细胞培养中的注意事项 1 冷冻管应如何解冻? 取出冷冻管后,须立即放入37 C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除DMSO? 除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有10 ...
Mycoplasma国内主要有三种译名,医学文献译为“支原体”(分枝原体,枝原体,类菌质体),动物医学文献译为“霉形体”或“支原体”,台湾、香港则译为微浆菌。 支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。自然界分布广泛,种类多,有80余种,分为两个属:一为支原体属(Mycoplasm ...
选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考:(1 )建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选RPMI1640 。(4) 用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实 ...
一、培养板接种和换液相关 1、6孔板接种和换液 (1)问:我的细胞传代很正常,但一种到六孔板里(不管加药和对照),总有两三个孔(随机)细胞长得不好,很小,像破碎了。有人遇到过这种情况吗?到底是啥原因呢?请各位指点 答:可能跟你加液的温度有关。如果你细胞刚刚拿出来换液加液,培养基也是从4度冰箱拿出来不久,很容易细胞就会冻死了。建议你最好把培养基先在培养箱里边孵育15 ...
细胞培养板的选择:细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。 平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择: 贴壁细胞一般用平底培养板 悬浮型细胞的培养一般用V型 U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞 大 ...
干细胞研究对于再生医学至关重要,然而,多能胚胎干细胞的取得是个备受争议的话题,诱导性多能干细胞的发展对干细胞研究及治疗更是一大进展。近年来,许多研究团队都致力于这方面的发展。而本视频将带大家深入浅出的了解这方面的研究发展过程及相关应用。诱导性多能干细胞发展及治疗应用进阶探讨 ...
基础篇-无菌操作基本技术 1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70% ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70% ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让 ...
一、常用设备 1. 准备室的设备 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台。配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)。 2. 培养室的设备 液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边 ...
微胶囊造粒技术成功用于细胞移植治疗疾病研究: 不久前,BBC报道了一则伦敦医生采用微胶囊肝细胞移植手术成功救治了一位患肝脏疾病的重症男婴的事件。肝细胞移植前首先通过微胶囊技术进行保护,包埋在海藻酸钠囊膜中,这样微胶囊细胞移植后不容易受宿主系统的免疫影响。迄今为止,这是世界首例相关研究报道。相信在不久的将来,细胞微胶囊技术,将广泛用于细胞移植或基因缺陷疾病的治疗。作为该技术的提供商,瑞士步琦很 ...
The Notch Signaling Pathway as a Mediator of Tumor Survival. 作者:Capaccione KM Pine SR. The Notch signaling pathway is evolutionarily conserved and responsible for cell fate determination in th ...
Notch信号调节乳腺干细胞 科学家发现了老鼠乳腺干细胞(MaSC)及其祖细胞群落,而这些发现大大促进了对于干细胞世系分化基因控制的研究。来自澳大利亚的Bouras等科学家发表文章称,他们发现了Notch信号途径在调控乳房干细胞功能和乳房上皮层级当中所发挥的作用。 Notch是一种跨膜的受体,它们广泛存在于各种动物细胞中。Notch信号途径对于多种组织和细胞命运非常重要,包括表皮、神经、血液和肌 ...
Notch信号通路 Notch基因最早发现于果蝇,部分功能缺失导致翅缘缺刻。在胚胎发育中,当上皮组织的前体细胞中分化出神经元细胞后,其细胞表面Notch配体Delta与相邻细胞膜上的Notch结合,启动信号通路,防止其它细胞发生同样的分化。当配体和相邻细胞的Notch结合后,Notch被蛋白酶体切割,释放出具有核定位信号的胞质区ICN,进入细胞核与CLS结合,调节基因表达。 Wnt ...
paulin98122站友:我做的是与细胞分化有关的MAPK/ERK通路,目的是为了探讨干细胞诱导分化后通路中P-ERK/ERK的变化以及在亚细胞定位。已经初步证明了干细胞的定向分化与MAPK/ERK通路有关,但还没有找到ERK在核内 的下游分子,有没有做过ERK通路的前辈能够指导一下。做信号通路成本真的很高,许多抗体用过后就不用了,做新的通路又要重新买,真希望做通路的朋友之间能够互通有无。 ...
序言:国内外关于原代培养有很多文献,不幸的是,没有一篇是详细的,没有一篇解答过why。 为了让大家少走弯路,根据我杀过3000只老鼠的经验,我把我这几年摸索的经验和大家分享,相信你follow我的这篇文章一定会做的很好。 我的标题说的很像吹牛,但是我是严肃认真的说的,I earn it。 note:这篇文章全是我个人的经验,99.9%原创,经过无数失败的 ...
Paroxymal nocturnal hemoglobinuria or PNH which manifests as increased fragility of erythrocytes leading to chronic hemolytic anemia pancytopenia (loss of blood cells of all types) and venous thrombo ...
补体的生物学功能主要包括:MAC的生物效应;活化补体片段的生物效应 (一) MAC介导的生物学效应--- 细胞裂解作用 补体系统活化 膜攻击复合物 溶解靶细胞(如:奈氏细菌等G阴性菌,异型红细胞等) 实际意义: A. 抗感染(效应旁路或MBL /效应放大经典) B. 自身免疫病(自身抗体经典) (二) 补体活化片段介导的生物学作用 1. 调理作用 Ag(颗粒性)- ...
血小板在参与血栓形成和动脉粥样硬化中起重要作用。TXA2、5HT引起血管收缩:PDGF、β-TG、PF4刺激平滑肌细胞引起动脉硬化,GPIIb/IIla纤维蛋白原受体活化引起血小板聚集,与凝血系统活化形成的纤维蛋白构成血小板栓子。 血小板粘附、聚集、释放产物、花生烯酸代谢、促凝作用及受体表达参与上述过程。在体内,狭窄血管产生的高切应力,各种细胞释放的产物以及内皮损伤等因素均可构成激活 ...
Emmanuel SURANITI1 Elodie SOLLIER2 Roberto CALEMCZUK1 Thierry LIVACHE1 Patrice MARCHE2 Marie-Bernadette VILLIERS2 Yoann ROUPIOZ1 1 CREABUMR 5819 (CEA-CNRS-UJF) DRFMC CEA Grenoble France. 2 INSERM U82 ...
原理 利用萤光染剂(bisbenzimide Hoechst 33258)侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点,即为支原体之DNA,证明有支原体之污染。 测试步骤用 ...
原理 直接培养支原体于培养基中,观察其生长及菌落生成。 特点 是目前最直接与灵敏之步骤,亦是用来评估其它侦测新步骤之标准步骤。 缺点 培养时间长,须3-5星期才能判断。有些支原体不能在培养基培养出来 (例如M. hyorhinis)。需同时培养支原体株作为正反应对照组,可能会造成污染。 材枓 dextrose、L-arginine HCl、Difco P ...