免疫学技术

http://www.3i.com.cn/article/08.htmThe place of gold in rapid tests(胶体金在快速检测中的地位)Originally Published March 2000John Chandler, Tracey Gurmin, and Nicola Robinson发布者：派坤学苑 （bbs.3i.com.cn)发布时间：2006-5-11--------------------------------------------------------------------------------Sup ...

为了使生产抗体获得最佳效果，仔细地设计抗原多肽是很有必要的，设计应满足一个基本条件：在免疫过程中，该抗原既不会产生过强的免疫反应，同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。尽管抗原设计是一个很复杂的课题，有诸多需要注意的细节，已超过了我们所能提供的范围，根据我们所积累的经验，有几点关键的基本设计原则可以提供给大家参考：1、确定抗体的用途（应用）新开展一个研究项目，弄清楚所感兴趣的蛋白的一些基本特性是很有必要的 ...

免疫检测法 抗体制备技术　 抗体（antibody，Ab）是机体免疫系统受到抗原刺激后产生的特异性球蛋白，称免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。根据其重链稳定区的分子结构和抗原性的不同，可将为类Ig分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大类。由遗传基因决定所产生的抗体，称天然抗体（natural antibody），由抗原激发免疫细胞产生的抗体，称免疫抗体（immune antibody）或称特异地性抗体。人工制 ...

本人利用该方法制备了高效价的多克隆抗体，与大家分享！AnimalsHealthy male New Zealand rabbits aged 3-6 months (body weight ~ 2.5 kg) lived in animal house at least for 3-4 days for adapting to the new circumstance.Polyclonal antisera productionSample A: Emulsify your aimed protein 200-300 mg in PBS with same volu ...

一．开机程序1．检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。2．打开储液箱，倒掉废液, 并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFlow），合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。3．将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY，预热5－10分钟。排出过滤器内的气泡。4．如果需要打印，打开打印机电源。5． ...

单克隆抗体制备技术Burnef（1957）细胞系群选择学说（clonal selection theory）认为，每一个淋巴细胞只具备单一的受体特异性，受到刺激后，只能产生一种针对其可识别的抗原决定簇的抗体；抗体的多样性是由机体遗传存在着能与众多抗原决定簇起反应的淋巴细胞系而决定的；一个祖先抗体形成细胞分裂繁殖而成的细胞系（克隆clone或无性繁殖细胞系）产生的抗体具有完全相同的分子结构和性状；从一个克隆细胞系产生的 ...

多少个香港铜锣湾，才够满足我的潮流控；多少个抗体网站，才够帮我找到品牌抗体？上丁香通（www.biomart.cn），一站帮你搞定！继丁香通ATCC细胞库发布之后两个月，丁香通第一期品牌抗体库正式发布。本次抗体库收集了Abnova、Abcam、CST、santacruze四个一线品牌的抗体库数据，并且可以通过“适用物种”、“应用范围”、“抗体来源”、“是否单克隆”等维度进行深入搜索，以下为使用示意流程。1、输入关键词，比如搜索“ ...

免疫胶体金技术的基本原理胶体金是一种常用的标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。　　1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra- ...

一、抗血清的制备　　有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。　　（一）用于免疫的动物　　作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为/// ...

免疫细胞化学技术交流Immunochemistry Protocols: ImmunofluorescenceStep 1Rinse cells attached to cover slips twice with PBS, removing liquid by gentle aspiration in this and subsequent steps.Step 2Fixation & permeabilization:Option I:Fix cells with 4% formaldehyde in PBS for 6 min at ro ...

对于一个给定的抗原，最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力，以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外，更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行的斑点印迹的操作方法。注：所有的抗体稀释度假定起始浓度为1 mg/mL。1. 用TBS和PBS稀释的蛋白样品，好的稀释方法是由样品中的抗原稀释浓度决定的，但是由于抗原 ...

蓝色 {color: #00F;}接上一期 师兄精选：免疫组化菜鸟攻略（一），本期我们再聊聊免疫组化（我比较随性，想到哪写到哪）首先，先介绍下免疫组化一般操作流程：1. 石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS(PH7.4)冲洗三次，每次5分钟。2. 根据每一种抗体的要求，对组织抗原进行相应的修复。修复方式：我采用压力锅进行抗原修复，取一定量的修复液于压力锅中，加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于不锈钢或耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，盖 上锅盖 ...

优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点（珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，须严格遵照规程操作）。标本的采取和保存通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的，如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆 ...

免疫组化是一门比较传统的技术，国外杂志对免疫组化还很重视，今天师兄就先跟你们简单侃侃，侃的不好，勿喷哈。基础知识免疫组织化学( immunohistochemistry )又称免疫细胞化学( immunocytochemistry )，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜（包 ...

天热了，心情难免烦躁一些。这一来WB也出鬼了，胶片上不时的出现极高的背景，整张膜上都是黑的，看上去好像是在墙壁上泼墨后留下的污渍似的。跑胶的问题？转膜？显影？……？重复……重复，重复……重复，重复，重复……直到某天早上我咬牙切齿的盯着那几条蓝色的带往下跑的时候，蓦然发现：浓缩胶漏了！从某个梳孔的角落处，溴酚蓝正直接穿过浓缩胶，进入浓缩胶和分离胶的交界处，并顺着交界线平展开来，渗透到整个交界线上。显然这将直接导致样品在整个膜里 ...

1、 丙烯酰胺和N，N’-亚甲双丙烯酰胺，应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N，N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g，N，N-亚甲叉双丙稀酰胺1g，加H2O至100ml。)储于棕色瓶，4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。如有沉淀，可以过滤。2、 十二烷基硫酸钠SDS溶液：10%(w/v)0.1gSDS ...

1、石蜡切片和冰冻切片的比较？（1）要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。（2）冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散；切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮。 ...

免疫荧光是标记免疫技术发展最早的一种，它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术，通过将抗体与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括，细胞固定和通透，封闭，孵育一抗，二抗等。除了这些基本步骤，以下建议可以帮助您获得更好的实验结果。 1、细胞固定和通透 为达到最佳的检测效果，细胞需要经过固定和通透。这些步骤非常关键，细胞和抗原需要保证最佳的结构，并利于抗体与抗原 ...

1 降钙素原降钙素原(PCT)是降钙素(Calcltonin，CT)的前体，主要在甲状腺滤泡旁细胞内合成，是由116个氨基酸组成的糖蛋白，分子量大约13KD。它可以在酶的作用下逐步裂解成57个氨基酸的氨基PCT，32个氨基酸的CT和21个氨基酸的降钙蛋白。降钙素原检测是一种评价细菌感染的最新替代指标，是用于细菌感染/脓毒症鉴别诊断、严重程度判断、治疗监测、预后评估及抗生素管理使用的具有创新意义的诊断指标。 2 降钙素原的临床 ...

讲者瑞士巴塞尔大学医院菲利普·许茨（PhilippSchuetz） 在面对不同症状的患者时，无论其是否存在感染、存在细菌还是病毒感染，我们必须要考虑的问题是，这个患者是否需要抗生素治疗，须治疗多长时间？对于肺炎患者，有研究显示，延迟抗生素治疗会降低患者生存率，且延迟时间越长，患者生存率越低。而过度使用抗生素又将会导致细菌耐药性增加。因此，必须找到治疗平衡点，既要保证足够的治疗，又不过度。 降钙素原（PCT）是降钙素前体，正常情 ...