由于在流式细胞实验过程中,荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此,需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素,例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。 流式抗体的选择: 1. 流式抗体本身也是抗体,所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件:目标蛋白特异性,反应种属以及应用实验。 2. 流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在流式实验过程中,尽量减少实验工序和过程,以保证实验的 ...
网友提问:一年来碰到几次这样的情况,吸光度值在0.14,0.16附近,更换试剂复查后依然如此。 请示主任,主任要求必须报阴性或阳性。我的意见是,可不可以报成:可疑,请查PCR,他说不可以。 我觉得,这样的结果,报阴性或阳性都有些不妥,不知各位大侠有什么高见,请指点迷津! 网友huaxiljw个人认为,报可疑是可以的,但根据ISO15189的有关规定,你必须在你的SOP里写清楚,如果你的文件规定可以报可疑结果那你就可以报,如果没有写清 ...
做好化学发光内分泌检测室间质评的几点建议: 1、做好仪器维护与保养:日保养做好主针及管路清洗。周保养做仪器内部、主探针外表面、孵育带及反应管感应点清洁。月保养做好主探针捅洗,然后作系统检测。 2、做好标准曲线的校正: 以下情况必须较标:①在新批号试剂使用前必须进行定标。②标准曲线过期或质控值超出控制范围。③仪器相关部位经过较大维修、配件更换或缓冲液等试剂的升级。 3、重视实验过程各个环节:避免试剂和试剂通道的气泡产生,维护实验室工作环 ...
一项源于全球数据的荟萃分析结果表明:基于抗原的快速point-of-care(POC)方法来筛查乙型肝炎病毒感染的方法通常是非常准确的,但是基于抗体的筛查的敏感性则有待进一步提高。这一结果在线发表于5月29日美国胃肠病学院的官方杂志《The American journal of gastroenterology》上。 据估计,全球有数千万人感染乙肝,其中四百万为急性传染期病人。在一些低收入和偏远地区,快速的POC乙肝筛查可能是替 ...
文章作者:首都医科大学附属北京佑安医院 闫惠平 自身免疫性肝病(AILD)是一组肝脏免疫耐受机制失衡引起的肝细胞或胆管上皮慢性损伤性炎症疾病,根据其临床表现、生化、免疫学、影像学和组织病理学特点,可分为以肝实质细胞进行性损伤为主的自身免疫性肝炎(AIH),以胆道系统受累为主的原发性胆汁性肝硬化(PBC)和原发性硬化型胆管炎(PSC)。自身免疫性肝病可单独发病,也可出现AIH与PBC、或AIH与PSC同时发病的情况,被称为“重 ...
血液筛查质量的高低,直接关系到受血者的安全。目前。国内采供血机构针对感染性疾病病原体筛检的标志物共有4种,即乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型地炎病毒抗体(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)和梅毒抗体。主要采用酶联免疫明附试验(ELISA)方法检测。方法模式有一步双抗体夹心法、间接法和一步或两步双抗原夹心法等。所使用的仪器设备主要有酶标洗板机、全自动酶免疫分析系统和全自动加样系统等。尽管国内采血机构的血 ...
丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染是一个世界范围内的严重公共问题,全球约1.8亿人感染,欧美儿童HCV感染率约为0.05%~0.36%,而发展中国家可达1.80%~5.00%,可能是因为卫生经济条件的差异所致。由于尚无HCV疫苗及妊娠期用药的限制,垂直传播仍是新生儿感染的主要原因。 儿童HCV感染的诊断 HCV垂直传播可发生于妊娠各个阶段,是儿童感染的重要途径之一。国外学者对母亲HCV RNA载量、病毒基因型、抗-HCV、分娩方式、细胞因子 ...
流式细胞术(FCM是70年代初发展起来的一项高新技术,80年代开始从基础研究发展到临床医学研究及疾病的诊断和治疗监测。我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪,到目前在医学院校、科研机构和医院已经有700多台。 FCM采用流式细胞仪对细胞悬液进行快速分析,通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。FCM综合了光学、电 ...
不久前,一篇主题为“上海市肿瘤发病率高于全国平均水平、接近发达国家”的新闻,引起了不小的震动。在内因与外在多种因素的综合作用下,癌魔的气焰十分嚣张,因而早发现、早诊断、早治疗的意义就更加重大了。然而,肿瘤标记物检测真能第一时间发现癌魔的动向吗?罹患同一种恶性肿瘤的患者,恢复情况则大相径庭,这是为何呢?针对这一系列问题,本刊采访了上海市第十人民医院检验科主任孙奋勇教授,专家指出,解决这些问题的关键在于“细微之间”的差别。 肿 ...
丙型肝炎呈全球性流行,每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。我国一般人群抗-HCV阳性率为3.2%。在感染30年后HCV相关性肝细胞癌发生率平均为1%~3%。HCV感染的实验室检查是丙型肝炎诊断的重要依据,所以检测方法的选择和及早检出HCV非常重要。现行的HCV检测技术为HCV抗体检测和HCV RNA检测,二者均存在一定的局限性。丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)检测作为一种补充试验,希望用来代替HCV RNA检测,很多学者已经 ...
1.国内梅毒血清学试验的传统程序是:先以非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR、TRUST、VDRL等)进行初筛,再以梅毒螺旋体抗原血清试验(如TPPA、TPHA、FTA-ABS等)进行确认。美国、法国和比利时也采用类似的程序。该程序的优点是排除了大多数感染过梅毒但经过充分治疗的病人,从而使临床更易决定是否需要进行抗梅治疗。但该程序也存在明显的缺陷。一方面非梅毒螺旋体抗原血清试验易出现前带现象,使早期梅毒及合并感染HI ...
自身抗体检测以在临床广泛应用,如诊断和鉴别诊断、判断疾病活动程度、判断治疗效果和预后等。检测自身抗体的方法有很多,本文主要介绍以Hep2细胞为基质的间接免疫荧光法检测抗核抗体的质量控制和检验程序。 一、分析前的试剂和检测准备 (一)HEp-2细胞 要求玻片上细胞密度适当和分布均匀;200倍高倍镜下每个视野至少有3-5个有丝分裂相细胞;能表达相关抗体的靶抗原;细胞形态学稳定;背景荧光低。 (二)检测场所 应有单独的区域进行检测操作和荧 ...
2012降钙素原(PCT)急诊临床应用的专家共识 降钙素原急诊临床应用专家共识组 感染性疾病是急诊科常见的疾病之一,由感染引起的全身炎症反应综合征是脓毒症最根本的病理生理学改变。由于全身炎症反应的复杂性,至今尚无理想的诊断、分层、预后工具和效果显著的治疗方案。已有不少研究证实,脓毒症早期的病理生理改变是功能性的、可逆的。因此,早期准确地诊断脓毒症并监测是改善预后的决定性因素之一。降钙素原(proealeitonin, PCT ...
手足口病(HFMD)是一种常见儿童传染病,近年来在世界多个国家和地区呈现散发或者爆发流行趋势。HFMD 多发生于5 岁及以下儿童,可由多种肠道病毒感染引起,我国将该疾病列入丙类传染病。HFMD 的主要临床表现为发热以及手、足、口腔等部位的皮疹乃至溃疡,少数重症患儿可发生严重并发症,包括肺水肿、心肌炎、无菌性脑膜脑炎等。重症患儿病情进展迅速,病死率较高,受到临床医生高度重视。 PCT 是一种降钙素的前体,新近发现血清PCT的升高与细菌感 ...
女性体内的hLH 刺激卵泡的最终成熟、卵泡的分裂及排卵。人LH 是由脑下垂体腺前叶的促性腺激素细胞分泌出来的,而促性腺激素释放激素(GnRH) 是从内侧基底下丘脑分泌出来的。 hLH及hFSH 都是在脉动状态下分泌的;然而, hFSH 不是那么显而易见,或许是因为它在血液循环中的半衰期更长。 在正常月经周期中,雌二醇的负反馈抑制卵泡期hLH 的分泌。 当卵泡发育( 响应hFSH),雌二醇产生增加,引发GnRH 增加及垂体GnRH 对灵敏度增加。GnRH 高峰导致排卵前期( ...
PRL引起并维持泌乳,故名催乳素。在女性青春期乳腺的发育中,雌激素、孕激素、生长素、皮质醇、胰岛素、甲状腺激素及PRL起着重要的作用。 到妊娠期,PRL、雌激素与孕激素分泌增多,使乳腺组织进一步发育,具备泌乳能力却不泌乳,原因是此时血中雌激素与孕激素浓度过高,抑制PRL的泌乳作用。 PRL 的主要生理功能是激发和维护妇女的哺乳期。正常女性的血清PRL 水平一般是1–25 ng/mL (μg/L),而正常男性的水平一般是1–20 ng/mL (μg/L) 。 正常 ...
多数自身免疫病患者血清中都会出现自身抗体。虽然有些自身抗体在疾病中的确切意义尚未得到严格的证实,但其与疾病的相关性已得到认可,所以这些自身抗体在自身免疫病的诊断和疗效评价方面都具有重要的意义。 一、抗核抗体 抗核抗体(antinuclearantibodies,ANA)泛指抗各种核成分的抗体,是一种广泛存在的自身抗体。ANA的性质主要是IgG,也有IgM和IgA,甚至IgD和IgE。ANA可以与不同来源的细胞核起反应, ...
肿瘤是机体在各种致癌因素作用下,局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控,导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。肿瘤是全球疾病致死的重要元凶之一,据统计,全球新肿瘤患者每10万人中就有173人,在中国每10万人中有110人。专家指出:在所有的肿瘤中有1/3的肿瘤可以预防,1/3的肿瘤可以治愈,1/3的肿瘤可以延长生命。目前,发达国家肿瘤的诊断与治疗多在早期,并且把一些肿瘤标志物作为必检项目。所以,肿瘤 ...
肿瘤标志物(tumor marker,TM )是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞和基因表达而合成分泌的,或是由机体对肿瘤反应而异常产生和升高的反应肿瘤存在和生长的一类物质。 肿瘤抗原可以是肿瘤标志物,但肿瘤标志物不一定是肿瘤抗原。TM存在于患者的血液、体液、细胞或组织中,可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法测定,且对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、疗效观察、检测复发以及预后评价具有一定的价值。 肿瘤标志物的分类和命名尚未完全 ...
化学发光免疫 (chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。主要具有灵敏度高、特异性强、试剂稳定且有效期长、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单、自动化程度高等优点而被临床普遍接受。本文就化学发光免疫临床操作中可能出现的影响因素做如下分析。 1 标本的影响 要注意避免出现严 ...