细胞技术

一、胰蛋白酶（trypsin）溶液 胰蛋白酶是白色或淡黄色粉末，低温干燥保存。主要作用是使细胞间的蛋白质水解，使细胞离散。其活性以其消化酪蛋白的能力进行测定。常用1:250（1:500）方法表示，即1份胰蛋白酶可以消化250份（或500份）酪蛋白。胰蛋白酶对细胞的分离作用与细胞的类型和细胞的性质关系密切。不同细胞系对胰蛋白酶溶液的浓度、温度和作用时间等的要求也不相同。 无钙镁离子的 ...

贴壁细胞和非贴壁细胞都适用。所有操作在无菌条件下进行。避免污染细胞，因为微生物污染也会还原alamarBlueTM，培养基中应添加抗生素如青霉素G（1U/ml）、两性霉素B（amphotericin B，0.0025ug/ml）。氧化还原指示剂是pH敏感的，推荐使用磷酸缓冲液。10％胎牛血清对比色法检测无影响，但是会淬灭部分荧光；因此，用荧光法检测时对照溶液中需添加10％BSA。酚红对检测也有一 ...

1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每 次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间 污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间 隔应让无菌操作台运转1 ...

Dye exclusion a cell suspension is mixed with trypan blue and examined by low-power microscopy Materials cells PBS M3 h ...

常用设备准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录）。必须放在无菌间的 ...

细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆（集落）形成法、3H放射性同位素掺入法、MTT法等。其中MTT法以 其快速简便，不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但MTT法形成的Formazan为水不溶性的，需要加有机溶 剂溶解，由于在去上清操作时会有可能带走小部分的Formazan，故有时重复性略差。为了解决这个问题，研究人员又开发了很多种水溶性的四氮唑盐类：如 XT ...

1.保存血清最好的办法？我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。2.如何解冻血清才不会使产品质量受损？我们建议您将血清从冷冻箱中取出后，先置于2-8℃冰箱中使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。3.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理？血清中沉淀物的出现有许多原因，但最普遍的原因是由 ...

做MTT时药不溶于培养基怎么办答：用DMSO（二甲基亚枫）溶解MTT，再与培养基混合试试答：加入DMSO，摇床使其溶解 (责任编辑：大汉昆仑王) ...

红细胞裂解液（Tris-NH4Cl）：称取3.735g氯化铵、三羟甲基氨基甲烷（Tris）1.3g加水溶解并稀释至500ml。0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存。细胞悬液加红细胞裂解液后，混匀静止4-5分钟，待红细胞完全破碎，1000r/min离心5分钟，弃上清去除红细胞，得到白细胞沉淀。结果第一次用的时候，觉得还可以，第二次和第三次用的时候离心后发现有絮状物质，不能很好的沉淀出白细胞。 ...

在研究体内及体外的免疫系统时，分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清，所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力，从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵，而且操作简便，所需要的条件也不高，是一种非常实用的方法。(在此我向各位解释一下，现在分离T细胞的方法主要是三种，流式 ...

在研究体内及体外的免疫系统时，分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清，所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力，从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵，而且操作简便，所需要的条件也不高，是一种非常实用的方法。首先要指出的是实验中所使用的是分离T细胞专用的尼龙毛( ...

（一）原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时，B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上，而多数T细胞则通过尼龙毛柱，这是获得富含T细胞群的有效方法。（二）材料及试剂1．尼龙毛（Nylon Wool Fiber）。2．烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。3．装填尼龙毛柱，一次性注射器。4．取自然沉降的上层血浆，过聚蔗糖—泛影葡胺分层液后，获取的血浆和分层液之间的单个核细胞层 ...

通常需对不同样品抗原的总量进行比较或确定样品中是否存在待测抗原。在此过程中，细胞、组织或其他样品均直接用样品缓冲液破碎，当样品中的染色体DNA被剪切成短片段后，经适当处理即可用于特定的电泳系统。在本例中，样品是以适合于标准的Tris／GlycineSDS-PAGE方式制备的。某些样品需经剪切处理染色体DNA降低其溶液黏度，最简便的方法是超声处理，用浸入式探头或杯型超声器均可。1．对照免疫印迹从细胞 ...

产品描述DMSO(二甲基亚砜)属于非质子极性溶剂，常用于化学反应、PCR反应以及在细胞、组织和器官的保存中用作玻璃化低温冷冻防护剂。DMSO用于细胞冷冻培养基内，可以保护细胞免受冰晶引起的机械性损伤。它也可以用于主培养、亚培养、重组异倍体、杂交瘤等系列细胞株，胚胎干细胞（ESC）和造血干细胞的冷冻保藏。另外常常与BSA或FBS混合使用。用途（1）DMSO广泛应用在人、动物细胞株及细菌噬菌体&lam ...

英文名称： Dimethyl Sulfoxide中文名称： 二甲基亚砜Molecular Weight：78.13344 Molecular Formula：C2H6OSH-Bond Donor：0H-Bond Acceptor：1Formal Charge：0Complexity：29品种有：工业级二甲基亚砜、药用级二甲基亚砜、外用药级二甲基亚砜、无水级二甲基亚砜、试剂级二甲基亚砜 ...

问题1：培养液pH 值变化太快可能原因（1）CO2 张力不对（2）培养瓶盖拧得太紧（3）NaHCO3缓冲系统缓冲力不足（4）培养液中盐浓度不正确（5）细菌、酵母或真菌污染建议解决方法（1）按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2 浓度，2.0g/L 到3.7g/L 浓度NaHCO3对应CO2浓度为5％ 到10％。（2）松开瓶盖1/4 圈。（3）改用不依赖CO2 培养液。加HEPES ...

什么是CIK？CIK，即cytokine induced killer的简称，中文称之为“细胞因子诱导性杀伤细胞”。CIK是一种高效杀伤活性的异质性细胞群，是一种新型高效的具有广谱杀肿瘤、病毒活力的MHC非限制性的免疫效应细胞，具有增发殖速度快、显著杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞，清除病毒的活性。CIK细胞疗法是过程性免疫疗法之一，是目前抗肿瘤，抗乙肝、丙肝治疗最新、最好的免疫治疗方法。CIK细胞抗肿 ...

【摘要】 目的 比较无血清培养基（AIMV）与完全培养基（CM）体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。方法 分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFNγ、IL2、IL1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞，比较细胞的增殖能力、细胞表型及分泌细胞因子水平。结果 与完全培养基比较，无血清培养基培养的CIK细胞增殖高峰较晚(14～17天) ...

摘要 在无血脑心浸液卵黄琼脂培养基(BHI-EA)的基础上进行改良，建立一新型快速、简便的幽门螺杆菌(Helicobacter pyloriHp)无血脑心浸液卵黄琼脂培养基(BHI-EA)。应用此改良培养基和含血脑心浸液培养基(BHIA)分别对82例胃粘膜标本进行分离培养，对两者在Hp阳性培养率、分离时间及Hp纯培养速度方面进行比较。改良培养基分离Hp阳性率为70%(57/82)，脑心浸液血培养基 ...

大家好：请问有人用过GIBCO的neurobasal 培养基吗？这种培养基PH值是7.1，渗透压是225，但是很容易就变碱了，GIBCO公司建议不加HEPES，你们遇到过这种情况吗〉、？怎么处理的答1：我们一直用GIBCO的neurobasal培养基，也碰到类似的情况，用一段时间后，培养基的颜色明显和刚买来的时候不一样，变红很多，但我感觉下来对细胞影响不大，并没有碰到细胞养不好的情况。我们是用时和 ...