实验原理 植物原生质体是除去细胞壁后为原生质所包围的“裸露细胞”，是开展基础研究的理想材料。其中酶解法分离原生质体是一个常用的技术，其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，因而使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能降解细胞壁成分，除去细胞壁，即可得到原生质体。由于原生质体内部与外界环境之间仅隔一层薄薄的细胞膜必须保持在渗透压平衡的溶液中才能保持其完整性。其次还应当考虑取材、酶的种类和纯 ...
实验试剂 1. Absolute Ethanol - approximately 0.3 ml per sample 2. RNase A(Optional) - Prepare a stock of RNase A at 50mg/ml 实验设备 1. Tabletop microcentrifuge and sterile 1.5 ml tubes 2. Water bath - ...
实验试剂 Neurobasal® MediumB-27® Serum-Free SupplementGlutaMAX™-ITrypan BlueSynth-a-Freeze® Cryopreservation Medium 实验设备 Cryogenic VialsIsopropanol ChamberFreezer -80°CLiquid nitrogen freezerWater b ...
实验材料 胡萝卜直根 实验步骤 1. 用清水洗净胡萝卜直根，用小刀削去表皮和顶部。2. 将其在75%的酒精中消毒5min.3. 50%的次氯酸钠消毒30min，120rpm。4. 无菌水漂洗5遍再用无菌水浸泡30min.5. 最后用无菌水漂洗3遍..6. 消毒好的胡萝卜直根切去表面消毒的1/3部分，下边的2/3部分留下部分用消毒好的小刀沿截面横切成厚度1mm左右的小圆片。7. 然后将小 ...
实验试剂 Buffer A：1M山梨醇，10mM bicine(N－二(羟乙基)甘氨酸)pH8.35，3%(v/v)乙二醇Buffer B：40%(w/v)聚乙二醇1000，0.2M N－二(羟乙基)甘氨酸pH8.35Buffer C：0.15M NaCl，10mM N－二(羟乙基)甘氨酸pH8.35过滤除菌，存于-20 度新鲜的试剂级DMSO，未打开或刚配制，存于-70 度直至使用。 ...
实验步骤 1. Protocol for total RNA purification from tissue sample with E.Z.N.A.® Total RNA System 1) Remove sample from RNASafer® Reagent using forceps. 2) Estimate the amount of the tissue and se ...
实验试剂 1. 包被缓冲液：(0.05 mol/L，pH 9.6的碳酸盐缓冲液) Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g蒸馏水 1000ml4℃保存，一周内用完。2. 磷酸盐缓冲液(PBS，PH 7.4) NaCl 8.0g KH2PO4 0.2g KCl 0.2g Na2HPO4.12H2O 3.65g蒸馏水 1000ml3. 洗涤液(0.01 mol/ ...
实验原理 HrpNEa是植物病原细菌E. amylovora产生的一种多效型蛋白，用其处理拟南芥能激发脱落酸和乙烯信号介导的抗旱和抗虫过程。ABA和乙烯两种激素都参与了种子萌发和根生长，但在植株地上部分的抗虫性和促生长中只有乙烯是需要的。随着在缺水条件下HrpNEa应用于生长植株的地上部分，ABA介导的干旱被启动而此过程有不需要乙烯的参与。 实验材料 1. 拟南芥野生型Co-0 ...
实验步骤 1. Dissolve the DNA pellet with 200 ul of Elution Buffer or Buffer TE. Important: DNA pellet should be dissolved in Elution Buffer or Buffer TE(pH8.0).2. Add 50 ul inhibitor Removal Resin to the ...
实验原理 在实际的研究工作中，野外取样的地点一旦较为偏远，受条件的限制，很难保证得到的样品活体或能够快速冷冻；另外，对一些稀有物种和濒危种，鲜活样品的采集十分困难，一般为了解决这些问题，常采用乙醇和甲醛固定的方法来处理样品，再对样品DNA 进行提取以及扩增。使用乙醇固定样品具有硬化，固定，脱水作用，对组织渗透迅速，特别适合组织中核酸的保存，相比于甲醛等其它固定方法，此法更简单，保存时间更长质量更 ...
实验原理 1. Metal-Enhanced Fluorescence Discovery of surface-enhanced Raman scattering (SERS) (1 2) revitalized Raman spectroscopy and resulted in many new applications of the technology. In contrast to ...
实验原理 固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）技术基于液相色谱原理，可近似看作一个简单的色谱过程。原理是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取可分为在线萃取和离线萃取。前者萃取与色谱分析同步完成，而后者萃取与色谱分析分步完成，两者在原理上是一致的。 ...
实验原理 这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难，近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的 ...
实验原理 多胺是所有活细胞内的脂质阳离子小分子化合物，以腐胺、精脒和精胺为主要代表。已揭示在某些重要的生物过程中，例如DNA、RNA和蛋白质的合成中，多胺可能具有一定的作用。但其作用机制目前还不够明确。本试验通过多胺体外结合蛋白的分析，来鉴别和描述新型多胺。本文采取超滤方法，分析多胺（精胺或胺）结合大肠杆菌或酿酒酵母产生的人或鸟的鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白。除了方便，快捷，此方法只需少量纯化的蛋白检测 ...
实验试剂 1. Arabidopsis suspension culture: T87 suspension culture (RIKEN BioResource Center).2. Liquid medium for T87 cells: 1/2 MS (Murashige and Skoog) salts 3% sucrose 0.29 g/L KH2PO4 0.2 mg/L 2 4-D ...
实验原理 混合的单核细胞悬液在通过尼龙毛柱时，B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上，而多数T细胞则通过尼龙毛柱，这是获得富含T细胞群的有效方法。 实验设备 1. 尼龙毛(Femwall LaboratoriesLP－1 Leukoqak leukocyte Filters)。2. 烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。3. 装填尼龙毛柱，一次性注射器。 实 ...
实验原理 常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是 1.077±0.001 的聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F／H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性，犌W水性高，平均分子量为400，000，当密度为1.2g／ml仍未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮 ...
实验步骤 1. Protocol for grinding plant seeds. 1) grind using a bead mill a. place one seed into each well of a 2 ml square well block. b. Pipette nuclease-free water into the well accordi ...
实验原理 我们知道微生物都具有生长旺、繁殖快的特点，单细胞微生物如细菌、酵母菌的个体细胞的增大即细胞物质的增加是有限度的，细胞长大到 一定程度就开始分裂繁殖，菌体数量增多。细菌旺盛生长时几十分钟就可繁殖一代。因此他们的生长往往是通过繁殖表现出来的，本质上是以群体细胞数目增加为生长标志。丝状微生物如放线菌、霉菌的生长主要表现为菌丝的伸长和分枝，他们相互缠绕，很难分清个体与个体之间的界限，所以通常以 ...
实验试剂 1．类风湿免疫诊断试剂盒：人变性IgG致敏的胶乳颗粒，阳性血清，阴性血清。2．标本：被检血清56℃30分种灭活，可阻止假阳性凝集。3．生理盐水。 实验设备 毛细管、刻度吸管、试管、牙签、黑色方格反应板、微量震荡器等 实验步骤 【操作方法】1．先用生理盐水将被检血清、阳性血清、阴性血清做1:20稀释。2．于黑色反应板上取三个方格，用毛细管分别加1: ...
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