细胞技术

视频介绍的斑马鱼精子超低温保存方法由Harvey法改编而来，在原始方法的基础上引入了两处改变。首先，使用不含冷冻保护剂的冷冻介质标准化精子体积；第二，精子冷藏于冷冻管中，不再存储于毛细管，既简化了程序，又提高样品的均匀性。

全内反射荧光（TIRF）显微镜技术可用于细胞膜发生事件的研究，它能对最接近于高折射率物质（比如玻璃）的荧光分子进行选择性成像。在本视频中我们应用此技术来对从金鱼视网膜分离而来的视网膜双极细胞中突触小泡的胞吐作用进行成像。

胚胎干细胞（ESC）衍生内皮细胞移植法，可以治疗下肢血管病变(PAD)模型——单侧后肢缺血。本视频示范了移植胚胎干细胞衍生内皮细胞和非侵入性生物发光成像细胞归巢和存活过程的方法。

单细胞悬浮液是细胞分离，细胞分析和细胞培养实验的先决条件。美天旎公司推出的产品gentle MACS Dissociator（全自动组织单细胞分离器），能够让客户以安全的、省时的标准化方法方便地从小鼠脾脏组织中分离单个细胞悬液。

酿酒酵母衰老研究中通常使用两种寿命定义：复制寿命和时序寿命。复制寿命是指单个酿酒酵母细胞在死亡之前分裂产生的后代细胞数目；时序寿命是指酵母细胞在未分裂和稳定期的存活时间。本文阐述定量酵母时序寿命的高通量法。

我们示范了制备感觉-运动神经元培养物的步骤，包括成年和幼年海兔的麻醉，神经节解剖，用蛋白酶消化神经节，微解剖法移除联结组织，感觉-运动神经元的鉴定、分离和共培养等。

移植造血干细胞迁移和植入骨髓的现象称为归巢。造血干细胞归巢牵涉到多种趋化性细胞因子和受体。本文概述了经典的造血干细胞归巢方法。

电穿孔是将质粒DNA或siRNA导入原代细胞最有效的途径。Gene Pulser Mxcell电穿孔系统以及Gene Pulser电穿孔缓冲液是专为将核酸导入哺乳动物细胞及难转染的细胞而设计的。在本视频中，我们演示了如何从老鼠骨髓中制备原代造血细胞培养物，以及随后地利用Mxcell电穿孔系统进行细胞电穿孔。

视频详细描述了快速且有效地分离纯化酵母细胞线粒体的实验方案。根据这种方法纯化出来的线粒体纯度高，基本上无其它细胞器的污染，且能保持其结构和功能的完整性。

在一般情况下，胚胎干细胞分化首先是生成不成熟的祖细胞，然后再增殖和分化为成熟细胞表型。这同样适用于由胚胎干细胞衍生神经发生。

目前卵母细胞和胚胎的冷冻保存方法主要有两种：慢速冷冻和玻璃化冷冻。尽管玻璃化冷冻速度快且无需昂贵的实验设备，慢速冷冻仍是卵母细胞/胚胎冷冻保存最常用的方法。在这个视频，我们逐步讲述了如何高存活率地收集和慢速冷冻仓鼠卵母细胞。同样的程序也适用于冷冻和解冻处于不同发展阶段的小鼠胚胎。

视频展示了心脏心肌细胞的分离方法、在不饲养转基因动物的情况下心肌细胞的遗传操作以及心肌细胞内融合蛋白表达的共聚焦成像。

成年啮齿动物心脏细胞原代培养是一种重要的心血管研究模式系统。然而对于许多研究者来说，建立切实可行的成年心肌细胞培养方法不但具有技术挑战性，而且还是一个限速步骤。这里我们介绍一种高产出的成年大鼠心肌细胞培养方法。

实验和临床研究往往需要高纯度的细胞群，荧光激活细胞分选术（FACS）就是一种很好的纯化表型已知细胞群的方法。

在听觉器官研究中外植体器官的分离及体外培养已成为一个越加重要的工具，本视频示范了分离和培养新生小鼠Corti器的方法。

将演示正确的人类胚胎干细胞冷冻和解冻过程，包括快速解冻保存于液氮灌中的人类胚胎干细胞，接种至含小鼠胚胎饲养细胞的平板，缓慢冷冻人类胚胎干细胞。

氧气是许多细胞通路的关键调节剂，而目前的补氧装置各自存在着不足，因此我们组建了一个适于多孔板的微加工插入物，该补氧插入物可有效控制时间和空间上的氧气浓度，以便更好地模拟体内生理学环境。

详细描述了在细胞核内显微注射法注射cDNA至游离成年哺乳动物交感神经神经元的过程。

四转录因子强力霉素诱导性慢病毒转导系统能够诱导多种成年小鼠体细胞形成胚胎干细胞样特性的原代和次代多能干细胞（iPS ）。

介绍了经改良的雏鸡卵外培养和绒毛尿囊膜试验方法，使用此方法时小鸡存活率超过50%，且能成功应用到大量科学研究中。