微生物学技术

Ⅰ 细菌芽孢染色某些细菌在其发育的一定阶段可以形成一个内生孢子，即为芽孢。芽孢形成后并不脱离原细菌菌体，它的形状、大小和在菌体的位置都是一定的。老熟的芽孢可自菌体中脱落出来。芽孢结构上的特点是壁厚和细胞质浓厚，所以不易着色，通常多采用着色力强的染色剂和用加热等手段促使芽孢着色，并利用复染的方法对比原细菌菌体和芽孢，才易于在显微镜下看到它们。但是，若用简单染色法使菌体着色而芽孢无色也可以衬托出芽孢的 ...

一、设备和材料恒温培养箱、恒温水浴槽、试管、移液管、菌落计数器、放大镜、托盘天平、称量纸、培养皿。二、培养基和试剂营养琼脂培养基 0.9%生理盐水三、检验程序待检样 适当倍数的稀释液 选择2-3 个适当稀释度各1ml分别加入灭菌平皿内 每皿内加入适量营养琼脂 37℃ 48±2小时 菌落计数→报告四、操作步骤1．按无菌操作要求称取样品10g，连同100ml生理盐水加入灭菌三角瓶内，震荡，使成1∶10 ...

一、实验目的要求1 了解土壤微生物的分离纯化及测数的基本原理。2 学习并掌握微生物分离纯化技术方法。3 学习并掌握微生物平板菌落计数的技术方法。二、基本原理土壤是微生物生活的大本营，其中含有大量不同类型的微生物，可按照一定的方法将各类微生物通过分离进行纯培养，并能对特定类群进行数量测定。基本原理是通过稀释使菌体细胞充分分散，单细胞得以生长发育形成菌落，可使用稀释法或平板划线法进一步纯化，还可通过平 ...

一、 实验目的 1、了解微生物分离和纯化的原理；2、掌握常用的分离纯化微生物的方法；3、掌握菌落特征的观察。4、学习掌握微生物的几种接种技术 5、 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节二、实验原理 从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。平板分离法普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求 ...

一 教学要求 通过从土壤中分离纯化细菌，初步掌握微生物的分离纯化方法和无菌操作技术。二 实验原理 - 常用的分离纯化方法 microorganisms exist in nature as mixed populations. However to study microorganisms in the laboratory we must have them in ...

一、病毒感染后的形态学观察 （一）电镜观察病毒的形态 电子显微镜技术可直接观察病毒的大小、形态、结构以及病毒在细胞内增殖的动态过程。制作电镜标本的方法主要有超薄切片（厚度为100nm左右），磷钨酸负染法等。 通过观看病毒的电镜照片、幻灯片、多媒体，了解病毒（大肠杆菌噬菌体、流感病毒、腺病毒、脊髓灰质炎病毒、乙型肝炎病毒、甲型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、狂犬病病毒等）的形态结构特点，以及它们与被感染细胞 ...

实验目的：掌握培养基的配制原则与方法； 掌握划线分离纯化微生物的原理与方法 熟悉手提式高压灭菌器的使用方法和注意事项； 实验材料：器材：试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅等。 试剂：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等 实验原理： 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素、能源和水。根 ...

一、实验目的 1、学习分离和纯化菌株的方法； 2、学习营养口服液的制作方法及过程；3、初步了解食品药品生产时的管理规定和技术标准。二、实验原理双歧杆菌、乳酸杆菌和乳酸球菌等对人体有明显有营养保健作用，是微生态试剂的重要生产菌株。双歧杆菌是一种厌氧菌和微好氧菌株，它对生存环境的要求非常苛刻，易受氧、水分、光线、保护基质等条件的影响。微好氧菌株经过驯化，能承受一定氧压，既有利于生产，又能促进正常 ...

一、基本知识与原理 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展，转身已成为基因精细结构分析的常用方法之一。 根据噬菌体转导供体菌基因的差异，转导可分为普遍性转导和局限性转导。这里以局限性转导为例说明转导的基本原理。局限性转导实验中常用的是大噬菌体，它能整合在大肠杆菌染色体DNA上的半乳糖基因（gAl）和生物素基因（bib）之间，因此，它能转导半乳糖 ...

一、实验目的 1、学习酸乳的制作方法；2、从酸乳中分离和纯化乳酸菌；3、自制乳酸质量品尝；4、初步了解食品药品生产时的管理规定和技术标准。二、实验原理酸乳是以牛乳为主要原料，接入一定量乳酸菌，经发酵后而制成的一种乳制品饮料。当乳酸菌在牛乳中生长繁殖和产酸至一定程度时，牛乳中的蛋白质就因乳酸菌产酸而凝结成块状，并产生一些次生代谢物质使它具有清新爽口的昧觉。此外，由于酸乳中含有乳酸菌的菌体及代谢 ...

一、实验目的掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。 二、实验原理从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的分离、纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法 稀释涂布平板法步骤：倒平板－制备 ...

一、单糖发酵试验 （一）、实验原理 单糖发酵是将葡萄糖，乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内，使其最终浓度为0.75~1％。并加入一定量酚红指示剂及小倒管，制成单糖发酵管，接种细菌经37℃培养18~24小时，若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄，若能分解甲酸有CO2和H2等气体形成，小倒管内则聚集有气泡；不分解，则指示剂不变色。 (二)、实验材料 1．菌种：大肠杆菌，伤寒杆菌18~24小时琼脂斜面 ...

一、实验目的1.了解简单染色法的原理，并掌握其操作方法。2.学习并掌握微生物涂片、染色的基本技术和无菌操作技术。3.巩固显微镜(油镜)的使用方法。4.初步认识细菌的形态特征。 二、实验原理 细菌个体微小，且较透明，必须借助染色法使菌体着色，与背景形成鲜明的对比，以便在显微镜下进行观察。根据实验目的不同，可分为简单染色法、鉴别染色法和特殊染色法等。简单染色法是最基本的染色方法，是利用单一染料对 ...

实验目的： 掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。 实验材料： 菌种、普通琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。 实验内容： 一、平板划线接种法（分离培养法） 原理：通过在平板上划线，将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开，使单个细菌能固定在一点上生长繁殖，形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。若需从平板上获取纯种，则挑取一个单个菌落作纯培养。 用途： 分离出 ...

给细菌提供适宜的条件，细菌即可以生长繁殖，形成具有一定特征的培养物，学习细菌培养技术可以纯化细菌，了解细菌的生长特征，并能进一步检测细菌生化反应、变异性，制备细菌抗原，深入进行分子生物学工作等。了解细菌的培养特征也有助于鉴别细菌。 细菌培养基的制备 培养基是用人工方法将适合细菌生长繁殖的各种营养物配制而成的营养基质，以供细菌培养使用。一般培养基的主要成份为蛋白质、糖类、盐类、水分等。另外还有一 ...

一、目的与任务1. 学习病毒的分离纯化方法2. 通过病毒的分离纯化进一步理解病毒与宿主的相互关系二、基本原理杆状病毒是一类寄生于节肢动物的杆状的病原微生物。其宿主主要是鳞翅目、膜翅目和双翅目的昆虫 还有一些杆状病毒可以感染甲壳纲的节肢生物。杆状病毒常常包埋于由蛋白质组成的包含体基质(polyhedron/granulin)中。根据包含体的形态和病原微生物在(昆虫)细胞中的分布 可以将杆状病毒划分为 ...

不同细菌由于所含的酶系统不完全相同，因而对营养物质的分解能力及代谢产物亦不一致，据此，可用以鉴别细菌的种类。 一、单糖发酵试验 【原理】 单糖发酵是将葡萄糖，乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内，使其最终浓度为0.75~1％。并加入一定量酚红指示剂及小倒管，制成单糖发酵管，接种细菌经37℃培养18~24小时，若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄，若能分解甲酸有CO2和H2等气体形成，小倒管内则聚集 ...

实验目的 1掌握病原性球菌培养物性状。 2掌握血浆凝固酶试验原理方法。 3掌握密集接种法，熟悉药物（如抗生素）抑菌杀菌原理并了解纸片法、试管法的试验方法及应用。 实验材料 1、菌种：金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌6~8小时肉汤培养物。 2、培养基：普通琼脂平板、肉汤培养基。 3、药品：青霉素溶液（50u/ml）、抗生素滤纸片。 4、器具：恒温箱、接种环、酒精灯、试管、无菌棉拭、无菌小镊子、无菌吸管、玻片 ...

一、自然沉降法 检查空气中的细菌 【材料】 普通琼脂平板。 【方法】 取普通琼脂平板一个，打开皿盖，让培养基直接暴露于空气中，置于实验台上或需要测定的地方15~30分钟。盖上皿盖，用记号笔或蜡笔注明放置地点、实验日期和实验者班级、姓名等，放入37℃温箱培养18~24小时，观察细菌的生长情况和数量。并分析其意义。 二、倾注法检查水中的细菌 【材料与方法】 1 ...

一、主要病原性球菌的形态、培养特征 【形态示数】 1. 葡萄球菌（革兰染标本）：革兰染色阳性，为正圆形，呈葡萄串状排列，亦有单个散在分布。 2. 链球菌（革兰染色标本）：革兰染色阳性，圆形或卵圆形，呈链状排列。 3. 肺炎双球菌（小鼠腹腔液涂片，HiSS染色）：革兰阳性球菌，矛头状成双排列，平端相对，尖端相背。荚膜染色片中，菌体呈红色，菌体周围的荚膜呈淡红色或无色。 4. 脑膜炎双球菌（脑脊液涂片 ...