组蛋白修饰详情乙酰化乙酰化是最早发现的影响转录调控的组蛋白修饰之一,因此目前研究的最多。乙酰化使 从核小体伸出 的 N-末端组蛋白尾部的赖氨酸残基带负电荷,这些负电荷会排斥带负电荷的 DNA,导致染色质结构 松弛。开放的染色质构象允许转录因子结合并显著增加基因表达 (Roth et al., 2001)。组蛋白乙酰化参与细胞周期调控、细胞增殖和凋亡,并在调节细胞分化、DNA 复制和修复、核输入和 神经元抑制等多种细胞过程中发挥重要作用。组蛋白乙酰化的平 ...
由于狗和猪等家养物种发生了如此巨大而迅速的变异,可以认为驯化的进化速度比野生的要快。但事实果真如此吗?马德琳·盖格(Madeleine Geiger)在《动物学前沿》(Frontiers in Zoology)上发表了一项新研究,她解释了自己对此进行的研究。家畜的种类之多令人吃惊。例如,短鼻牛头犬、优雅的灰狗和巨大的圣伯纳德犬都属于同一种生物或物种,这似乎是很自然的。然而,家畜代表了一种不同寻常的变异。如果你考虑到这种变化出现 ...
基因组编辑技术是指可以在基因组水平上对 DNA 序列进行定点改造的遗传操作技术,其在基因功能研究和改造、生物医学和植物遗传改良等方面都具有重大的应用价值。科学家自 20 世纪 90 年代末就开始探索基因组定点编辑技术,但直到 2002 年,也仅在小鼠和果蝇等少数模式生物中实现了同源重组介导的基因组定点编辑,且因同源重组的效率很低,限制了其应用前景。进入 21 世纪后,随着蛋白质结构与功能研究的新突破和人工核酸内切酶 (engineeredendon ...
基因枪法一直被认为是最直接、应用范围最广的外源基因导入技术。但由于传统基因枪技术需要靠高压气体驱动,这就带来一个问题:被轰击的中心区域由于气体冲击力过大,会导致被轰击区域大量靶细胞死亡,大量的投递被浪费掉,严重制约了基因枪法投递的转化效率。实践中,利用传统高压手持基因枪尝试将potato virus A (PVA; Puurand et al. 1996)病毒转染到烟草中时,发现氦气压力调节至 150 或 200 psi,距离样本 0 cm 时,可以 100% 转染成功,但是 ...
实验简介脾脏是机体最大的免疫器官,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心,ft 机体免疫失衡时,免疫细胞的数量和比例都会发生变化,流式细胞仪能够直接检测出该变化的发生。该实验通过一个优化设计的 8 色方案,检测出了小鼠脾脏中 T、B 细胞亚群以及 FOXp3 的表达,从图中可以看出细胞分群好, 结果的判读准确,操作简便,证明 CytoFLEX 卓越的性能和便捷的操作性。材料与方法▶ 试剂▶ 样品制备Sample Typec57bl/6 小鼠脾脏细 ...
什么是 CRISPR?CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats), 是细菌中用于与病毒进行斗争的免疫武器。 生命进化历史上,细菌为了将病毒的外来入侵基因清除,进化出 CRISPR 系统,利用这个系统,细菌可以不动声色地把病毒基因从自己的染色体上切除,这是细菌特有的免疫系统。这种切除功能其中比较典型的模式是依靠一个复合物,该复合物能在一段 RNA 指导下,定向寻找目标 DNA 序列 ...
试管婴儿是解决不孕不育的主要手段,在我国,试管婴儿的平均成功率仅为 20-30%,而高失败率的主要原因是胚胎染色体异常,比如非整倍体。为了提高试管婴儿的成功率,通用的做法是一次移植多个胚胎,但这种做法的普遍问题是多胎妊娠。为了降低多胎妊娠的概率,有些机构已开始采用单个胚胎移植的方法,并对胚胎进行植入前遗传筛查,以确保移植的胚胎是整倍体。植入前遗传筛查(PGS)被认为是一种可行的手段在胚胎移植的选择上已经应用了几十年, ...
植物,千姿百态;动物,形态各异;微生物,有益又有害;人类,相似又各不相同。世间万物多样却共享着相似的东西,那就是 「基因」。基因就是生死簿然并卵伺候的不好还会 「闹脾气」玩个「突变」,癌症来了。总之一句话「基因是生物施工的设计图」。每个人,每朵花儿,每只松鼠都是建筑工地,从一个受精卵的时候就开始修建了。每个细胞都是一个小的建筑工地。在「设计图」的指导下,鼻子没有长成眼睛,胳膊没有长成大腿。所谓的龙胜龙,凤生凤,老鼠的儿子会打洞,就是基因 ...
嗨,大家好,我是抗癌药物,你们对我一定都不陌生。大多数人都不想跟我有关系吧,谁让我的「对手」——癌细胞那么可怕呢。不过我可是大家的好朋友,有句古话说得好:「良药苦口利于病」,我其实是帮助病人尽快战胜疾病的。新闻报道中,时常有我的身影,可大多并不是我的真正模样。所以今天我就出来见见面、聊聊天,让大家认识一个真实的我。据WHO统计,每年约820万人死于我的天敌,预计占全球死亡人数的13%;同时,WHO预测,未来20年,癌症病例将 ...
对于自己脖子上扛着的那个脑袋,每个人好像都熟悉又陌生。甲为什么那么聪明,乙为什么有点木讷,丙的反应为什么那么快? 你的脑袋是怎样指挥手去动作的? 我们看到的东西为什么不是事实? 我们头颅里灰色的泥糊状物质为我们创造了一个完整的拥有情感、记忆、观念和欲望的内在世界。我们所看到的、触摸到的、听到的和感受到的每样东西——都由这个让人琢磨不透的家伙的「私生活」产生。大脑的意识是人一切活动的基础,如果大脑的活动紊乱或停止,则人的生命将受 ...
「癌」在英语中与「蟹」是同一个词,意思是癌细胞的生长像蟹一样,伸出魔爪侵入周围组织,并可向远处转移、扩散。癌与蟹癌症的原发肿块并不可怕,尤其是在早期外科手术可以完全摘除。之所以令人「谈癌色变」,是由于癌细胞的转移和扩散。癌细胞一旦发生转移和扩散便发展到了几乎无可救药的地步。癌细胞转移是一种很奇特的现象,首先,癌细胞在原位长大后,只有一部分会随着淋巴或血液离开原始部位,其它的会原地不动,并逐渐死去;其次,癌细胞离开原位后 ...
相信很多人都和小编一样,已经被王大大的小目标刷屏了轻描淡写,霸气外露小编看后备(da)受(le)鼓(ji)舞(血)做人没有小目标和咸鱼有什么区别?所以今天小编跟大家聊聊减肥版人生小目标希望你能早日达到想想都好美好,晚上睡觉都能笑醒有了小目标就要行动了市场上有各种减肥药、减肥茶、瘦身果等等真实效果小编不敢恭维但总结起来减肥就是「管住嘴,迈开腿」。减肥往往以管不住嘴而失败告终有没有什么捷径呢?要是有个基因调控一下直接让 ...
上个世纪 80 年代,随着基因重组技术的不断完善和小鼠胚胎干细胞(ES)体外培养技术的成熟,基于同源重组的 ES 打靶得以建立。ES 打靶基因敲除技术修饰准确、效果稳定、成功率极高,一直被认为是对模式动物进行特定基因修饰的金标准。但由于嵌合体阳性率低,且必须与工具鼠交配才能获得删除 Neo 的杂合子,使得构建周期长达 12-16 个月。20 世纪初,核酸酶基因编辑技术(TALEN、CRISPR/Cas9)出现,其周期短(6~8 个月)、无物种限制等优势迅速受到广 ...
肿瘤迁移模型通常是在具有免疫缺陷的小鼠上采用细胞系异种移植的方式来构建。在新环境下,有关肿瘤细胞习性的大量信息通常都是通过迁移模型来获取的。被称为「肿瘤中心论」的设计方法,在动物组织中,其主要研究对象是人肿瘤传播的细胞自发影响因素。实际上,采用复杂的动物模型做为肿瘤的「培养皿」,其不仅为肿瘤生长提供了丰富的营养物质还为肿瘤的生存提供了支持。作为全身性疾病,转基因或基因敲除鼠癌症模型可以用来研究肿瘤迁移速度,并为 ...
真核生物染色体 DNA 的忠实复制发生在每个细胞周的 S 期。在复制叉双向移动的特定结构(称为起点)中,复制是受高度调节的和启动的。许多成熟的技术已经被应用到研究染色体复制动力学和特征中。许多技术都能提供了一个宏观水平的复制视角(例如基于流式细胞术、基于 2 维和凝胶电泳)。不管怎么样,另一种诞生于 50 年前,被称为 DNA 纤维分析的方法,在单个 DNA 纤维水平上揭示 DNA 复制特性,具有绝对的优势。最初基于放射自显影的技术现在已近被结合有卤代胸苷类似物的免 ...
识辨转录因子靶基因对理解酵母菌转录基因调控网路非常重要。我们开发了一种名叫转座子「名片」的技术,该技术的原理是,通过利用转录因子可调控 Ty5 复古转录酶(Ty5 retrotransposase)将转座子插入与转录因子结合位点相邻的基因中。该方法不仅可以在许多编码转录因子中重复使用,当对大量转录因子进行研究时,还具有降低劳动强度的潜在作用。
在最新出版(2016.02)的冷泉港实验指南的头版,详细阐述了 CRISPR-Cas9 系统在小鼠基因编辑中应用在现代生物学中,实现对小鼠基因进行编辑或许是最重要的进步之一。然而,传统基因工程手段都很费时费力。可编程核酸酶的使用极大的提高了基因编辑技术的准确性(如,锌指核酸酶、转录激活效应核酸酶),但是这些核酸酶的设计和使用仍然纷繁复杂成本高昂。随着下一代可编程核酸酶系列--CRISPR-Cas9 系统的出现,使得基因编辑的能 ...
XXXX原代细胞干预培养与激光共聚焦蛋白细胞定位实验实验试剂:PBS(磷酸盐缓冲液pH7.4)(实验室常规配置);非免疫山羊血清;Triton X-100(sigma);BSA抗体稀释液(实验室常规配置);A蛋白抗体(Santa cruz);B蛋白抗体(Abcam);Alexa Fluor® 488 donkey anti-goat IgG (H+L)(Invitrogen);AlexaFluor® 555 Anti-Rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment( ...
CRISPR/Cas-mediated genome editing in the rat viadirect injection of one-cell embryos通过直接注射单细胞胚胎,利用CRISPR/Cas 技术介导大鼠基因编辑Conventional embryonic stem cell (ESC)–based gene targeting, zinc-finger nuclease (ZFN) and transcription activator–like effector nucle ...
我们实验室在细胞信号转导方面非常强,但是目前的趋势是没有动物体内的结果使文章的档次大打折扣。导师意识到这一点,3年前在我开始硕博连读的阶段铁了心要我构建基因敲除的小鼠来验证一些体外研究的结果。由于我们是一个传统的cellular biochemistry的实验室,基因敲除小鼠方面我们只有从书本上学来的理论知识。这样的课题对我来说真是极具挑战性,但是想到将来可能出非常好的成果,我也信誓旦旦的接下了任务。我们前期 ...