免疫学技术

相关专题 Interleukin-6 (IL-6) is a cytokine that provokes a broad range of Cellular and physiological responses. In addition to playing a role in inflammation and hematopoies ...

相关专题 实验目的 1.了解sIL-2R检测的基本原理 2.掌握sIL-2R检测的方法的临床意义。 实验原理 sIL-2R可与细胞膜表面的受体(IL-2R)竞争结合IL-2，从而成为一种免疫抑制物质。在正常人血清和尿液中可检出低水平的sIL-2R，在某些疾病发生时如器官移植、排斥反应、病毒性感染、恶性肿瘤、创伤和自身免疫病等，sIL-2R在 ...

相关专题 抗体标记主要有酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记等，还有一些其他的标记方法例如金标记，本文主要讲述了这些抗体标记的基本原理、操作步骤。 一、酶标记 1、辣根过氧化物酶(HRP)标记 辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基用过碘酸钠氧化成醛基，加入抗体IgG后该醛基与IgG氨 ...

相关专题 电子显微镜下的神奇世界 免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上，相继发展了杂交抗体技术、铁蛋 ...

相关专题 免疫球蛋白分离的方法很多，IgG分离纯化时多采用离子交换法，本文就采用SPA-sepharose cl-4b 亲合层析法分离纯化IgG的原理、试剂、操作步骤以及注意事项进行了总结。 一、原理 葡萄球菌a蛋白(SPA)具有与多种哺乳动物IgG分子fc段结合的能力，并与不同IgG亚类的结合力有所差别。改变pH及离子强度可洗脱结合于SP ...

相关专题 一、材料和试剂 1、玻片：须用免疫组化专用玻片，或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。 2、5-10%正常山羊血清封闭液，用PBS配。 3、3%牛血清白蛋白(BSA)，用PBS配。 4、0.01M pH7.4 PBS 5、1% BSA-PBS(含0.05% Tween20) 6、AEC底物 (1)底物缓冲液(20X) PH 4.6 醋酸 ...

相关专题 一、流式细胞仪的检测范围 1、流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。 2、流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。 二、流式细胞仪的临床应用 1、流式细胞术 ...

相关专题 实验室的CT-流式细胞仪 流式细胞仪(flow cytometer，FCM)是进行流式细胞分析的仪器，它集电子技术、计算机技术、激光技术、流体理论、细胞荧光化学技术及单克隆抗体技术于一体，被誉为实验室的“CT”。 流式细胞术则是一种在功能水平上对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析和分选的检测技术，它可以高速分析上万个细 ...

相关专题 实验室的CT-流式细胞仪 细胞凋亡的检测方法众多，流式细胞仪检测凋亡，是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此，具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。 下面是一幅凋亡过程图。在凋亡诱导剂的作用下，首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体，线粒体的功能发生 ...

相关专题 实验室的CT-流式细胞仪 第一张是未转染的第12代，第二章是转染后的第22代。 第一张图：增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期)：21.7% 第二张图：增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期)：19.6% 据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比第一张图的S期有所增高，但G2期下降了。 细胞周期是基于细胞 ...

相关专题 实验室的CT-流式细胞仪 一、简介 随着研究的进展，仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析(limiting dilution analysis， ...

相关专题 实验室的CT-流式细胞仪 一、基本原理 经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞，而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色，且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据细胞膜 ...

相关专题 实验室的CT-流式细胞仪 一、基本原理 流式细胞仪检测细胞凋亡：PI单染色法其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面： 1、细胞核的改变 由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光 ...

相关专题 实验室的CT-流式细胞仪 一、开机程序 1、检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。 2、 打开储液箱，倒掉废液， 并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满(一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFlow)，合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。 3、将FACSCalibu ...

相关专题 &NBSp; 1、4%多聚甲醛常规灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液(4℃)过夜，蜡块制作，切片，贴片。0.01M PBS清洗5min×3次; 2、脱蜡、水化：用二甲苯两次10min，用梯度乙醇由低浓度到高浓度进行水化; 3、加入0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01M PBS 100ml+30%过氧化氢)30min，以 ...

相关专题 德国美天妮公司的MACS技术已成为细胞分选实验中不可绕开的实验方法，MACS技术几乎可在每一个细胞实验室中占据一席之地。那么，了解美天妮公司的MACS技术的技术原理和优点，及其分选策略该从哪方面入手呢? MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞， ...

相关专题 1966年，Nakane等人首次用酶代替标记抗体，之后Sternbenger等成功引入非标记抗体，使得免疫酶法得到长足的发展，并成为应用最广泛的免疫组化技术。下面将介绍免疫酶法的优点以及实验方法等内容。 免疫酶法是借助酶细胞化学等手段显示组织抗原(或抗体)的新技术，是在免疫荧光法的基础上发展起来的。免疫酶法的基本原理与免疫荧光法有 ...

相关专题 MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4，5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3，5-di- phenytetrazoliumromide， MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色 ...

相关专题 抗原实验技术及研究进展 用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片：1)抗原热修复 可根据实验室的具体条件，选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液，如TBS、PBS、重金属盐溶液等，但实验证明，以0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液(粉剂 ...

相关专题 抗原实验技术及研究进展 (一)为什么要进行抗原修复? 组织在制作过程中，由于化学试剂的作用封闭了抗原，又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲，致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来，为了解决上述的问题，利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。 在免疫组化染色后的镜下观察中，有发现这样的结果，阳 ...