细胞技术

相关专题 不可不知的细胞检测方法——MTT mtt主要有两个用途 1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定; 2.细胞增殖及细胞活性测定。 检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲 ...

相关专题 不可不知的细胞检测方法——MTT 通常，此法中的MTT 浓度为5mg/ml。因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。 需要注意的是，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活 ...

相关专题 不可不知的细胞检测方法——MTT 细胞过了30代以后就不要用了因为状态不好了;培养板要用好的(最好进口板)，不好的板或重复利用的板只可做预实验。 接种时最好按照预实验摸索出的密度接种 因为细胞密度在10000/ml左右时，所测得的OD值的区间即细胞抑制率(或者增值率)的所呈现的线性关系最好，结果最可信。如果铺的太稀细胞的杀伤不会很明 ...

相关专题 不可不知的细胞检测方法——MTT 1. Fen细胞培养于含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中，在25cm2培养瓶中生长到接近汇合。用含0.05%胰蛋白酶，0.02% EDTA的PBS消化细胞5分钟，洗涤后，用细胞培养液将细胞配成1×105/ml。 2. 取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml细胞悬液，在37℃ 5% CO2的饱 ...

相关专题 不可不知的细胞检测方法——MTT 1．取96孔细胞培养板，每孔中加0.1ml含2×104～10×104靶细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2～3小时让细胞帖壁（如果是悬浮细胞可直接进行下一步） 2．用RPMI-1640培养液2～10倍递次稀释细胞因子标准品 ...

相关专题 mtt原理 MTT全称为3-(45)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-35-di- phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。 MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中 ...

相关专题 Invitrogen—全球领先的生命科技公司 说到转染，Invitrogen认第二，没人敢认第一。这么多年来，Invitrogen一直保持着转染市场的领先地位，而L2K(Lipofectamine 2000)对于做转染的人来说也几乎是无人不晓。当然，Invitrogen并没有躺在功劳簿上睡大觉，为顺应新的研究趋势，它在近几年推出了一 ...

相关专题 话说转染技术的不断进步使得转染成为将DNA导入真核细胞的主流技术，这里不能不提全球生命科学领域最有影响力之一的供货商――Invitrogen。阳离子脂质体成为市场最为人熟知的转染产品，主要是由于Invitrogen引以为傲的Lipofect——系列产品，这一系列的巨大成功使得“Lipofect___”这个名字在做转染的人中几乎无 ...

相关专题 MEM细胞培养基胎牛血清产品选择指南 MEM培养基在解冻后出现白色沉淀，加入胎牛血清使用后，沉淀逐渐增多，是怎么回事?应该怎么办呢? 1.如果是解冻完全并且缓慢解冻，就要问问公司了。我们之间碰到血清解冻后出现絮状沉底的情况，不过还可以用。其实这些都是蛋白质，可能是变性了。 2.培养基一般4度存放，不要冻存，白色物质很可能是氨基酸析出 ...

相关专题 MEM细胞培养基 GIBCO的MEM粉末包装上面有写：含谷氨酰胺，非必需氨基酸，但是不含碳酸氢钠，没有注明加碳酸氢钠的量。我是用的10%的血清的培养基，是不是配制培养基的时候用900ML的双蒸水就好了呢?需要加碳酸氢钠多少?还需要补充一些什么成分呢? 仔细看看MEM粉末的外包装标签，上面会有加碳酸氢钠的要求。如果没有，大包装盒上一定 ...

相关专题 MEM细胞培养基 MEM培养基中文使用说明书 1、保存在2-8度干燥环境，避光。 2、称量出比最终容积小5%的蒸馏水，混合的容器尽可能接近最终容积。 3、将干粉加入到室温15到30度的水中，轻柔搅拌，勿用热水。 4、冲洗出包装袋内所有干粉。 5、每升培养基加入2.2g碳酸氢钠。 6、用水稀释至最终的容积，搅拌直至溶解。不要过分混合。 ...

相关专题 细胞培养基的配制细胞培养专题MEM细胞培养基 MEM(A) 细胞培养基(粉末型)成分 ...

相关专题 MEM细胞培养基 细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了，但却不是最简单的。别小看细胞培养，这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好，转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多，让我们先从培养基和血清说起。 经典的培养基有很多种，Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigm ...

相关专题 细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于一196~C液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和 ...

相关专题 细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了，但却不是最简单的。别小看细胞培养，这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好，转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多，让我们先从培养基和血清说起。 经典的培养基有很多种，Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提 ...

相关专题 牛血清白蛋白(BSA)，又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。 用途 1、用于生化研究、遗传工程和医药研究 2、用作医药保健食品、调味品 3、维持渗透压、p ...

相关专题 MEM细胞培养基 配的MEM培养液，4度搅拌过夜后冻存，(GIBICO含非必需氨基酸)，冻融后有好多沉淀，结晶状。碳酸氢钠加的量稍微少了一点，会是它的问题吗?补充：培养液没有污染，不知道这些结晶对细胞生长会不会有影响? 问题分析： 1.配MEM不需要4度搅拌过夜吧，更不需要冻存。Gibco的粉剂溶于超纯水并充分搅拌，再加其他该加的东 ...

相关专题 它们都是BSA 根据个人及同事经验，总结了以下几点供大家分享，有不对的地方还望高人指点，不甚感激! 一、使用等级划分 牛血清白蛋白等级从低到高 ： 牛血清白蛋白， 牛血清白蛋白第五组分， 牛血清白蛋白(无必须脂肪酸)， 牛血清白蛋白(无蛋白酶)， 牛血清白蛋白(细胞培养级)， 金标级牛血清白蛋白， 交联牛血清白蛋白。 二、各等级BS ...

相关专题 一、仪器与试剂 1. TdT酶(25U/μl); 2. 生物素标记的-dUTP(Biotin-dUTP)或地高辛标记的dUTP (Digoxingening-11-dUTP)1nmol/μl; 3. 反应缓冲液; 4. 洗涤缓冲液; 5. 异硫氰酸荧光素(FITC)标记的亲合素或链霉亲合素 (2.5μg/ml)或 ...

相关专题 生物帮之抗体制备 摘要： 从人脐静脉分离的内皮细胞经培养后免疫Balb/c小鼠，利用小鼠杂交瘤技术，建立了一株持续分泌抗人内皮细胞单克隆抗体的杂交瘤。对其进行了较系统的鉴定，其抗体类别为IgG1。该单抗特异性地识别人内皮细胞，而与血细胞无交叉反应。 关键词：单克隆抗体，内皮细胞 前言： 血管内皮细胞具有多种生理功能，参与机体的凝血， ...