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研究发现免疫系统消灭病毒新机制

长期以来医学界认为,人体免疫系统对已进入细胞内部的病毒束手无策。但英国一项最新研究发现,一些抗体能够随病毒进入人体细胞内部,并在细胞内一种蛋白质的作用下引发摧毁病毒的连锁反应,这一发现将有助于研发新的抗病毒药物。  位于英国剑桥的分子生物学实验室等机构研究人员在新一期美国《国家科学院学报》上报告说,他们发现人体免疫系统生成的抗体在血液中遇到病毒后,会一直附着其上,即使一些病毒穿过细胞膜进入了人体细胞,抗体也仍然附着 ...

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早期诊断RA的重要指标--CCP抗体

一、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体是什么? 抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体是类风湿性关节炎患者体内中出现的针对瓜氨酸抗原的自身抗体,是早期诊断类风湿性关节炎(RA)的重要指标之一。 抗CCP抗体所针对的靶抗原是上皮细胞分化的终末阶段的细胞骨架成分Filaggrin上的主要抗原决定簇。目前用EL ISA检测法检测该抗体,实验中所采用的抗原是人工合成的CCP,它是由19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链中的2个丝氨酸替换为半胱氨酸而合成的。 二 ...

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肥达氏反应原理及结果判定

本法原理是以伤寒“O”,“H”;甲,乙,丙副伤寒分别培育,经甲醛处理杀死后,做成菌液供肥达氏应用,用以伤寒的辅助诊断。 根据凝集反应的强弱和有无,分别以4+,3+,2+,1+,-,记录,以呈现(2+)的血清最高稀释度为终点效价。 4+:液体清澈透明,菌体全部被凝成块,沉于管底。 3+:液体较透明,大部分菌体被凝集而沉于管底。 2+:液体稍透明,管底有少量凝集沉淀物。 1+:液体较混浊,可见极少量凝集物。 -:液体混浊,细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点(与对照管相似)。

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ELISA、IFA、RIA各自优缺点比较

近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。方法种类 比较指标ELISARIAIFA敏感性高高较低特异性取决于抗原制备同左较高重演性尚满意尚满意尚满意结果判断客观客观有主观因素抗原制备较容易 ...

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免疫球蛋白基因为何频繁变异

免疫球蛋白是球蛋白家族中的一员,是免疫系统中的淋巴球用于攻击外来物并保护人体的一种抗体分子,然而,与其他基因相比,负责编码免疫球蛋白的免疫球蛋白基因(Ig)更容易频繁发生变异,为什么呢?如今,研究人员们发现一些线索,可以解释Ig频繁发生变异的原因,新成果发表在12月在线出版的《自然—免疫学》期刊上。在一种活化诱导胞啶核苷脱氨酶(AID)的引导下,Ig基因被一种程序化变异过程高度多样化。尽管AID总是优先倾向于靶向Ig ...

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抗血清的鉴定保存

一、特异性抗体的鉴定 1.抗体特异性鉴定:常采用双向免疫扩散法。 2.抗体的效价的鉴定:常采用双向免疫扩散法。一是仅稀释抗血清,与同一浓度抗原反应;另一是抗血清、抗原同时稀释作棋盘滴定。 3.抗体的纯度鉴定:常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定。 二、抗血清的保存 动物血采集后,室温自然凝固后立即分离出血清,妥善保存。抗血清保存有三种方法: 第一种是4℃保存,通常可保存3个月~半年,效价高时可保存一年左右; 第二种是-20℃~-40℃低温保存,可保存5年 ...

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杂交瘤技术原理

单克隆是指利用在细胞融合基础上的B细胞杂交瘤技术。 杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即具有所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才能具有持续培养的能力,形成 ...

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J链和分泌片

(一)J链:J链可连接Ig单体形成二聚体、五聚体或多聚体。IgA由二硫键相互连接形成二聚体,单体IgM由二硫键相互连接,并通过二硫键与J链连接形成五聚体。   (二)分泌片:分泌片是分泌型IgA分子上的一个辅助成分,具有保护分泌型IgA的铰链区免受蛋白水解酶降解的作用,并介导IgA二聚体从粘膜下通过粘膜等细胞到粘膜表面的转运。   免疫球蛋白的功能   V区的功能:主要由Fab介导Ig单体为双价;sIgA为4价;IgM理论上为10价,但 ...

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甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法的建立

【摘要】 目的: 建立检测甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法. 方法: 采用双抗体异位点一步夹心法,以甲胎蛋白单克隆抗体作为固相包被,采用改良过碘酸钠法进行甲胎蛋白多克隆抗体与碱性磷酸酶偶联制备酶标抗体;以金刚烷胺衍生物CSPD作为底物,优化CSPD与SapphireII发光体系;用国家标准品校定定量标准品,建立了人血清AFP的化学发光免疫定量分析法. 用该法检测800份正常人血清,确定正常值参考范围,将临床血清标本100份与ba ...

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D-二聚体质控品的制备方法

D-二聚体测定是对DIC、原发性纤溶症、肺及静脉栓塞等疾病诊断、鉴别诊断及疗效观察的重要指标。在D-二聚体的测定过程中必须用室内质控品控制检测质量。目前国内应用的D-二聚体定量测定室内质控品均为国外进口产品,价格昂贵。我们创造性的利用凝血检测后剩余血浆,根据DIC发病机理,在体外试管中使其发生DIC样的反应,从而产生出大量的D-二聚体,并将其制成D-二聚体定量测定质控品,使成本降低近百倍。 一、材料 1.血浆:收集2004年 ...

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更好更快:如何提高快速床旁检测(POCT)

本文由柏芳编译;原文By Richard L. Egan博士,他是Nanogen公司(圣地亚哥)免疫检测开发部门的执行理事。其联系方式为regan@nanogen.com或者richardegan@cox.net 第三代侧向流动型床旁检测(POC)平台是对已建立的POC检测系统的再次设计研发。 今天大多数的侧向流动检测都是依赖的小孔色谱分析媒介来帮助液体型样本通过一个狭窄的三维空间,如硝化纤维膜。孔位型结合位点被置于分析物和检测试 ...

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HIV测定结果的判定方法

1、HIV测定(胶体金法)结果的判定方法(1)、阳性:出现两条或三条红线均为阳性反应。(2)、阴性:仅出现质控一条红线,则实验结果为阴性。(3)、无效:如无红线(或只有反应线)出现,表明实验无效,须重新检测。2、HIV测定(ELISA法)结果的判定方法(1)、计算临界值CO(cut-off)值。(2)、临界值=阴性对照A均值+0.12(3)、正常情况下,阴性对照孔的OD值≤0.10(若1孔阴性对照的OD值>0.1应舍弃,若有2孔或2孔以上阴性对 ...

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免疫学的应用与前景

(一)应用1、在医学中的应用免疫学的发展及其向医学各学科的渗透,产生了许多免疫学分支学科和交叉学科1)免疫学的纵向发展:由单一层次发展到多层次,群体免疫学、个体免疫学、细胞免疫学、分子免疫学、原子免疫学。2)免疫学的横向发展:由单一学科发展成多分支多边缘的学科免疫化学、免疫生物学、免疫生理学、免疫病理学、免疫遗传学、免疫血清学、分子免疫学、免疫组织学、免疫药理学、免疫毒理学、临床免疫学、免疫血液学、移植免疫学、肿瘤免疫学、 ...

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全自动加样系统造成ELISA实验拖带现象分析

作者:李荣 作者单位:(广西玉林市中心血站,广西 玉林) 【摘要】 目的通过对血液标本使用全自动加样系统在酶联免疫吸附测定(ELISA)实验中出  现的拖带现象进行分析,寻求有效的解决拖带现象的方法。方法用Freedom EVO Clinical和ML-STAR全自动加样系统加样,对ELISA实验出现拖带阳性的标本,采取手工加样用原试剂盒进行双孔复试,比较两种加样方法的检测结果。结果经手工加样ELISA双孔复检,结果均为阴性,证实为拖带阳性。结 ...

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血清前列腺特异性抗原与蛋白酶抑制剂复合体的检测

前列腺癌患者血清中前列腺特异性抗原的主要是由前列腺抗原与a1抗凝乳蛋白酶组成,此复合物的检测能显著提高临床癌症检测的敏感性。 PSA检测在临床中已经开展了很多年,但是在临床工作中我们遇到一个问题:2个标本稀释后不能得到与临床诊断相符合的结果。为了解释清楚这个现象,我们把标本做了电泳检测,发现主要的PSA的条带的分子量在90KD左右,而不是通常认为的30KD。因为PSA是一种蛋白酶,所以我们假设这90KD的条带是 ...

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适应性免疫在丙型肝炎病毒持续感染中的作用

【关键词】 丙型肝炎病毒 适应性免疫 细胞免疫反应 体液免疫反应 逃逸突变 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)是一种黄病毒属的单股正链嗜肝RNA病毒, 是引起慢性肝病的主要病原体。机体在抗HCV感染免疫过程中, 固有免疫(innate immunity)与适应性免疫(adaptive immunity)相互依赖, 互相协作。固有免疫通过诱生各类干扰素、激活NK细胞, 在病毒感染早期限制病毒迅速繁殖与扩散, 并经内源性和外源性途径启动适应性免疫应答, 但很 ...

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细胞凋亡的几种检测方法

一、形态学观察方法   1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。   2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。   3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性, ...

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探讨两种方法检测HBsAg假阳性和假阴性的影响因素

目前HBsAg的检测方法很多,但是在临床实验室检测HBsAg的方法最常用的主要是金标法和酶联免疫吸附试验(ELISA)。常常会有患者及其他工作人员反映HBsAg检验结果与其他医疗单位不一致,为此常会发生医疗纠纷。因此,提高HBsAg检测的准确性,避免假阳性和假阴性所造成的不良社会影响,是我们临床检验工作者应该重视的问题。 为了减少HBsAg检测出现假阳性和假阴性,我们有必要对这种现象的原因进行分析,在实际的检测工 ...

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肿瘤特异性生长因子(TSGF)的检测临床应用

肿瘤特异性生长因子(TSGF)的检测,是一种较为灵敏的肿瘤检测方法,具有简便快速的特点,可提高肿瘤的检测结果,并可对单病种进行检测,具有早期性、广谱性。因此,TSGF具有恶性肿瘤的高度特异性。TSGF与以往的各种肿瘤标志物之间不存在相关关系,它是一种独立的物质,是一种新的肿瘤标志物。对多种肿瘤TSGF均呈阳性,在肿瘤的早期, TSGF即可出现增高。因此, TSGF是一种较为敏感的、广谱的肿瘤标志物。 其又称为:促血管生成素-2 (An ...

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人附睾上皮分泌蛋白4(HE4)在卵巢癌诊断中的价值

2003年Hellstrom等通过酶免疫法(ELASA)法分别检测了37例卵巢癌患者,19例良性卵巢疾病和65例健康妇女的血清中HE4和CA125的水平,以健康妇女为对照,两者的灵敏度无明显差异;良性卵巢疾病患者作为对照时,在高特异度(100%)下,HE4的灵敏度(60%)要显著高于CA125的灵敏度(13%),证实卵巢良、恶性肿瘤的鉴别方面其假阳性率要低于CA125,有显著性差异,推测HE4在鉴别良恶性肿瘤方面有重 ...

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