免疫学技术

一、标本制作　　可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。　　二、荧光抗体染色方法　　（一）直接法　　1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），在室温或37℃染色30min，切片置入能保持潮湿的染色盒内，防止干燥。　　2．洗片 　倾去存留的荧光抗体，将切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗两次，搅拌，每次5min，再用蒸馏水洗1m ...

这是我以前翻译的一外文综述，外文现在找不到了，拿出来大家看看，是否有用“抗肿瘤特异性抗原预防接种方法的设计和评价”抗肿瘤特异性抗原预防接种方法的设计和评价我们通过对临床前期小鼠模型的研究，对癌症患者应用肿瘤特异性接种的效果和安全性做出评价。第一批临床实验显示接种的方法是安全的，然而临床应答特别是由疫苗引起的免疫应答仍然缺乏。实际上很多实验到目前为止完成晚期癌症患者的很少，患者期待着抗肿瘤疫苗 的巨大功效。另外在 ...

1The role of T-cell receptor recognition of peptide:MHC complexes in the formation and activity of Foxp3(+) regulatory T cells.2Regulatory cells in health and disease.3Homeostasis and function of regulatory T cells (Tregs) in vivo: lessons from TCR-transgenic Tregs.4Regulatory T- ...

HIV分子免疫学（PDF格式）电子书下载IntroductionTable of ContentsPrefaceHIV-1, HIV-2, and SIV Genome MapHIV/SIV ProteinsCommon Abbreviations used in this databsePart I. Review ArticlesThe Evolving Field of HIV CTL Epitope Mapping: New Approaches to the Identification of Novel Epito ...

不错的抗原修复方法，大家共享。Proteolytic antigen retrieval using TrypsinReagents:Calcium Chloride 0.1gTrypsin (Sigma Type II) 0.1gDistilled Water 100 mlSodium Hydroxide (0.1 M)Method:1.Dissolve calcium chloride in distilled water and pH to 7.8 with sodium hydroxide. Store at 37oC.2. D ...

　　完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；（3）酶的底物；（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定　　　中）；（5）结合物及标本的稀释液；（6）洗涤液；（7）酶反应终止液。3.1　免疫吸附剂　　已包被抗原或抗体的固相载体在低温（2~8℃）干燥的条件下一般可保存6个月。有些不完整的试盒，仅供应包被用抗原或抗体，检测人员需自行包被。以下简述固相载 ...

北京基谱生物科技有限公司技术服务SOP文件ELISA取样及运输注意事项一、血清提取方法：1.全血促凝管取血，轻轻颠倒两三次，放置片刻让全血凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。2.全血普通EP管取血，室温放置2h左右，让其凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。特别注意：取血清避免震荡，以防止溶血，溶血会对结果有影响。二、样本取量及运输每个指标做单孔检测，一个样本需取血清30ul，3个复孔需90 ul ...

1 起源与发展：1983年, Czerki8Dnsky；Sedgwick and Holt:计数 B cells1988年，Czerkinsky: T cell IFN-r1988年，Czerkinsky：双色标记（Dual-Color）1993年，第一台ELISPOT自动分析仪：德国Leica96-97年，出现了新的ELISPOT分析仪2 ELISPOT 和 ELISA的区别：ELISA 回答 “how much”,而ELISPOT回答“What freqency”ELISA是 ...

载脂蛋白抗体的制备　　抗原免疫动物产生的抗体是血清γ-球蛋白的一部分。抗体的理化性质及结构与γ-球蛋白相近似。γ-球蛋白是一组结构相似，但又有差异的蛋白质，通称为免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig），按其结构和免疫化学性质的差异，又可分为五类，分别称为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。载脂蛋白抗体以IgG最为稳定。因载脂蛋白的体液中含量不同以及分离纯化的难易的差别，可分别采用多克隆抗体制备法和单克隆抗体 ...

免疫胶体金稀释液的配伍原则（前面我一个回帖成此文，发现太长了，不发新帖可惜，呵呵）制备好免疫胶体金后，还需要将其稀释到一定浓度，并吸附于特殊的惰性介质中才能够最终制成产品。一般来说，特殊的介质常用的是玻璃纤维或无纺布。玻璃纤维和无纺布本身一般是疏水的，胶体金产业一般采用表面活性剂预处理过的玻璃纤维或无纺布，通常配方为1%Tween20+适量PVA。介质处理完成后，免疫胶体金稀释液的配伍才是最关键的。现总结原则如下， ...

嗜中性粒细胞是一种常见类型的血液白细胞，它不但会对微生物感染做出反应，而且它还会对由例如创伤或器官坏死所引起的无菌性损伤做出反应。在 2010 年 10 月 15 日刊《科学》杂志中的一项研究中， McDonald 等人描述了应用体内动态成像技术来调查嗜中性粒细胞被损伤组织招募的基础机制。经过一个多步骤的级联分子反应事件（它以濒死细胞所释放的 ATP 作为开始，它还涉及到某驱化因子梯度及线粒体信号肽的形成），循环中的嗜中性粒细胞通过血管内渠道被快 ...

间接凝集反应l 间接血凝反应致敏红细胞的制备：直接法：1．取10%双醛固定的红细胞悬液1ml，离心沉淀后，将压积细胞悬于0.1mol/L、pH4.0醋酸缓冲液5ml中。2．预温后加含适量致敏抗体的醋酸缓冲液5ml，混匀，放37℃20~30min或24℃ 60~75min，其间摇动数次，但不宜剧烈和频繁摇动，以免引起自凝。3．最后用0.11mol、pH7.2 PB洗3次。4．洗涤后的致敏红细胞用保存液配成10%悬液4℃保存或冻干。临用前，用实 ...

哈佛大学David R Liu实验室利用体外筛选和高通量测序检测CRISPR/Cas9的脱靶，针对CLTA基因的四个不同靶位点共设计了八条不同序列的gRNA，即每个靶位点有两条gRNA，结果发现，四个靶位点均存在脱靶现象，脱靶效率最高可达84%，同时CRISPR/Cas9的特异性仅与gRNA配对的靠近PAM处7-12bp碱基相关，CRISPR/Cas9存在严重的脱靶效应。该研究成果发表在《Nature Biotechnol ...

单克隆抗体的制备过程单克隆抗体在现代生物医学中的作用越来越大，它不仅被广泛应用于生化和免疫检测，而且治疗癌症和自体免疫疾病的单抗药物也逐渐批准上市。因此单抗的制备和筛选具有其内在的重要性。动物免疫取4只6周龄雌性BALB/c小鼠皮下注射抗原（20 μg/只），第一次免疫与等量弗氏完全佐剂乳化，0.2 mL/只；两周后进行第二次免疫，抗原与等量弗氏不完全佐剂乳化，皮下注射，0.2 mL/只；两周后进行第三次免疫，免疫方法及剂量同第 ...

制备好免疫胶体金后，还需要将其稀释到一定浓度，并吸附于特殊的惰性介质中才能够最终制成产品。一般来说，特殊的介质常用的是玻璃纤维或无纺布。玻璃纤维和无纺布本身一般是疏水的，胶体金产业一般采用表面活性剂预处理过的玻璃纤维或无纺布，通常配方为1%Tween20+适量PVA。介质处理完成后，免疫胶体金稀释液的配伍才是最关键的。现总结原则如下，不足之处欢迎批评或补充。1 合适的离子种类和强度免疫胶体金毕竟是含有生物活性分子， ...

最近在学习免疫荧光技术，总结方法如下。免疫荧光非特异性染色的消除方法一、非特异性染色的主要因素　　组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点：　　（1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。　　（2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。　　（3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如Forssman氏抗原），可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。　　（ ...

看过不少此类文章,做免疫组化过程中遇到困难看看这篇文章,也许很有帮助!影响免疫组化的因素及对策（一）免疫组化染色假阳性及其对策1 、消除内源酶的影响 在涉及免疫过氧化酶的各种染色中，均用过氧化物酶来标记抗体，酶的作用是催化底物，使显色剂显色，正常组织中也含有一定量的过氧化物酶，其同样也能催化底物显色，而影响免疫组化染色的特异性，因此在加入标记酶前应设法将其灭活，以保证染色反应的特异性。通常情况下，去除内源酶的方法是先用 3% ...

今天看到的，希望对大家有用:)http://www.ihcworld.com/protocols.htm例如其中的：ImmunohistochemistryImmunochemical Staining Methods (Handbook) (Dako)Nordic Immunohistochemical Quality ControlImmunohistochemistry Protocols (Columbia University)A Guide to t ...

介绍几个实用的查找试剂的网站及进口品牌试剂的网址，供战友们参考~常用进口品牌试剂的网址如下：德国罗氏： https://www.roche-applied-science.com美国GE : http://www.gelifesciences.com英国abcam : http://www.abcam.cnR&D Systems:http://www.rndsystemschina.com.cnSIGMA : http://www.sigmaaldrich.co ...

4月11日至4月20日无人应助贴1【求助】冰冻切片免疫组化http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=8841567&sty=1&tpg=3&age=02【求助】冰冻切片免疫组化http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=8841546&sty=1&tpg=3&age=03【求助】请支着http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=8 ...