免疫学技术

相关专题 补体介导的细胞毒试验(Complement Mediated Cytotoxicity Test)是指特异性抗体与细胞膜上相应抗原结合后在补体的参与下可产生细胞膜损伤细胞死亡;不带相应抗原的细胞仍然存活.利用染料排斥实验判定淋巴细胞死活状态活细胞不着色具有折光性大小也正常.死细胞着色体积增大。 一、实验原理 带有特异抗原的靶细胞( ...

相关专题 针对旧方法的不足，SDIX公司研发出新方法可生产针对MMP胞外区域的高性能抗体。 新方法可生产针对MMP胞外区域的高性能抗体 抗体药物作为生物技术产业的关键驱动力，能安全有效地对癌症、自身免疫病和感染性疾病等进行靶向治疗，该药物在2012年创下全球645.7亿美元的销售额，占生物制药51.8%的份额。目前抗体药物的市场需求量仍在 ...

疾病简介 原发性膜性肾小球肾炎（MGN ，pMGN）也被称为特发性膜性肾病（IMN），是最常见的以肾病综合征为特点的肾脏疾病，可见于所有的种族和性别，更易出现在40岁以上的男性患者，怀疑患IMN的年轻女性，应考虑其是否患有狼疮肾炎。国内IMN发病率约占原发性肾小球疾病的9.9%～13.5%，居IgA肾病、系膜增生性肾小球肾炎之后，列第三位。随着蛋白尿的增加，IMN患者的肾衰竭发病率及死亡率风险也 ...

第一次作ELISA，真简单，偶暗想。第二次做，咿，结果差别这么大（同一份标本）怎么还有跳孔。第三次，决定做的认真一些，争取作到同一份标本，做两到三次，板间无差异，发觉很难。原来ELISA 也这么讲究。看看ELISA的注意事项吧：（一）加样在ELISA中除了包被外，一般需进行4－5次加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性，例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使每滴 ...

金庸版 但见超净台前是一对少年男女，男子容貌清俊，一身白衣胜雪；少女同是白衣紧身，身段好似嫩枝初发，不胜婀娜，面上笼了一层浅蓝色的柔纱，若隐若现，隐约看见琼鼻檀口，无法窥见全貌，乌黑的刘海下，双眼水波流动，仿佛对人言语。 “师妹！”少年男子开口道，“你这一式天山折梅手已越发纯熟了。” “师兄骗人，明明力量有余，巧劲不足， ...

　　（一）BCR复合物 　　B细胞抗原受体（B cell receptorBCR)复合物至少由四种不同的多肽链组成，抗原结合部位是由重链和轻链构成的膜表面Ig的四链结构，此外，在BCR中还含有Igα和Igβ两种多肽链，最近在白细胞分化抗原国际专题讨论会中分别命名为CD79a和CD79b。在人类B细胞，与mIgM相关的Igα和Igβ分别为47kDa和37k ...

（1） 原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标 ...

关于免疫印迹法（western blot） 原理：通过电泳区分不同的组分，并转移至固相支持物，通过特异性试剂（抗体）作为探针，对靶物质进行检测，蛋白质的Western印迹技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种特点，可检测到低至1～5ng（最低可到10－100pg）中等大小的靶蛋白。一、抗原的选择和制备 A：样品的制备 1组织： 组织的处理方法：组织洗涤后加入3倍体积预冷的PBS ...

ELISA即酶联免疫吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定，并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是：①使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；②使抗原（或抗体）与某种酶联结成酶标抗原（或抗体），而且此酶标抗原（或抗体） ...

一 免疫组化（ LP 法）操作步骤 ：1． 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ， 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。（注：孵 ...

一　PI单染色法 基本原理 　　其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面： 1. 细胞核的改变：由 ...

流式细胞分析（Flow cytometry，FCM）是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术，它具有如下几个特点：①标本只要是单细胞即可用于分析，如血液、骨髓、体液中的细胞、培养细胞等，实体组织只要经处理后制成单细胞悬液也能 ...

酶联免疫吸附实验材料，试剂，溶液 1．酶标板，100μltip头，1ml Ep管，湿盒2．包被稀释液（0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠bufferpH 9.6）碳酸钠0.15g碳酸氢钠0.29g叠氮钠0.02g加双蒸水至100ml调至pH 9.63.封闭液(5%小牛血清/PBS溶液) 小牛血清5ml undefinedPBS(pH 7.4)95ml4.洗涤液(PBST pH ...

1 . 取材 取材的好坏，直接影响切片的质量。医生在取材时，首先要有一把锋利的取材刀，在切割组织时要避免取材刀来回拖拉，切取的组织块厚薄要均匀，一般厚度以0.2 ～0.3cm为适，较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点，而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些；淋巴结应修掉两侧球冠，并尽量剔除周围的脂肪组织。在取材中还应十 ...

Western，也称Western blot、Western blotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。Western可以参考如下步骤进行操作。 1.收集蛋白样品(Protein sample preparation) Ø 可以使用适当的裂解液，例如碧云天生产的Western及IP细胞裂解液(P0013)、RIPA裂解液等，裂解贴壁细胞、悬浮细胞或组织 样品。对于某些特 ...

1．抗原的处理与小鼠腹水粗抗体的收集现在以B亚基的抗体制备为例说明：取2mg的蛋白，溶于100µl的10％SDS中，加入等体积的上样缓冲液，沸水浴3min，进行SDS－PAGE。将胶的两边缘切带染色，脱色后在相应的位置从分离胶上切下未染色目的蛋白带，无菌水洗涤，用匀浆器匀浆后，再在2～5mM的PBS中透析5h以上，冷干。将冷干的样品用500～800µl 的2mM～5mM的PBS溶解（得到体积约60 ...

由于免疫组织化学技术具有特异性强、灵敏度高及能将形态研究与功能、代谢研究有机地结合在一起的显著特点，所以，这门新技术从一诞生起就显示出了强大的生命力和广阔的应用前景。此方法经不断改进和发展已日趋成熟，应用范围逐渐扩大。目前已有近十种技术方法及几百种标记抗体，技术方法逐步规范化，标记抗体逐步商品化，现今它已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域，取得了令人瞩目的成就。一、免疫组织化学技术的原理和应 ...

摘要目的］以环氧合酶2为例，具体介绍本实验室常用的免疫印迹法，并明确实验操作中应注重的细节。［方法］总蛋白抽提及定量、SDSPAGE、半干转印、特异性抗体结合及ECL检测。［结果］采用本法操作简便，有很好的重复性，本实验室多次成功运用于COX2蛋白的检测。［结论］此法在本实验室多次运用，可靠、重复性强，明细实验操作细节更有利于初学者顺利地开展实验，值得应用与推广。关键词环氧合酶免疫印迹法免疫 ...

检测细胞因子对阐明机体免疫应答及其调节机制、免疫相关疾病的发生、发展规律和知道临床治疗均具有重要意义。细胞因子的检测主要分为免疫学、生物学和分子生物学三种检测方法。免疫学方法主要采用双位点ELISA法定量检测细胞因子，分子生物学方法主要检测细胞因子mRNA表达水平。本部分只介绍生物学方法检测细胞因子活性，其原理是根据细胞因子对特定的依赖性细胞株（即靶细胞）的促增殖作用，以增殖细胞中的DNA合成或酶 ...

凝血酶原是由肝脏合成的依赖维生素K的凝血因子。异常凝血酶原(Abnormal ProthrombinAPT)和凝血酶原的化学结构极其相似，区别在于：APT分子氨基端的特定位置上的谷氨酸残基未经羧基化，因而缺乏结合钙离子的结构基础，在一般凝血试验中无凝血活性。自从1984年Liebman等观察到原发性肝癌患者血浆APT水平显著升高，APT与肝癌的关系受到关注，其临床应用价值受到重视，测定方法不断改进 ...