免疫学技术

ELISA 试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。 下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法 1. 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将 ...

在一般的概念里，ELISA技术的可操作性强，不需复杂设备，甚至完全手工加样、洗板和肉眼判读结果，便可完成该技术的操作。随着人们对质量控制意识的加强，尽可能做到最低限度的减少系统误差，以及减少劳动强度等观念的不断改进，解决ELISA技术中加样、温育、洗板及判读结果过程的系统误差问题及高效率运作问题导致了自动化概念的形成。ELISA技术的加样、温育、洗板及判读结果过程的科学地、有机地、系统地结合，尽 ...

一、原理 标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组织中的抗原进行定位检测。不标记抗体法又可分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。前者利用基因工程方法 ...

一、 原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。 二、材料与试剂 1．马脾铁蛋白 2．硫酸铵 3．硫酸镉 4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸盐缓冲液将XC配制成1%溶液。注意配制的水及容器必须特别清洁，配制后放置4℃数天，以不 ...

抗体稳定剂是许多研究应用中有用的工具。只要抗体能够保持天然构象，抗体就可以特异的结合到靶抗原上并且具有很强 的亲和力。将抗体保存在室温会破坏其结合活性，甚至4°C也不例外。常用的避免破坏活性的方法是冷冻抗体。但是，任何冻融的过程都会减少一部分抗体的活 性。多年来，另一种常用的保存方法是将抗体保存在含有牛血清白蛋白（BSA）的溶液中。但是，许多抗体在冷冻或添加BSA后依然不稳定。 目前，新 ...

原理 补体能使溶血素（抗绵羊红细胞抗体）致敏的绵羊红细胞（SRBC）发生溶血，当致敏的绵羊红细胞浓度恒定时，溶血程度与补体含量和活性呈正比例关系。因此，将新鲜待检血清做不同稀释后，与致敏红细胞反应，测定溶血程度，以50%溶血时的最小血清量判定终点，可测知补体总溶血活性。以50%溶血判断结果比100%溶血灵敏、准确。 材料 1.待检人血清：静脉抽血，待凝后立即分离血清进行测定或-70℃保存。 2. ...

和光纯药工业株式会社 基因研究所 西部隆宏、吉居华子 前言 免疫沉淀法，是利用固相化在磁珠上的抗体与抗原（目的蛋白质）发生沉淀反应原理使蛋白分离、纯化。此方法不仅用于抗原蛋白质的纯化，还可以与抗原蛋白质相互作用，令蛋白质、核酸共沉淀，可应用于蛋白质间的相互作用、染色质免疫沉淀（Chromatin Immunoprecipitation: ChIP）、RNA免疫沉淀（RNA Immunopreci ...

为让中国用户能够更好的熟悉和掌握PeproTech的ELISA试剂盒及其技术，PeproTech专门制作了"ELISA操作指南视频 "，供各位老师和同学观摩！ 视频网址为 ：http://v.youku.com/v_show/id_XMzQ3Mzk3NTg4.html 或 http://www.tudou.com/programs/view/tzU8m93o0tI ...

一、实验目的： 单克隆抗体制备是细胞免疫学的一个重要里程碑，它涵盖了细胞培养、细胞融合、免疫动物和抗体效价检测等各个方面内容。了解单克隆抗体制备的原理、主要步骤和方法。 二、实验原理： 骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能 ...

0 0); text-decoration: none; " target="_blank"肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，受卫生条件的限制，我国目前难以进行大面积的人群普查与健康体检。因此，注重自身保健及认识本病早期症状的隐匿性，是争取治疗时机、尽可能接近根治的唯一方法。肝癌血清学检查就是诊断方法之一。 　　1、AFP：AFP是当前诊断肝细胞癌最特异的标志物。AFP是胎儿时期肝脏合成的一种胚胎 ...

不同类型抗体的保存指南，用以避免抗体污染或损伤 请不时核查数据表以获取特定保存建议。对于未正确保存的抗体，Abcam 不予保证。如果恰当保存和处理，大多数抗体应能保持活性数月乃至数年。

在细胞中，成熟的miRNA分子可与Argonaute(Ago)蛋白家族形成RNA沉默复合体(RISC)，降解靶mRNA或者抑制转录（图1）。在人类中普遍存在4种Ago蛋白（Ago1-Ago4），在Ago家族蛋白中表达最多的是Ago2，它具有Slicer活性，可切割其靶RNA，在microRNA调控路径中具有重要意义。针对这种Ago蛋白，利用抗体，经RISC免疫沉淀，即microRNA与靶mRNA共沉淀，由此可回收microRNA。

当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候，如何选择适合我们实验需要的抗体，并恰当保存使用，是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多，品牌众 多，技术参数不一，价格和质量更是相差甚大，如何购买到高质量价格合适的抗体，并准确地做出我们想要的结果，其中有很多细节需要注意。

比较间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法检测血清中抗ds-DNA抗体在系统红斑狼疮中的诊断价值 俞颖 范永升 温成平 王新苍 抗双链DNA (double-st randed DNA ，ds-DNA) 抗体主要见于系统性红斑狼疮( systemic lup userythe-matosus ，SLE) ，对诊断SLE有 ...

如今，单克隆抗体市场炙手可热。一方面，由于巨大的应用价值，单克隆抗体需求强劲。另一方面，单克隆抗体制备工艺复杂、周期长。为此，能否快速制备出高质量的单克隆抗体已成为影响抗体研究应用的关键。46天制备出高质量的单克隆抗体在几年前在京天成生物技术（北京）有限公司得以实现，从而使之在全球制备高质量单克隆抗体服务竞争中占极大优势。 单克隆抗体具有理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于 ...

甲亢是一种常见的免疫性疾病，在我国发病率约为1%，估计患者约有1300万，然而目前甲亢治疗效果并不理想，并发症常危及患者生命。近日一项新研究成果发现了甲亢治病新机理，这将帮助医生更早预测甲亢的发生。 由上海交通大学医学院附属瑞金医院医学基因组学国家重点实验室的宋怀东研究员与国家人类基因组南方研究中心的黄薇研究员等共同主持的课题组，利用多年积累的疾病相关样本，采用全基因组关联分析等最先进的基因组技 ...

美国科学家在8月8日出版的《美国国家科学院院刊》上撰文指出，他们最新发现了一种能识别30多种流感病毒菌株的人类广谱抗体，更多地了解这种抗体有助于科学家研制出长期有效的流感疫苗。 波士顿儿童医院的斯蒂芬·哈里森和同事在一名男性志愿者体内发现了这种名为CH65的中和抗体，其能黏附在流感病毒表面的血细胞凝集素蛋白质上，从而中和流感病毒的毒性，阻止病毒入侵人体细胞。 血细胞凝集素是流感病毒 ...

法国科学家在美国最新一期《科学转化医学》杂志上报告说，他们开发出一种能预防丙型肝炎的疫苗，动物实验显示这种疫苗有效。 目前世界上通用的丙肝疫苗都属于治疗性疫苗，还没有疫苗能起到预防丙肝的作用。与甲肝和乙肝不同，大多数人无法依靠自身的免疫系统清除丙肝病毒，这是因为丙肝病毒在受到人体免疫系统攻击后，会转为更强大的变种。 法国巴黎第六大学的科学家利用类病毒颗粒开发出一种丙肝疫苗。类病毒颗粒和病毒相似， ...

ELISPOT技术的独特优点已经让它在抗原特异性T细胞免疫学研究上独占鳌头。它是当今唯一能够检测到到百万分之一阳性细胞率的检测技术。如此高的灵敏度就连流式细胞技术（细胞内细胞因子染色）和tetramer技术也望尘莫及（Letsch A et. al.， 2003）。此外由于淋巴细胞的冻存复苏问题也得到了完美的解决，经过冻存复苏的细胞并不丧失免疫功能（Maecker HT et. al.， 200 ...

ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测，英文：Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术（即ELISA技术），能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理，一句话概括就是：用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来（Sedgwick JD 2005）。 该技术检测细胞因子具有三大优点：其一，灵敏度高。在一 ...