的生产过程中，等规指数是一常用且重要的物性指标，是表征其加工性能及应用的重要指标。一般等规指数高的聚丙烯，其结晶度亦高。 传统的化学溶剂法（GB/T 2412-1980）测定等规指数，仅限于对聚丙烯粉料的测定， ...

色谱法的分离原理是：溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary phase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906 年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法（Chromatography）因 ...

NMR（Nuclear Magnetic Resonance）为核磁共振。是磁矩不为零的原子核，在外磁场作用下自旋能级发生蔡曼分裂，共振吸收某一定频率的射频辐射的物理过程。核磁共振波谱学是光谱学的一个分支，其共振频率在射频波段，相应的跃迁是核自旋在核蔡曼能级上的跃迁。 基本原理 自旋量子数I不为零的核与外磁场H0相互作用，使核能级发生2I+1重分裂，此为蔡曼分裂。核磁共振是1946年由美国斯坦福大 ...

核磁共振（NMR）在体内药物分析中，可用于药物及其代谢物的结构鉴定、代谢途径归属、定量分析以及药物与内源性物质相互作用的研究等。与其它分析方法相比，具有如下优点： ①简便性：无需对样品进行繁杂的提取或衍生化，减少了由此带来的误差； ②无损伤性：对取样量有限的生物样品经NMR分析后还可用于其它处理，甚至可对生物整体进行无损伤分析； ③连续性：NMR可对整体生物系统进行动态监测而不扰乱生物体内的各种平 ...

核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance），是指具有磁矩的原子核在静磁场中，受电磁波（通常为射频电磁振荡波RF）激发，而产生的共振跃迁现象。 1945年12月，美国哈佛大学珀塞尔（E. M. Purcell）等人，首先观察到石腊样品中质子（即氢原子核）的核磁共振吸收信号。1946年1月，美国史丹福大学布珞赫（F. Bloch）研究小组住在水样品中也观察到质子的核磁共振信号。两 ...

设计了一种零死体积的二通式柱尾结构和一种使匀浆填料均匀进入色谱柱管内的储料池，研究了制备内径在0.5 mm～1.0 mm的不锈钢宽口径填充毛细管液相色谱柱的方法。详述了以不同牌号、规格的反相ODS类固定相制备的不同柱长的色谱柱的性能。通过折合板高/折合流速关系和不对称因子对柱性能进行了评价，结果表明，该方法制备的色谱柱柱效达到理论值的75%以上、RSD为6%，稳定性也很好。将其应用于抗癫痫药物和氯 ...

一、目的要求 1.学习电泳原理和技术　　2.学习和掌握SDS－聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术 二、原理 聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide，简称Acr)和交联剂NN-甲叉双丙烯酰胺(N，N—methylene-bisacylamide，简称Bis)在加速剂N，N，N，N—四甲基乙二胺(N，N，N，N—tetram ...

一、原理 细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色，可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量，可筛选阳性表达的重组体。 二、试剂准备 1、30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）29. ...

一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液；1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液，PH8.8；1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液，PH6.8；电泳缓冲液，PH8.3；10%SDS溶液；10%过硫酸铵溶液；样品处理液；染色液；脱色液；电泳玻璃板，电泳电源架，电泳槽，电泳仪等；蛋白Mark。 二、方法与步骤 1) 分离胶和浓缩胶配制 按下表比例分别配制分离胶和浓缩胶： 2)凝胶板的准备 ...

1、 注意磁场漂移问题，判断是否需采取必要防噪措施。 2、了解邻近实验室情况，是否有互相干扰或怕干扰的仪器，例如磁测量仪、变电箱。 3.、要求工程师确实能完成各种指标，例如C，H，F，P，N探头的信噪比。 4、附近不要有xrd衍射仪，透射电镜，还要远离震动大的机器。避免震动噪音污染。注意安装换气扇，空调，接空压机的乳胶管，毛巾，电吹风（塑料的），去问工程师吧。 5、仪器安装前，仪器供应商会给您安装 ...

掌握一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的方法，并用此法进一步分析血清蛋白的组成。 1、聚丙烯酰胺凝胶 聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺（Acr）、NN′—甲叉双丙烯酰胺（Bis），在催化剂过硫酸铵（ammonium persulfate (NH4)2S2O8 简称AP）或核黄素（ribofavin 即vitamin B2 C17H20O6N4）和加速剂NN N′N& ...

二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术（根据蛋白质等电点进行分离）以及SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（根据蛋白质的大小进行分离）。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。 通常第一维电泳是等电聚焦，在细管中（φ1～3 mm）中加入含有两性电解质、8M的脲以及非离子型去污剂的聚丙烯酰胺凝胶进行等电聚焦，变性的蛋白质根据其等电点的不同进行分离。而后将凝胶从管中 ...

一、目的 同工酶是指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。研究表明，植物在发育过程中，所含同工酶的种类和比例都不相同，它们与植物的遗传、生长发育、代谢调节及抗性等都有一定关系，因此作为基因表达的产物，测定同工酶谱是认识基因存在和表达的一种工具，在植物的种群、发育及杂交遗传的研究中有重要的意义。 过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶 ...

一、目的 蛋白质分子有单链、双链和寡聚蛋白等组成形式，组成蛋白质分子的单条肽链又称亚基。通过对天然蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳和变性蛋白的SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱的比较，可以研究种子蛋白质分子组成和结构。另外，SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳是测定亚基分子质量的好方法。通过本实验，学习SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理、技术和实际应用。 二、原理 用十二烷基硫酸钠（SDS）和还原剂（琉基乙醇或二硫 ...