遗传学实验技术

世代交替 ，以两个或两个以上的交替形式出现在植物、藻类以及少量的无脊椎动物的整个生命周期。世代交替包括有性阶段和无性阶段。

杂交指基因型不同的个体之间进行的交配。从遗传的角度来说，在分子生物学上把两条单链DNA或RNA的碱基配对称为杂交。

介绍了进化论基本知识及相关证据。

介绍了数亿年前生命的诞生与人类的进化。

遗传的研究通常是两大类：定量遗传和定性遗传。 颜色育种，是定性遗传，是相当重要并容易识别的，由单一基因突变而来并流传下来，可以在系谱图上显示。

介绍生命是什么，DNA和染色体、生命是如何开始的，第一个有机体的产生。

介绍了数亿年前生命的诞生与人类的进化。

细胞如何以及为什么分裂，有丝分裂细胞周期各阶段，细胞如何将核和细胞质分裂

遗传的研究通常是两大类：定量遗传和定性遗传。 颜色育种，是定性遗传，是相当重要并容易识别的，由单一基因突变而来并流传下来，可以在系谱图上显示。

介绍生命是什么，DNA和染色体、生命是如何开始的，第一个有机体的产生。

世代交替 ，以两个或两个以上的交替形式出现在植物、藻类以及少量的无脊椎动物的整个生命周期。世代交替包括有性阶段和无性阶段。

减数分裂和有丝分裂两种分裂方式DNA复制启动后，每个染色体有两个姐妹染色单体。在减数分裂Ⅰ期，同源染色体配对，然后分开到不同的细胞。姐妹染色单体然后在减数分裂Ⅱ期分离，这类似于一个正常的有丝分裂。减数分裂从而引起四个单倍体的子细胞。

介绍了进化论基本知识及相关证据。

1949年Barr等发现，在雌性体细胞中的两条X染色体有一条（或这条的大部分）处于凝集不活动状态，从而形成X-小体（或称X-染色质、性染色质、Barr小体）。进而发现，所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体，当在个用雌或雄体中，有多于2条X染色体时，在间期细胞内除一条外，其余均形成X-小体。

1976年Goodpasture等应用银染色技术，使9种哺乳动物的核仁组织者区（NORs）特异性的染为黑色，该技术被称为Ag-As的银染技术，银染色阳性的NORs被称为Ag-NORs，与Hsu等人用原位分子杂交得到的结果比较，表明Ag-NORs就是18S+28S核糖体基因（rDNA）的分布区，后证实染色的不是rDNA基因本身，而是与rDNA转录有关的一种酸性蛋白。

姊妹染色单体区分染色法（Sister chromatid differentiation，SCD）是70年代中期发展起来的染色体处理技术。Latt（1973）在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU），当用Hoechst33258 荧光染料染色时，发现了姊妹染色单体的色差反映和它们之间互换的现象。

异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。

非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体，其他多数染色体难以确认，而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹，以辨认全部染色体。GTG即G带，Trypsin（胰酶），Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪--曙红染料，染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红（2∶1）的沉淀物。

免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）基本实验步骤：（1）收获细胞，加入适量细胞IP裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上或者4℃裂解30min, 12,000g离心30 min后取上清；（2） 取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液将1μg相应的抗体和10-50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液，4°C缓慢摇晃孵育过夜；（3）免疫沉淀反应后，在4°C 以3,000 g速度离心5 min,将protein A/G-beads离心至管底；将上清小心吸去，protein A/G-beads用1ml裂解缓冲液洗3-4次；最后加入15μl的2×SDS 加样缓冲液，沸水煮10分钟；（4）SDS-PAGE, Western blotting或进行质谱分析。

对于Western Blotting实验而言，样品处理是关键步骤之一，获得的蛋白样品必须均质、可溶，并解离成单个多肽亚基，且尽量减少相互间的聚集，使其最终仅依赖本身的分子量大小进行分离。当目标蛋白的含量很低时，需要选取目标蛋白含量较高的组织或细胞器（如核抽提物），或者通过免疫沉淀等方式进行富集。通常样品有重组蛋白、细胞和组织等。