摘要: 目的 探讨脑微血管内皮细胞的体外培养方法并进行细胞超微结构研究及组织型纤溶酶原激活物(TPA ) 活性测定。 方法 取新生小鼠脑组织 通过匀浆、过筛、胶原酶消化、差速粘附等技术对鼠脑微血管内皮细胞进行原代培养 待细胞铺满瓶底时 用01125%胰酶20102%EDTA 消化 离心收集内皮细胞 进行传代培养。原代、传代各取8 例 吸取培养液用酶联免疫吸附试验测试TPA 活性。 结果 经&ET ...
一、明胶铺被 1、问;我曾经常识过高压与过滤两种方法。其中高压之后的明胶,即使放4℃冰箱仍很澄清,这是不是明胶变性?你觉得高压可靠吗?明胶里是蛋白与氨基酸能耐住这么高的温度吗?另外,明胶在37℃水浴溶解澄清后,过滤仍不易通过(每50ml大约可滤到30ml),而且过滤后的明胶再放到4℃就又变为胶冻状,经37℃水浴澄清后铺瓶。这样反复三次,发现我的明胶有些浑浊,不知什么原因,是不是这样的反复水浴对明胶 ...
选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考: (1) 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。 (2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。 (3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。 (4) 用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率 ...
实验室常用细胞株简介 细胞株名称ATCC 编号细胞来源细胞种类生长状态使用培养基 293CRL-1573人胎肾贴壁、上皮样MEM/NEAA,10%FBS 2215无人肝癌贴壁、上皮样DMEM,15%FBS 127TAg& ...
巨噬细胞培养 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获恶性,培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能,易于传代和瓶壁分离,但难以建株。 培养巨噬 ...
丁香园网友xxxdada的观点为: 1、我取脑的时候是用双镊,先用一把夹住头部,另一把在人状缝下面撕开,要特别小心,别弄出血来,因为出血的话取出的脑组织含血块就会比较多,离心的时候可以看出来,不知各位同仁有没有更好的方法。 2、尽量去除脑膜和血管,PBS清洗干净,胰酶消化37度10-15分钟消化中止按每10ml胰酶加1ml血清。 3、玻璃培养瓶差速30-40min过滤75-100um滤网,种植,其 ...
丁香园网友clellwei的观点为: 原代椎间盘细胞培养其实并不太难,但培养时间相对较长,所以容易出问题。 1、选材很关键 选用胎儿椎间盘进行原代培养相对容易一些,可利用反复传代的方法来制作退变模型。直接选择人退变椎间盘进行培养时(一般选择手术摘除的椎间盘),患者的年龄及间盘的退变情况必须充分考虑在内。若年龄偏大,间盘退变很严重,培养的难度相应增大。20-50岁之间的患者都可采用。如果实验需要进行 ...
第一章细胞培养的基本原理与技术 现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO细胞作为载体;细胞工程中更是离不细胞培养,杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来 ...
前言动物细胞培养开始于本世纪初 1962 年 其规模开始扩大 发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法 利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等 已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市场份额的50% 。 动物细胞大规模培养技术是生物技术制药中非常重要的环节。目前 动物细胞有悬浮培养和贴壁培养. ...
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问:A549细胞到底是如何形态?我见过三角形,近乎MDCK细胞形态的,还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下,谢谢。 ...
1.细胞种类:hepg22.1.5 2.培养天数:传代后第3天; 3.放大倍数:倒置显微镜 X10; 4.培养基种类:DMEM+10%胎牛血清+G418 5.细胞状态与特征简述:细胞贴壁生长 ,抱聚成团 初次培养细胞,请大家看看,给一下意见和建议,谢谢^^ p.s谁能告诉我图中红色箭头所指出的那坨黑乎乎的东西是什么,细胞还是污染? ...
BacteriaBacteria (cocci) @ 320x magnification. In this example the cells are the larger refractile bodies while the bacteria appear as very small dark "dots" in the spaces between the cells. ...
一、培养方法 如下图所示即为大鼠原代足细胞 按顺序:1,2是培养7天传代前的图片,小球周围爬出很多细胞。3,4是传代第二天细胞情况,过筛后仍有小的组织虑过。5,6是传代7天足细胞完全分化图片。 由于本人实验刚有进展,好多图片制作不理想,后续的细胞免疫荧光坚定在做,失败过两次,出结果后再发,不过老板说了就是足细胞!1 2345 过 ...
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以前一直认为大鼠HSCs分离在保证纯度非常高的基础上充其量最大只能得到两个皿光景的量最近分了 得了五个100mm皿密度可以纯度的话我认为是非常高了可以见图分离后48H的老板看了也认同细胞的纯度但他建议可以提高50%得率也就是要78个大皿的数量因为我实验用的是传一代细胞. 大家可以讨论讨论。请点击参加丁香园论坛 ...
培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。 我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代,16天后第二代,22天后第三代,并做a-actin免疫细胞化学鉴定。附图片。 ...
Publisher: CRCNumber Of Pages: 288Publication Date: 2006-11-06Sales Rank: 797631ISBN / ASIN: 0849339197EAN: 9780849339196Binding: HardcoverManufacturer: CRCStudio: CRCAverage Rating: Total Reviews: B ...
ACDP Advisory Committee on Dangerous Pathogens BSA Bovine Serum albumin BSE Bovine spongiform encephalopathy BVDV Bovine viral diarrhoea virus FBS Fetal bovine serum EC European Community ECACC ...
1.Basic Techniques - The “Do’s and Don'ts” of Cell Culture Given below are a few of the essential "do’s and don’ts" of cell culture. Some of these are mandatory ...