细胞技术

网络 第三节　抗独特型抗体及其在医学研究中的应用 　　针对外来抗原的抗体分子（Ab1）可变区上Id可刺激机体产生相应的抗Id抗体（Ab2）。Ab2β具有与外来抗原相似的氨基酸排列顺序或空间构型，它能够在体内模拟始动抗原的作用。应用Ab2β的这一特性，可有目的地制备Ab2β，将其作为抗原的替代物用于基础和临床医学研究。 　　一、抗独特抗体的制备 ...

网络 　　二、免疫网络的其它模型 　　Jerne的网络学说奠定的用整体的、联系的观点解释免疫调节和免疫现象的基本思想。以此免疫学说为基础，Richter、Hoffmann等又加以修改补充提出了新的网络模型。 　　Richter把各种不同的克隆称为功能单位，以Ab0、Ab1、Ab2、Ab3等表示，每一个克隆包括T细胞、B细胞、抗体分子及T细胞因子。Ab ...

网络 第二节　免疫网络学说 　　免疫网络学说最早由Jene提出，在免疫网络学说的发展过程中不断得到完善和发展。 　　一、Jerne的免疫网络学说 　　Jerne强调免疫系统中各个细胞克隆不是处于一种独立状态，而是通过自我识别、相互刺激和相互特约构成一个动态平衡的网络结构。构成相互刺激和相互特约的物质基础是独特型和抗独特型。 　　1.Jer ...

网络 　　四、抗独特型的分类 　　Bona等根据Id与抗Id的血清学反应和Ab2的功能，将Ab2分为四种类型（图9-4）。由于这种分类方法的实验依据充分，与实际应用联系密切，故应用较为广泛。 图9-4 Bona抗Id分类模式图 　　1.Ab2α　这类抗体能识别Ab上与免疫球蛋白骨架区（framework）相关的独特型决定位，Ab2α与A ...

网络 　　三 、独特型的分布 　　1974年Jerne提出把抗原决定簇称为表位（epitopeE）抗体分子上与E互补的结合部位称为补位（paratopeP）。Jerne假设一个表位可被若干种补位以不同的精密度所识别，同样，一种补位可被几种不同的表位所结合。Jerne把抗体分子上V区内存在的若干个表位称为独特位（idiotopei）如il、i2……等，并认为 ...

网络 　　三 、独特型的分布 　　1974年Jerne提出把抗原决定簇称为表位（epitopeE）抗体分子上与E互补的结合部位称为补位（paratopeP）。Jerne假设一个表位可被若干种补位以不同的精密度所识别，同样，一种补位可被几种不同的表位所结合。Jerne把抗体分子上V区内存在的若干个表位称为独特位（idiotopei）如il、i2……等，并认为 ...

网络 　　二、独特的分类 　　独特型主要是通过抗独特型抗体（anti-idiotypic antibodiesαId）的血清方法来进行分类的。 　　（一）结合点相关独特型和骨架区相关独特型 　　通过观察用αId对抗体与相应抗原分子结合是否有抑制作用，可将独特型分为两类：对抗原和抗体的结合有抑制作用的独特型，称为结合点相关独特型（idiotype ...

网络 第九章　免疫网络学说及其在医海陆空中的应用 　　1974年，Jerne根据现代免疫学对抗体分子独特型的认识，在Burnet“克隆选择学说”的基础上提出了著名的免疫网络学说（immune network theory）。该学说认为，任何抗体分子或淋巴细胞的抗原受体上都存在着独特型，它们可被机体内另一些淋巴细胞识别而刺激诱发产生抗独特型。以独特型同抗独待 ...

网络 　　四、细胞核转录因子的分离和鉴定 　　信号转导的结果是细胞核内一些转录因子同DNA上某些特定的序列结合，调节转录活性和基因的表达水平。因而分离鉴定细胞内核转录因子在信号转导研究中具有独特的意义。根据核转录因子可与一些特定的核甘酸序列结合的特点，将其特定的核苷序列标记上同位素，来鉴定信号转导中的核转录因子。核转录因子具有一些特征性的结构域，即亮氨酸拉 ...

网络 　　三、激酶活性的测定 　　信号转导过程中往往涉及多种激酶的活化，因而对这些激酶活性的测定可以作为信号转导研究中的一种重要指标。常见激酶活性的测定有PTK、PKC及PI-3K等。均有商品化的试剂盒。检测原理是根据激酶可以催化特定底物发生磷酸化，外源加入32γ-ATP，通过分离反应产物后测定放射活性，从标准曲线推算出样品酶的活性。前已提及，PKC从胞质 ...

网络 　　三、激酶活性的测定 　　信号转导过程中往往涉及多种激酶的活化，因而对这些激酶活性的测定可以作为信号转导研究中的一种重要指标。常见激酶活性的测定有PTK、PKC及PI-3K等。均有商品化的试剂盒。检测原理是根据激酶可以催化特定底物发生磷酸化，外源加入32γ-ATP，通过分离反应产物后测定放射活性，从标准曲线推算出样品酶的活性。前已提及，PKC从胞质 ...

网络 　　二、信号转导中第二信使含量的测定 　　信号转导过程中，第二信使（second messenger）含量的高低同信号传递密切相关。目前测定的第二信使主要包括细胞内Ca2+（i）、二酰基甘油（DAG）、三磷酸肌醇（IP3）以及环腺苷酸（cAMP）等。 　　1.i的测定　细胞内Ca2+的测定方法有原子吸收光谱法、离子微电极测定法、放射示踪法及标记 ...

网络 第八节　淋巴细胞信号转导研究中常用方法 　　信号转导是目前分子免疫学中研究的热点。免疫学中所涉及的信号转导主要包括淋巴细胞的信号转导以及细胞因子/细胞因子受体的信号转导，其研究手段多种多样，包括细胞生物学、分子生物学以及蛋白质化学等技术。本节将扼要介绍目前信号转导研究中常用的方法和技术。 　　一、磷酸化的信号转导分子的鉴定 　　在淋巴细胞 ...

网络 　　二、信号转导中第二信使含量的测定 　　信号转导过程中，第二信使（second messenger）含量的高低同信号传递密切相关。目前测定的第二信使主要包括细胞内Ca2+（i）、二酰基甘油（DAG）、三磷酸肌醇（IP3）以及环腺苷酸（cAMP）等。 　　1.i的测定　细胞内Ca2+的测定方法有原子吸收光谱法、离子微电极测定法、放射示踪法及标记 ...

网络 第八节　淋巴细胞信号转导研究中常用方法 　　信号转导是目前分子免疫学中研究的热点。免疫学中所涉及的信号转导主要包括淋巴细胞的信号转导以及细胞因子/细胞因子受体的信号转导，其研究手段多种多样，包括细胞生物学、分子生物学以及蛋白质化学等技术。本节将扼要介绍目前信号转导研究中常用的方法和技术。 　　一、磷酸化的信号转导分子的鉴定 　　在淋巴细胞 ...

网络 　　三、PCR介导的信号转导途径 　　BCR的交联可以激活多种酪氨酸激酶，引起许多蛋白酪氨酸磷酸化，酪氨酸激酶底物有Igα和Igβ链、LC的γ1和γ2异型、p21ras蛋白以及PI-3K等。这些分子发生要酪氨酸磷酸化后可被激活，从而介导信号的传导。B细胞活化过程中涉及到多种磷脂酰肌醇的产生及其调节（图8-16）。其中某些磷脂酰肌醇产物主要参与信号传递 ...

网络 　　三、PCR介导的信号转导途径 　　BCR的交联可以激活多种酪氨酸激酶，引起许多蛋白酪氨酸磷酸化，酪氨酸激酶底物有Igα和Igβ链、LC的γ1和γ2异型、p21ras蛋白以及PI-3K等。这些分子发生要酪氨酸磷酸化后可被激活，从而介导信号的传导。B细胞活化过程中涉及到多种磷脂酰肌醇的产生及其调节（图8-16）。其中某些磷脂酰肌醇产物主要参与信号传递 ...

网络 　　二、BCR相关联的分子 　　1.BCR与激酶相连　除了BCR/Igα/Igβ外，B细胞表面还存在着一些BCR相关联分子，参与BCR的信号转导。BCR交联后可引起Igα和Igβ的酪氨酸磷酸化，Igα和Igβ胞浆内功能区无激酶同源序列，但Igα和Igβ确与一些激酶相关联。尽管Igα和Igβ有着高度的同源性，但它们胞浆尾部连接激酶分子的种类有所不同。I ...

网络 　　二、BCR相关联的分子 　　1.BCR与激酶相连　除了BCR/Igα/Igβ外，B细胞表面还存在着一些BCR相关联分子，参与BCR的信号转导。BCR交联后可引起Igα和Igβ的酪氨酸磷酸化，Igα和Igβ胞浆内功能区无激酶同源序列，但Igα和Igβ确与一些激酶相关联。尽管Igα和Igβ有着高度的同源性，但它们胞浆尾部连接激酶分子的种类有所不同。I ...

网络 第七节　经B淋巴细胞抗原受体介导的信号转导分子基础 　　B淋巴细胞是另一群重要的免疫活性细胞，它有两个基本的功能：一方面作为免疫效应细胞直接参与免疫应答，介导体液免疫；另一方面作为特异性的抗原提呈细胞选择性地捕获抗原并提呈给T细胞，协同和调节T细胞免疫应答。B细胞以上的两个基本功能是通过其表面的抗原受体所介导。B细胞抗原受体的信号介导由许多分子参与， ...